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传染性喉气管病毒分离鉴定及遗传进化分析
2025年
荆州某场出现了疑似传染性喉气管病毒(ILTV)感染,为确定该病病因,用PCR初步检测传染性喉气管病毒为阳;将阳病料经处理后接种于SPF胚绒毛尿囊膜,传至5代,收集出现痘斑和增厚的绒毛尿囊膜及尿囊液,对其进行PCR检测、病毒滴度测定及动物回归试验。确定分离到1株ILTV毒株,命名为JZCD202302株。参照GenBank公布的传染性喉气管病毒WG株设计了gB、gC、gD、gE、gK、TK基因特异引物,用MEGA6.0软件绘制了遗传进化树。gB-gC-gD-gE-gK-TK串联进化树分析结果显示,该毒株与澳大利亚疫苗相关野外重组流行毒株7b、ACC78、CL9和实验室疫苗重组株ILTV.157/19亲缘关系最近。
袁辉刘丹刘敏吴琼李凌丹宾晨李伟李国攀陈红心周启立熊涛
关键词:鸡传染性喉气管炎病毒
检测传染性喉气管病毒的组合物及其应用
本发明检测传染性喉气管病毒的组合物及其应用,属于微生物的测定或检验方法其所用的组合物技术领域。本发明公开了试剂或试剂盒在检测或辅助检测传染性喉气管病毒中的应用,所述试剂或试剂盒包括传染性喉气管病毒引物探针,所...
谢芝勋谢志勤张艳芳范晴谢丽基 万丽军罗思思李孟
1株传染性喉气管病毒的分离鉴定及致病评价
2024年
研究旨在为当前国内传染性喉气管病毒(infectious laryngotracheitis virus,ILTV)的流行情况调查及相关疫苗研发提供参考。河南省濮阳市某养场的蛋疑似感染ILTV,将阳病料处理后接种胚绒毛尿囊膜,盲传3代后产物进行PCR鉴定和TK、gD基因序列测定分析,并通过动物回归试验初步研究分离株的致病。结果显示,盲传3代后绒毛尿囊膜出现痘斑、增厚现象,产物PCR鉴定结果为阳,将其命名为PY株。PY株TK、gD核苷酸序列与GenBank发表的ILTV序列相似分别为99.4%~100.0%、99.1%~100.0%。49日龄SPF于攻毒后第3 d出现传染性喉气管的典型临床症状,剖检病死可见气管内充满血样黏液。攻毒后发病率为100%、死亡率为30%。研究表明,分离株PY株是一株致病力较强的ILTV。
张亚胡小飞田辉段佳蕾田克恭张云静张海洋逄文强
关键词:鸡传染性喉气管炎病毒TK基因GD基因
传染性喉气管病毒微滴式数字PCR定量检测方法的建立
2024年
旨在建立检测传染性喉气管病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)绝对定量方法。根据已发表的ILTV的TK基因序列,针对其保守区域分别设计1对特异引物和1条探针,建立检测ILTV的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)方法,并评价其特异、敏感和重复。结果显示,建立方法的最佳引物浓度为20μmol/μL,最佳探针浓度为10μmol/μL,最佳退火温度为56℃。特异检测结果显示,建立的方法只检出ILTV,没有检出其他病原株。敏感检测结果显示,采用建立的方法定量检出ILTV重组质粒标准品的最低限为4.6拷贝/μL。对3个连续稀释的pMD18-ILTV重组质粒DNA进行检测,3次重复检测结果的变异系数均小于5%。对83份病拭子、肺及脾组织样品进行检测,采用建立的ddPCR检出ILTV阳样品10份,荧光定量PCR检出ILTV阳样品9份,ddPCR的阳检出率(12.05%)高于荧光定量PCR的阳检出率(10.84%)。结果表明,建立的ddPCR方法定量检测ILTV特异强、敏感高、重复好,为绝对定量检测ILTV提供更好的技术支撑。
谢志勤谢芝勋张艳芳范晴谢丽基万丽军罗思思李孟张民秀曾婷婷黄娇玲王盛李丹韦悠李小凤任红玉阮志华
关键词:鸡传染性喉气管炎病毒
MAPK信号通路在传染性喉气管病毒感染中的作用与机制研究
传染性喉气管病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)是持续危害我国和全球家禽养殖业的主要传染病病原之一。ILTV属于疱疹病毒科(Herpesviridae),α疱疹病毒亚...
崔露
关键词:鸡传染性喉气管炎病毒P38MAPK通路细胞代谢
传染性喉气管病毒分离株gB与gD蛋白融合表达及免疫效果评价
袁辉
传染性喉气管病毒gD蛋白单克隆抗体、其杂交瘤细胞株及应用
本发明公开了一种特异识别传染性喉气管病毒gD蛋白的单克隆抗体。本发明还公开了传染性喉气管病毒抗体检测试剂盒,以及上述单克隆抗体在制备预防和/或治疗传染性喉气管的药物中的应用。本发明抗传染性喉气管病毒单克...
李泽君 张志飞 崔利兵 苑纯秀 刘芹防 滕巧泱 闫大为 许榜丰 潘学
传染性喉气管病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用
2024年
传染性喉气管病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)以往多感染蛋,近年来在蛋种、商品肉中连续多发,表明该病毒感染谱有扩大风险,因此有必要加强对ILTV的监测。为建立高效、灵敏的ILTV检测方法,本研究以ILTV的TK基因为靶基因设计引物,扩增并构建pMD18-T-TK质粒标准品,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法和标准曲线,对其特异、敏感和重复进行验证,并对临床疑似病例进行检测。结果发现,该检测方法特异良好,与其他常见症状相似病原无交叉反应;最低检测浓度为1.55拷贝/μL,灵敏度是普通PCR方法的10倍;重复好,批内、批间变异系数在0.79%~1.83%之间。表明本研究建立的ILTV实时荧光定量PCR方法特异强、灵敏度高,可为ILTV的临床诊断和流行病学研究等提供有效的检测方法。
张玉霞董雯雯袁小远孟凯徐怀英
关键词:TK基因实时荧光定量PCR
表达传染性喉气管病毒gD蛋白的重组嵌合型新城疫病毒La Sota株的构建
2024年
为构建表达传染性喉气管病毒(ILTV)糖蛋白D(gD)的重组新城疫病毒(NDV)La Sota株,本研究将ILTV强毒株gD基因胞外域与NDV F基因信号肽、跨膜域和胞质尾区融合,并插入到含有NDV基因VII型F和HN基因的嵌合型La Sota株感染cDNA克隆pLa Sota-VIIF/HN的P和M基因之间,将获得的重组感染克隆pLa Sota-VIIF/HN-gD与辅助质粒pCIneo-NP-P-L共转染BHK-21细胞,拯救出表达gD蛋白的重组嵌合型NDV La Sota株rLaSota-VIIF/HN-gD,并采用血凝试验鉴定正确后,将重组病毒在9日龄SPF胚中连续传至10代,提取10代重组病毒基因组RNA,反转录成c DNA作为模板,以ILTV gD基因插入位点两侧的鉴定引物进行PCR鉴定;采用第10代重组病毒感染BHK-21细胞,以ILTV gD蛋白多克隆抗体作为一抗进行间接免疫荧光试验(IFA);分别对红细胞吸附的重组病毒感染的胚尿囊液上清和从红细胞上解离下来的纯化的重组NDV病毒粒子经western blot鉴定,并对重组病毒胚的致病和在胚中的复制动态进行初步研究。PCR结果显示ILTV gD基因能够在重组病毒中稳定存在;IFA和western blot鉴定结果显示,重组病毒能够正确表达ILTV的gD蛋白,而且gD蛋白嵌合表达在重组病毒颗粒上。胚致病试验和胚中的复制动态试验结果显示,重组病毒保持了La Sota疫苗株的低致病和良好的复制特,rLaSota-VIIF/HN-gD的胚平均死亡时间(MDT)为168 h,1日龄雏脑内接种该重组病毒的致病指数(ICPI)为0.20,胚半数感染量(EID_(50))峰值可达10^(-8.66)/100μL。本研究所制备的重组病毒r LaSota-VIIF/HN-gD为研制基因VII型NDV和ILTV的二联活疫苗奠定了基础。
田静格徐鸣荷王向东张意航李岩刘俊杰李星雨韩城昊张伯顺卜德新于春梅丛雁方杨盼盼乔麒龙王增李建丽李永涛王白玉赵军
关键词:传染性喉气管炎病毒二联活疫苗
宿主p53和Fos协同调控传染性喉气管病毒极早期基因ICP4转录机制的研究
刘柘一

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崔保安
作品数:627被引量:2,317H指数:23
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研究主题:克隆 猪细小病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 原核表达 克隆与序列分析
陈红英
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供职机构:河南农业大学
研究主题:克隆 猪细小病毒 猪圆环病毒2型 克隆与序列分析 猪伪狂犬病毒
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作品数:269被引量:827H指数:16
供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
研究主题:传染性喉气管炎病毒 重组鸡痘病毒 单克隆抗体 猪繁殖与呼吸综合征病毒 传染性喉气管炎
王玫
作品数:130被引量:420H指数:12
供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
研究主题:重组鸡痘病毒 传染性喉气管炎病毒 传染性喉气管炎 GB基因 鸡传染性喉气管炎病毒
童光志
作品数:885被引量:3,847H指数:30
供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所
研究主题:猪繁殖与呼吸综合征病毒 PRRSV 传染性喉气管炎病毒 单克隆抗体 重组鸡痘病毒