目的研究C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)对高脂血症模型载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠肝脏脂肪病变形成的影响及机制。方法将30只8周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为对照组与观察组,每组15只,对照组小鼠给予尾静脉注射腺病毒空载绿色荧光蛋白(Ad-GFP),观察组小鼠给予尾静脉注射腺病毒载CTRP9(Ad-CTRP9),高脂高胆固醇饮食(HF/HC)饲喂12周后,采集尾静脉血,处死小鼠收集肝脏组织。采用HE、油红O染色观察CTRP9对ApoE^(-/-)小鼠肝脏脂肪病变形成的影响;采用real time PCR检测CTRP9及脂质合成、炎症相关和线粒体氧化磷酸化相关基因的表达水平;采用western blotting技术检测肝脏组织中CTRP9蛋白表达水平。结果与对照组相比,过表达CTRP9小鼠(观察组)体重和血脂水平差异无统计学意义(P>0.05),CTRP9基因和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),肝脏脂肪病变显著减少(P<0.05),肝脏组织中甘油三酯和总胆固醇水平显著下降(P<0.05),脂质合成(FAS、SCD1、SREBP1c)以及炎症相关基因(MCP-1、MIP1α和IL-1β)表达水平显著下调(P<0.01或P<0.001),而脂质代谢(PPARα、PPARγ、LXRα和LXRβ)及线粒体氧化磷酸化相关基因(CPT1、CPT2、COX4、Cytoc、Acadl和Acadm)表达水平显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论过表达CTRP9能够抑制肝脏组织中脂肪生成以及炎症反应,同时促进肝细胞脂肪酸氧化磷酸化和能量代谢,增加线粒体能量消耗,从而降低肝脏组织中脂质蓄积。
目的研究微RNA(microRNA,miRNA)-32-5p(miR-32-5p)对载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化的作用及其是否通过信号转导和转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)/磷酸酶及张力蛋白同源物(phosphates and tensin homologue deleted on chromosome ten,PTEN)通路影响巨噬细胞极化与动脉粥样硬化之间的联系。方法将6~8周龄动脉粥样硬化雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为实验组和模型组,实验组通过给小鼠注射miR-32-5p慢病毒构建过表达模型,模型组注射同等剂量生理盐水。4周后解剖小鼠,留取主动脉组织常规石蜡切片,采用苏木精-伊红(hematoxylin and eosin staining,HE)染色、免疫组化、免疫荧光法分别检测主动脉斑块面积及斑块内巨噬细胞含量;通过Western blotting(WB)检测主动脉斑块和体外培养巨噬细胞中磷酸化的信号转导和转录活化因子3(phosphorylated signal transducer and activator of transcription 3,p-STAT3)、PTEN、CCAAT增强子结合蛋白β(CCAT/enhancer-binding protein beta,C/EBP-β)等相关蛋白表达量。结果与模型组相比,实验组小鼠主动脉斑块面积明显缩小(Z=-3.477,P<0.01)、斑块内巨噬细胞数减少(Z=-3.628,P<0.01)、巨噬细胞向M2表型转化(Z=-3.628,P<0.01)。WB提示实验组p-STAT3(t=-10.381,P<0.01)、C/EBPβ(t=-6.205,P<0.01)表达量升高,而PTEN(t=7.057,P<0.01)表达量降低;M2型巨噬细胞标记物甘露糖受体/CD206(mannose receptor/CD206)(t=-5.386,P<0.01)、精氨酸酶(arginase)(t=-4.486,P<0.01)、发现于炎症区域(found in inflammatory zone,FIZZ)(t=-5.701,P<0.01)的表达量升高;体外实验同样显示实验组CD206(t=-11.431,P<0.01)、p-STAT3(t=-12.401,P<0.01)、C/EBP-β(t=-4.755,P<0.01)表达升高,PTEN(t=21.729,P<0.01)表达降低。结论miR-32-5p过表达可通过激活STAT3通路抑制PTEN,促进巨噬细胞向M2表型转化,发挥保护动脉粥样硬化的作用。
