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车叶草苷对少弱精症大鼠抗氧化应激及抗细胞凋亡的作用机制研究
2024年
目的:探讨车叶草苷(ASP)对少弱精症大鼠抗氧化应激及抗细胞凋亡的作用机制。方法:通过灌胃奥硝唑建立少弱精症大鼠模型,将SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、车叶草苷组(60 mg/kg)和通路抑制剂(第3周腹腔注射2 mg/kg)+车叶草苷组,每组10只。检测大鼠精子参数;酶联免疫吸附试验法检测血清丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;实时萤光定量聚合酶链式反应法检测睾丸组织B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(Bax)和核因子E2相关因子2(Nrf2)基因水平;蛋白质免疫印迹法检测睾丸组织Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)、Nrf2和血红素加氧酶1(HO-1)水平。结果:与对照组比较,模型组精子活力、精子浓度、GSH-Px、GSH、SOD、Bcl-2、Keap1、Nrf2、HO-1水平下降(P<0.05),MDA和Bax水平上升(P<0.05);与模型组比较,车叶草苷组精子活力、精子浓度、GSH-Px、GSH、SOD、Bcl-2、Keap1、Nrf2、HO-1水平上升(P<0.05),MDA和Bax水平下降(P<0.05)。结论:ASP能有效改善少弱精症大鼠精子活力、精子浓度,减少睾丸组织细胞的凋亡,改善氧化应激损伤,Keap1/Nrf2信号通路的激活可能是其作用机制。
张敏颜峰张泰宁王雪楠
关键词:精子活力氧化应激少弱精症细胞凋亡
原儿茶醛对环磷酰胺诱导急性肾损伤的保护作用及机制研究被引量:1
2024年
目的研究原儿茶醛对环磷酰胺(CTX)所致急性肾损伤的预防作用及其机制。方法将24只SPF级雄性昆明种小鼠随机分为对照组、模型组及原儿茶醛低、高剂量(15、30mg·kg^(-1))组,每组各6只。对照组和模型组ig给予0.9%氯化钠溶液,原儿茶醛低、高剂量组每日1次ig对应药物。连续给药14d,末次给药1h后,除对照组外,其余各组单次ip给药CTX(200mg·kg^(-1))。次日,在称体质量麻醉后取血和肾脏,分离血清,检测小鼠血清肌酐(CRE)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)等生化指标;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏病理损伤情况;采用荧光染色检测小鼠肾脏TUNEL的表达情况;采用Westernblotting检测B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(BAX)等凋亡相关蛋白的表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠的肾脏指数显著降低(P<0.01);血清CRE水平显著升高(P<0.001);血清SOD、CAT、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平显著降低(P<0.05、0.01、0.001),丙二醛(MDA)水平显著升高(P<0.01);模型组小鼠肾脏细胞排列错乱、可见明显的炎症细胞浸润,伴随肾小管空泡变性和肾小管扩张;模型组小鼠肾脏TUNEL阳性表达显著增多(P<0.001);且肾脏天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)和Bcl-2的表达显著下降(P<0.01、0.001),而cleaved-Caspase3、BAX蛋白的表达显著上升(P<0.01、0.001)。与模型组比较,原儿茶醛低、高剂量组小鼠肾脏指数均显著增加(P<0.05);原儿茶醛高剂量组小鼠血清中的CRE水平明显降低(P<0.001);原儿茶醛低、高剂量组小鼠血清中SOD、CAT、GSH-Px水平显著上升(P<0.05、0.01、0.001),MDA水平显著下降(P<0.05;原儿茶醛低、高剂量组肾脏组织细胞排列比较规整,炎症细胞浸润及肾小管空泡变性和肾小管扩张等病理改变少见;原儿茶醛低、高剂量组肾脏TUNEL阳性表达有所下降(P<0.01、0.001),Caspase-3和Bcl-2蛋白表达显著上升(P<0.05、0.01、0.001)),cleave
张景富肖雨何继江宋嘉亮白梓煊高思齐杨世瑜李继安储金秀
关键词:原儿茶醛环磷酰胺急性肾损伤
牦牛热休克蛋白B11通过抗凋亡缓解热应激对肾细胞的体外损伤
2024年
热休克蛋白B11(Heat shock protein beta‑11,HSPB11)是小热休克蛋白家族的成员之一,具有抗凋亡、促进细胞存活和维持细胞形态等功能。在热应激条件下,自噬失调是急性肾损伤、肾损伤修复不全及慢性肾脏疾病的发病机制之一,而肾细胞的基础自噬是维持肾脏稳态、结构和功能的关键。为探讨牦牛HSPB11对热应激牛肾细胞(Madin Darby Bovine Kidney,MDBK)活性和凋亡的作用,本研究将MDBK细胞分为对照组、热应激组和处理组,采用PCR扩增、生物信息学分析、原核表达载体构建、CCK‑8法、吖啶橙染色法、荧光酶标仪检测、荧光定量PCR等方法。扩增得到牦牛HSPB11目的片段757 bp;构建的系统进化树显示,牦牛与黄牛HSPB11的相似性高达99%;成功构建pET‑32a‑HSPB11重组质粒,表达获得约35 kDa的牦牛HSPB11;筛选得到牦牛HSPB11最佳浓度为10.0μg/mL,作为处理组HSPB11浓度。研究结果显示,对照组细胞相对活性极显著高于热应激组(P=0.004),处理组细胞相对活性极显著高于热应激组(P<0.001)。热应激组细胞出现收缩、细胞核裂解呈现碎片状,处理组少见细胞裂解。此外,热应激组MDBK细胞核酸荧光强度均极显著高于对照组和处理组(P<0.001)。热应激组caspase‑3、caspase‑9、Bcl‑2的mRNA表达量极显著高于对照组和处理组(P<0.001)。综上,推测牦牛HSPB11通过凋亡途径缓解热应激对MDBK细胞损伤,为探究牦牛HSPB11的功能提供基础资料。
孟德飞张康友颜勇魏玲泽仁翁姆丁则德米黄建钧梅群弟张楠驰魏勇王利
关键词:热应激凋亡
抗凋亡相关分子BAG3在宫颈癌及癌前病变中的表达及临床意义
2024年
目的抗凋亡相关分子BAG3在宫颈癌及癌前疾病发生病变中的表达及临床意义。方法收集自贡市第一人民医院病理科2021年1月至2023年1月收治的宫颈癌患者54例临床资料,年龄<45岁7例,年龄≥45岁47例。采用免疫组织化学染色法检测宫颈癌组织及癌旁组织中BAG3蛋白表达水平,分析抗凋亡相关分子BAG3在不同病理组织中和各组宫颈病变中的表达情况;分层回归分析不同临床病理特征抗凋亡相关分子BAG3表达水平;广义线性混合效应模型分析抗凋亡相关分子BAG3影响因素与宫颈癌患病的关系;利用TIMER数据库分析抗凋亡相关分子BAG3的表达与免疫微环境因子的关系;利用交互作用分析抗凋亡相关分子BAG3的表达和免疫微环境因子对宫颈癌的影响。结果免疫组织化学检测结果显示,抗凋亡相关分子BAG3在宫颈癌组织中的阳性表达率高达84.21%。分析临床病理参数的关系可得BAG3的表达与年龄、病理分级、淋巴结转移、浸润肌层深度、肿瘤直径具有相关性。水平分层回归分析可得BAG3的表达相关因素会对BAG3分子表达产生显著的负向影响关系。广义线性混合效应模型分析BAG3的表达相关因素与宫颈癌预后存在统计学关联。利用TIMER数据库分析可得BAG3有可能通过改变肿瘤微环境中免疫细胞的功能来促进宫颈癌转移。交互作用分析可得抗凋亡相关分子BAG3的表达×免疫微环境因子对宫颈癌具有相加交互作用。结论BAG3在宫颈癌中的高表达,影响患者的预后,BAG3有望作为宫颈癌的诊断标志物,以及宫颈癌转移的特征性标志物。
李峰程姣李小红余婕媛卓俊菊
关键词:宫颈癌癌前病变
Effects of torularhodin against acetaminophen induced liver injury base on antioxidation, anti-inflammation and anti-apoptosis
2023年
Oxidative stress,inflammatory,and excessive apoptosis are the crucial culprits of drug-induced liver injury(DILI).Torularhodin was judged to have good potential to intervene DILI due to its antioxidant and immunomodulation activity.The aim of this study was to clarify the preventive effect of torularhodin on hepatic injury caused by acetaminophen(APAP)and its mechanism in mice.The liver injury model of mice was established by injecting APAP into the tail’s veins to evaluate the intervention effect of torularhodin on liver injury.The mechanisms involved were investigated using Western blot and transcriptome analysis.The results reflected that torularhodin significantly increased antioxidant enzyme capacities(Compared with the group Dam,the activities of SOD and GSH-Px in the group TorH increased by2.47 and 3.79 times,and the content of MDA decreased by 58.78%,respectively p<0.05),alleviated inflammation(Compared with the group Dam,the contents of TNF-α,IL-1β and IL-6 in the group TorH increased by 61.98%,64.93%and 58.49,respectively,p<0.05)and improved the pathological condition of liver in mice.Transcriptomic result indicated that differential genes caused by the intervention of torularhodin were mainly involved in cell metabolism processes,immunomodulation and apoptosis.Western blot results confirmed that torularhodin could inhibit hepatocyte apoptosis by regulating signaling pathways including PI3K/Akt/mTOR and Nrf2/HO-1 to increase antioxidant enzyme activity,thus intervening in DILI.It suggested that torularhodin might provide a promising preventive strategy for DILI.
Jiayi LiHe QianFuwei Pi
关键词:ANTI-INFLAMMATION
An optimal medicinal and edible Chinese herbal formula attenuates particulate matter-induced lung injury through its anti-oxidative,anti-inflammatory and anti-apoptosis activities被引量:1
2023年
Objective:Identifying novel strategies to prevent particulate matter(PM)-induced lung injury is crucial for the reduction of the morbidity of chronic respiratory diseases.The combined intervention represented by herbal formulae for simultaneously targeting multiple pathological processes can provide a more beneficial effect than the single intervention.The aim of this paper is therefore to design a safe and effective medicinal and edible Chinese herbs(MECHs)formula against PM-induced lung injury.Methods:PM-induced oxidative stress,inflammatory response and apoptosis A549 cell model were used to screen anti-oxidant,anti-inflammatory and anti-apoptotic MECHs,respectively.A network pharmacology method was utilized to rationally design a novel herbal formula.Ultra performance liquid chromatography-mass spectrometer was utilized to assess the quality control of MECHs formula.The excretion of magnetic iron oxide nanospheres of the MECHs formula was estimated in zebrafish.The MECH formula against PM-induced lung injury was investigated with mice experiments.Results:Five selected herbs were rationally designed to form a new MECH formula,including Citri Exocarpium Rubrum(Juhong),Lablab Semen Album(Baibiandou),Atractylodis Macrocephalae Rhizoma(Baizhu),Mori Folium(Sangye)and Polygonati Odorati Rhizoma(Yuzhu).The formula effectively promoted the magnetic iron oxide nanospheres excretion in zebrafish.The mid/high dose formula significantly prevented PM-induced lung damage in mice by enhancing the activity of SOD and GSH-Px,reducing the MDA and ROS level and attenuating the upregulation of pro-inflammatory cytokine(IL-6,IL-8,IL-1βand TNFa),down regulating the protein expression of NF-κB,STAT3 and Caspase-3.Conclusion:Our findings suggest that the effective MECHs formula will become a novel strategy for preventing PM-induced lung injury and provide a paradigm for the development of functional foods using MECHs.
Huan ZhangJun KangWuyan GuoFujie WangMengjiao GuoShanshan FengWuai ZhouJinnan LiAyesha T.TahirShaoshan WangXinjun DuHui ZhaoWeihua WangHong ZhuBo Zhang
黄芪甲苷对急性肝衰竭小鼠抗氧化、抗凋亡机制探讨被引量:6
2023年
目的研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对急性肝衰竭小鼠转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧化酶-1(HO-1)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响,并探讨其抗氧化、抗凋亡的作用机制。方法将50只C57BL6雄性小鼠随机分为正常组,模型组,低、中、高剂量AS-Ⅳ组,每组10只。低、中、高剂量AS-Ⅳ组分别给予50、150、500 mg/(kg·d)AS-Ⅳ预处理3天,正常组和模型组仅给予助溶剂预处理,然后正常组腹腔注射生理盐水,余4组分别给予D-GalN/LPS腹腔注射建立急性肝衰竭小鼠模型。留取肝组织病理标本,采用Western Blot和RealTime PCR技术检测各组Nrf2、HO-1、Bcl-2、Bax、半胱氨天冬蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白及m RNA的表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠肝组织Nrf2、HO-1、Bcl-2/Bax蛋白及mRNA表达降低(P<0.01),Caspase-3蛋白及m RNA表达增加(P<0.01)。与模型组比较,低剂量AS-Ⅳ组小鼠肝组织Nrf2蛋白及HO-1、Bcl-2/Bax蛋白及mRNA表达增加(P<0.01),Caspase-3蛋白及mRNA表达减低(P<0.01);中剂量AS-Ⅳ组Nrf2 mRNA及HO-1、Bcl-2/Bax蛋白及mRNA表达增加(P<0.05,P<0.01),Caspase-3蛋白及m RNA表达减低(P<0.01);高剂量AS-Ⅳ组Nrf2、HO-1、Bcl-2/Bax蛋白及mRNA表达增高(P<0.01),Caspase-3蛋白及mRNA表达下降(P<0.01)。与低剂量AS-Ⅳ组比较,中、高剂量AS-Ⅳ组HO-1、Bcl-2/Bax蛋白及mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01),高剂量AS-Ⅳ组Nrf2蛋白及mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01),Caspase-3蛋白及mRNA表达下降(P<0.05,P<0.01);与中剂量ASⅣ组比较,高剂量AS-Ⅳ组HO-1蛋白及m RNA、Bcl-2/Bax蛋白、Nrf2 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01),Caspase-3蛋白及m RNA表达下降(P<0.01)。结论高剂量AS-Ⅳ对急性肝衰竭小鼠有保护作用,其机制可能与通过Nrf2增强HO-1的表达,减轻氧化应激所致急性肝损伤,以及上调Bcl-2的表达,降低Bax、Caspase-3水平,从而抑制肝细胞凋亡有关。
刘丽周宇李双杰
关键词:急性肝衰竭黄芪甲苷小鼠抗氧化抗凋亡中药
Mcl-1基因在阵发性睡眠性血红蛋白尿症异常克隆抗凋亡机制中的作用研究
2023年
目的探讨Mcl-1基因异常表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)异常克隆中的抗凋亡作用。方法选取2020年2月至2022年2月在宁德师范学院附属宁德市医院血液科就诊的13例PNH患者为病例组(男7例,女6例,中位年龄27岁),15例健康体检者为对照组(男8例,女7例,中位年龄38岁)。实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-PCR)检测PNH异常克隆细胞与正常细胞中Mcl-1基因mRNA的表达水平,然后敲除PNH患者CD59^(-)细胞中Mcl-1基因后检测siRNA-Mcl-1转染前后PNH异常克隆细胞的增殖、凋亡及细胞周期分布等生物学变化。统计学方法采用Fisher确切概率法、独立样本t检验、秩和检验。结果PNH患者CD59^(-)细胞组、CD59^(+)细胞组、对照组的Mcl-1基因mRNA的表达量分别为(2.48±0.25)、(1.61±0.19)、(1.21±0.08),CD59^(-)细胞组高于CD59^(+)细胞组及对照组(P=0.031、0.022),而CD59^(+)细胞组和对照组间比较差异无统计学意义(P=0.126)。同时PNH患者Mcl-1基因mRNA的相对表达量与CD59^(-)克隆细胞数呈正相关(r^(2)=0.523,P=0.012)。PNH患者CD59^(-)细胞转染靶向siRNA-Mcl-1后,Mcl-1 mRNA表达水平明显下降。siRNA-Mcl-1转染组细胞凋亡率高于转染无义序列组(siRNA-scr转染组)和空白对照组[(43.12±16.33)%比(24.07±15.42)%、(21.56±14.85)%],差异均有统计学意义(均P<0.05)。siRNA-Mcl-1转染组G_(0)/G_(1)期细胞比例高于siRNA-scr转染组和空白对照组[(93.16±3.06)%比(91.52±4.01)%、(90.78±3.62)%],而S期细胞比例低于siRNA-scr转染组和空白对照组[(4.96±3.21)%比(6.86±3.87)%、(7.05±3.59)%],差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论siRNA-Mcl-1转染能减弱PNH患者CD59^(-)细胞的增殖,促进凋亡。Mcl-1基因的过表达可能在PNH克隆抗凋亡中起作用。
林莺张荣东陈仁利陈琦
关键词:阵发性睡眠性血红蛋白尿症MCL-1抗凋亡
白藜芦醇对急性热应激条件下鸭肝抗氧化能力和细胞凋亡的影响被引量:6
2023年
旨在探索饲粮中添加白藜芦醇对急性热应激条件下山麻鸭肝抗氧化能力和细胞凋亡的影响,确定添加白藜芦醇对山麻鸭肝组织SIRT1信号通路、抗氧化酶系统及凋亡相关基因的作用。试验选取120只60日龄体重相近且健康的雌性山麻鸭,随机分为2组,每组60只,既对照组(C,饲喂基础饲粮)和白藜芦醇组(RES,饲喂添加400 mg·kg^(-1)白藜芦醇的基础饲粮)。两组动物均在常温(24℃±2℃)下饲养,15 d后,两组动物体重无明显差异。随后分别将每组动物随机分为3组,每组20只,在39℃环控仓中分别放置0、30、60 min。热应激处理后,采集鸭血清样本及肝组织,应用qRT-PCR、Western blot、TUNEL技术对SIRT1信号通路及凋亡相关基因的mRNA、蛋白水平和细胞凋亡数进行检测。采用生化法检测血清及肝中的氧化指标。结果显示,与对照组相比,白藜芦醇组HSP70和HSP90 mRNA表达有所升高。同时,白藜芦醇激活了SIRT1途径,增加了下游PGC-1α、TFAM mRNA表达,显著增加了热应激60 min条件下Nrf1、Nrf2核蛋白的表达。白藜芦醇提高了血清中T-AOC水平,在热应激60 min时,白藜芦醇显著提高了血清中SOD、CAT、AIHR的水平并显著降低MDA的含量。在同一热应激条件下,RES组肝中T-AOC、CAT、GSH-Px均高于C组,RES组MDA的含量显著低于C组。在急性热应激条件下,RES组的肝细胞凋亡数显著低于C组,且白藜芦醇降低了Bax、Bak1、Bax/Bcl-2 mRNA的表达量,同时增加了Bcl-2蛋白的表达量,降低了Bax、Caspase3、Bax/Bcl-2蛋白的表达量。综上所述,饲料中添加400 mg·kg^(-1)白藜芦醇可以激活鸭肝SIRT1信号通路,使促凋亡基因的表达量下降,抗凋亡基因的表达量增加。白藜芦醇可提高鸭肝的抗氧化能力和抗细胞凋亡的能力,能够改善急性热应激对鸭肝的氧化损伤。
周婉婷杨晨彭翠甜付新亮钟焯华许丹宁黄运茂黄运茂刘文俊
关键词:白藜芦醇热应激抗氧化凋亡
高压氧对血管性痴呆大鼠认知功能障碍的影响及抗凋亡机制
2023年
目的观察高压氧(HBO)对血管性痴呆(VD)大鼠认知功能障碍的保护性作用,并探讨相关抗凋亡机制。方法采用随机数字表法将39只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、HBO组,每组13只。HBO组于造模后6 h进行治疗,HBO治疗压力为0.2 MPa,稳压吸氧60 min,1次/d。假手术组与模型组呼吸常压空气。28 d后,采用Morris水迷宫实验评价各组空间学习与记忆能力。断头取海马组织,苏木精-伊红(HE)染色观察神经元病理学变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、磷脂酰激酶3(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的相对表达量,原位末端转移酶标记法(TUNEL)计算神经细胞凋亡率。多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用LSD法。结果HBO治疗可减轻VD大鼠认知功能障碍,HBO组逃避潜伏期显著低于模型组[(28.96±4.67)s比(46.81±6.75)s,t=5.909,P<0.01],平台象限时间比、穿越平台次数显著高于模型组[(30.31±6.45)%、(2.00±0.85)次比(21.57±5.26)%、(1.08±0.67)次,t=3.640、2.930,P<0.01],海马区细胞排列紊乱、胞核皱缩、炎性细胞浸润的程度减低,正常神经元计数显著高于模型组[(100.58±7.99)个/高倍镜视野比(91.25±7.62)个/高倍镜视野,t=2.928,P<0.01]。bcl-2、PI3K、p-Akt蛋白相对表达显著高于模型组(1.32±0.20、0.84±0.07、1.01±0.05比0.87±0.13、0.42±0.09、0.56±0.07,t=3.314、6.712、9.409,P<0.05),bax蛋白、Caspase-3蛋白相对表达显著低于模型组(0.84±0.03、0.75±0.08比1.26±0.06、1.65±0.45,t=3.404、10.537,P<0.05),细胞凋亡率无明显变化[(25.00±3.67)%比(29.40±3.65)%,t=1.901,P>0.05]。结论HBO可能通过上调PI3K/Akt信号通路,减轻神经细胞损伤,调节细胞凋亡,保护VD大鼠认知功能。
赵慧安娜陈文艳
关键词:高压氧血管性痴呆神经细胞损伤凋亡

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