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GLP-1R基因敲除对B16F10细胞系增殖及迁移功能的影响
背景:随着我国糖尿病患病率的逐年增长,糖尿病合并其他系统的疾病而导致死亡的患者数量逐渐增多,且合并心血管疾病是糖尿病患者死亡主要原因之一。在我们初期研究中发现,除心血管疾病外,恶性肿瘤已跃然成为糖尿病患者死亡的主要原因之...
戢立三
关键词:基因敲除增殖迁移
全身动态^(18)F-FDG PET/CT Patlak多参数显像监测PD-1抗体联合放射治疗对小鼠B16F10黑色素瘤的协同作用及远隔效应
2024年
目的 采用全身动态^(18)F-脱氧葡萄糖正电子发射计算机断层显像(^(18)F-FDG PET/CT) Patlak多参数显像技术,监测和评价程序性死亡受体-1(PD-1)免疫检查点单抗与放射联合治疗的协同抗肿瘤效应。方法 建立B16F10黑色素瘤小鼠双瘤模型,按照随机数字表法分为4组:空白对照组、PD-1单抗组、单纯放疗组、PD-1单抗+放疗(联合治疗)组,每组6只,分别于治疗前和治疗完成后24 h对小鼠行全身动态^(18)F-FDG PET/CT Patlak多参数显像。显像完后之后,分析比较四组肿瘤最大标准化摄取值(SUV_(max))、葡萄糖净摄取速率(MR_(FDG))的变化,以颈椎脱臼的方法处死小鼠,取出四组肿瘤进行苏木精-伊红(HE)染色及肿瘤浸润T淋巴细胞(CD8)、细胞核增殖抗原(Ki67)免疫组化分析肿瘤组织免疫细胞浸润情况及肿瘤组织增殖情况。治疗期间记录远端肿瘤体积变化情况。结果 治疗后24 h,原位肿瘤中,空白对照组SUV_(max)及MR_(FDG)值较治疗前升高(P<0.000 1),联合治疗组SUV_(max)及MR_(FDG)值较治疗前降低(P<0.000 1);远端肿瘤中,空白对照组、PD-1单抗组、单纯放疗组SUV_(max)及MR_(FDG)值较治疗前升高,但仅空白对照组治疗前后SUV_(max)差异有统计学意义(P<0.001),远端肿瘤中MR_(FDG)值上述三组差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.000 1)。远端肿瘤联合治疗组SUV_(max)及MR_(FDG)值较治疗前降低(P<0.000 1)。远端肿瘤治疗后比较各组SUV_(max)及MR_(FDG)值,除单纯放疗组和PD-1单抗组外,其余各组间SUV_(max)及MR_(FDG)值差异均有统计学意义(均P<0.05)。免疫组化结果显示,远端肿瘤CD8 T淋巴细胞平均吸光度值高于其他三组(P<0.001);远端肿瘤增殖指数Ki-67免疫组化平均吸光度值低于其他三组(P<0.001)。结论 联合治疗发挥出的协同作用可以降低远端肿瘤生长速度,全身动态^(18)F-FDG PET/CT Patlak多参数显像能够作为PD-1抗体与放射联合治疗远隔效应对小鼠B16F10黑色素瘤的
张金洲施慧敏张利亚苗璟璇朱干赵学峰汪会
关键词:远隔效应
姜黄素对黑素的抑制作用及机制被引量:1
2023年
目的姜黄素调节B16F10细胞微环境影响黑素合成的机制研究。方法(1)不同浓度姜黄素分别作用于B16F10及HaCaT细胞,MTT法检测该两种细胞活力;NaOH裂解法检测B16F10细胞黑素含量;L-DOPA氧化法检测B16F10细胞酪氨酸酶活性;Western blot法检测B16F10细胞黑素生成(gp100、Mitf、GPNMB、Tyr、TRP2)及转运(Rab27a)关键蛋白表达水平;HaCaT细胞:ISG15蛋白表达水平。(2)不同浓度ISG15作用于B16F10细胞,NaOH裂解法检测黑素含量;L-DOPA氧化法检测酪氨酸酶活性;结果姜黄素在一定浓度范围内,直接抑制酪氨酸酶活性及黑素生成,且抑制黑素细胞迁移;ISG15蛋白作用于黑素细胞,明显促进gp100蛋白表达,酪氨酸酶活力,黑素含量。姜黄素抑制HaCaT细胞ISG15蛋白表达,改变黑素细胞微环境,通过ISG15间接发挥抑制黑素合成作用。结论姜黄素除直接抑制黑素合成外,还可以通过抑制ISG15蛋白的表达,改变黑素细胞微环境,间接发挥抑制黑素合成作用。
朱秀琪展晓周佳
关键词:姜黄素HACAT细胞黑素合成
大叶茜草素诱导黑色素瘤B16F10凋亡被引量:1
2023年
目的研究大叶茜草素对黑色素瘤B16F10细胞的作用机制。方法使用MTT法(其中大叶茜草素浓度为0、40、80、160和320μmol/L)、平板克隆(其中大叶茜草素浓度为0、10、20和40μmol/L)来检测B16F10的增殖能力,用划痕实验(其中大叶茜草素的浓度为0、75、150和300μmol/L)来检测B16F10的迁移能力,使用凋亡与坏死检测试剂盒(其中大叶茜草素的浓度为0、75、150和300μmol/L)来检测大叶茜草素是否诱导B16F10凋亡,使用蛋白免疫印迹法(其中大叶茜草素的浓度为0、75、150和300μmol/L)来检测B16F10细胞中MTA1基因蛋白水平的表达。结果大叶茜草素可剂量依赖性抑制B16F10细胞的增殖和迁移,诱导B16F10凋亡;经大叶茜草素处理后B16F10细胞中MTA1具有下调趋势,且呈剂量依赖性。结论大叶茜草素可以通过下调MTA1来抑制B16F10细胞的增殖、迁移并诱导凋亡。
曾凤娇赵冰洁王攀琦刘洋魏瑶璐董兰宁志丰刘复兴
关键词:大叶茜草素黑色素瘤MTA1
Inhibitory effect of Cyrtomium falcatum on melanogenesis in α-MSH-stimulated B16F10 murine melanoma cells
2023年
Objective:To explore the anti-melanogenic potential of Cyrtomium falcatum.Methods:The effects of Cyrtomium falcatum crude extract and its solvent fractions on tyrosinase activity,melanin content,and the expressions of melanogenesis-related genes and proteins were analyzed inα-melanocyte-stimulating hormone(α-MSH)-stimulated B16F10 cells.Results:α-MSH treatment significantly increased tyrosinase activity,and extracellular and intracellular melanin content,as well as the expression levels of tyrosinase,microphthalmia-associated transcription factor(MITF),tyrosinase-related protein(TRP)-1,and TRP-2 in B16F10 cells.Treatment with Cyrtomium falcatum crude extract and its solvent fractions reduced tyrosinase activity and extracellular and intracellular melanin content and downregulated the expression levels of tyrosinase,MITF,TRP-1,and TRP-2 in a dose-dependent manner.Conclusions:Cyrtomium falcatum has potential anti-melanogenesis effects and can be used as a potential source material in cosmeceutical industry for the research and development of novel lead molecules with whitening properties.
Xian-Rong ZhouJung Hwan OhFatih KaradenizHyunjung LeeHyo Eun KimMigeon JoYoungwan SeoChang-Suk Kong
关键词:MELANOGENESISΑ-MSH
重楼皂苷Ⅱ诱导黑色素瘤细胞B16F10铁死亡的作用研究被引量:2
2023年
目的 探讨重楼皂苷Ⅱ对黑色素瘤细胞B16F10的抑制作用及可能的作用机制。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度的重楼皂苷Ⅱ对黑色素瘤细胞B16F10的抑制作用;透射电镜(TEM)观察细胞线粒体结构的变化;流式细胞仪检测活性氧(ROS)的变化;试剂盒检测铁死亡相关指标丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)的含量、铁(Fe)的含量及谷胱甘肽(GSH)的水平;Western blot法检测铁死亡相关蛋白的表达变化。结果 与空白组相比,重楼皂苷Ⅱ处理后B16F10细胞的活性显著降低,具有剂量和时间依赖性。TEM可以观察到重楼皂苷Ⅱ处理后B16F10细胞中线粒体结构发生皱缩变小以及膜密度增加的变化。重楼皂苷Ⅱ作用后ROS的水平、MDA和Fe的含量提高,SOD的含量和GSH的水平降低。除此之外,重楼皂苷Ⅱ可以抑制黑色素瘤细胞B16F10中GPX4、FTH-1、SLC7A11蛋白的表达水平而促进P53、ACSL4蛋白的表达水平。结论 重楼皂苷Ⅱ可以抑制黑色素瘤细胞B16F10增殖,其可能与诱导细胞发生铁死亡有关。
陈馨刘霞霞王文君王文君程卉
关键词:黑色素瘤
重组表达凋亡素的减毒单增李斯特菌的构建及其对B16F10肿瘤细胞活力的影响
2023年
构建1株能够表达凋亡素的重组减毒单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM),并探究其对B16F10小鼠黑色素瘤细胞增殖活力的影响。利用同源重组技术将凋亡素编码序列定点整合至单增李斯特菌hly基因信号肽下游,用RT-PCR及Western-blot方法验证重组菌株LMΔhly::apoptin中凋亡素的转录与表达,最后测定重组菌株的生物学特性,并通过CCK-8及荧光显微镜探究了重组菌株对B16F10细胞增殖活力及凋亡水平的影响。RT-PCR及Western-blot结果表明,该重组菌株能够转录并分泌表达具有免疫反应性的凋亡素。重组菌株对B16F10细胞的侵袭率为5.11%±0.56%,显著低于野生株对B16F10细胞的侵袭率(19.17%±4.83%)(P<0.05),但具有较好的胞内增殖能力,且在B16F10细胞内能检测到凋亡素的表达。CCK-8结果表明重组菌株能够显著抑制B16F10细胞的增殖,经荧光染色观察到重组菌株可诱导B16F10肿瘤细胞凋亡。本研究成功构建了表达凋亡素的重组减毒单增李斯特菌,其能够侵袭B16F10细胞并在细胞内增殖,且能在B16F10细胞中有效表达凋亡素。该重组菌株通过促进B16F10细胞凋亡而抑制B16F10细胞的增殖。以上研究为开发新型单增李斯特菌活载体肿瘤疫苗奠定了基础。
张昊恺孙奇娟许凤茹张春杰张春杰廖成水余祖华丁轲廖成水贾艳艳
关键词:凋亡素单增李斯特菌同源重组凋亡抗肿瘤
SKH-1小鼠黑素瘤B16F10细胞种植瘤模型的建立
2023年
目的建立SKH-1小鼠黑素瘤B16F10细胞皮下移植瘤和肺转移瘤模型。方法取SKH-1小鼠、C57BL/6小鼠各7只,于背部皮下接种5×106 B16F10细胞,观察并记录小鼠的生存时间,每3天用精密游标卡尺测量瘤体,计算肿瘤体积。肿瘤的长径>15 mm或出现恶病质或溃疡时判定为伦理学死亡。取5只SKH-1小鼠尾静脉注射5×106 B16F10细胞,观察小鼠的活动度、营养状态和生存时间,观察结束后处死小鼠,解剖并称量肺质量,对所有小鼠肺部行组织病理检查。实验重复3次。结果SKH-1小鼠在皮下接种后第6天接种部位皮肤开始出现黑点,渐发展为圆形黑色结节,直至肿瘤破溃、出血、死亡,伦理学死亡时间20~33 d。C57BL/6小鼠皮下接种第4天开始出现2~3 mm黑色小结节,发生伦理学死亡的时间为12~18 d。SKH-1小鼠第1~3次实验生存时间分别为(26.57±4.03)、(27.86±4.53)、(27.43±5.32)d,差异无统计学意(F=0.14,P=0.87);第27天时肿瘤体积分别为(1367.9±150.2)、(1452.0±50.1)、(1490.3±69.0)mm3,差异无统计学意义(F=0.92,P=0.46)。SKH-1小鼠尾静脉注射后第25天开始出现活动度减少、厌食等表现,第31天开始出现呆滞、消瘦、腹水、死亡等,伦理学死亡时间31~40 d;解剖后肺部见多处黑色结节,第1~3次实验小鼠生存时间分别为(34.2±2.58)、(36.4±2.60)、(34.8±2.38)d,差异无统计学意(F=1.01,P=0.39);小鼠肺部质量(156.1±18.5)、(164.0±19.6)、(172.0±17.2)mg,差异无统计学意(F=3.18,P=0.72)。所有小鼠全部成瘤,皮下肿物及肺部组织病理检查证实为黑素瘤。结论本实验成功建立SKH-1小鼠黑素瘤B16F10细胞皮下移植瘤和肺转移瘤模型,具有成瘤率高、成瘤稳定的特点。
张付贺石磊罗敏刘沛范晴王秀丽
关键词:小鼠无毛小鼠近交C57BL肿瘤模型
盐酸去氢骆驼蓬碱抗恶性黑色素瘤B16F10凋亡的实验研究
2023年
目的:探讨盐酸去氢骆驼蓬碱(HH)抗恶性黑色素瘤细胞(B16F10)的体外作用机制。方法:CCK-8检测HH对B16F10细胞的生长抑制率,普通光学显微镜检测HH作用后B16F10的细胞形态变化,流式细胞术检测HH作用于B16F10的细胞周期的改变、细胞凋亡率以及活性氧的变化,荧光显微镜检测HH作用后B16F10细胞内自噬小体染色情况。结果:与阴性对照组相比,实验组B16F10的生长抑制率、细胞凋亡率显著上升(P<0.05),G2/M期比例升高(P<0.05),细胞内活性氧含量升高(P<0.05),细胞形态呈圆形或者不规则改变,细胞内自噬小体比例升高。结论:HH能够诱导恶性黑色素瘤细胞B16F10发生凋亡及自噬,并将细胞周期阻滞在G2/M期。
张璐王涛郭红云张志明呼永华
关键词:盐酸去氢骆驼蓬碱恶性黑色素瘤细胞自噬活性氧

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窦骏
作品数:175被引量:371H指数:9
供职机构:东南大学医学院病原生物学与免疫学系
研究主题:肿瘤干细胞 癌干细胞 瘤苗 IL-21 靶向治疗
何向锋
作品数:60被引量:41H指数:4
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赵枫姝
作品数:61被引量:78H指数:5
供职机构:东南大学医学院病原生物学与免疫学系
研究主题:瘤苗 IL-21 GPI B16F10 抗肿瘤效应
陈登宇
作品数:85被引量:91H指数:6
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研究主题:铜绿假单胞菌 生物质 B16F10 活性炭 木质素
施文
作品数:28被引量:33H指数:3
供职机构:南通市第一人民医院
研究主题:B16F10 乳腺癌 GPI ESAT-6 瘤苗