公共文化服务平台

搜索到3828篇“ CDNA文库“的相关文章

西伯利亚杏花芽酵母cDNA文库构建及质量评价: 2025年; 【目的】西伯利亚杏Prunussibirica是我国重要的生态兼木本粮油树种,由于其花期早,易受春季“倒春寒”影响,导致其产量不稳,严重制约其产业的发展。本研究利用西伯利亚杏花芽为材料构建酵母杂交cDNA文库,该文库可用于西伯利亚杏花芽分化及休眠的转录因子和互作蛋白的筛选,为今后西伯利亚杏花芽分化及休眠分子调控机制研究提供技术支撑。【方法】以西伯利亚杏花芽分化及休眠过程中15个时期的花芽为材料,进行总RNA提取以及mRNA的分离与纯化,并利用SMART同源重组技术构建cDNA文库。将cDNA文库转化至酵母感受态细胞中,即得到cDNA酵母文库。【结果】鉴定结果表明,cDNA文库库容为5.24×10^(7)CFU/mL,插入片段长度主要分布在750~2000 bp,且平均插入长度在1000 bp以上,重组率为95.83%,24个阳性克隆经测序比对后,成功检测到20个功能注释基因,其中有3个序列(钙结合蛋白CML31、组蛋白H3.3、转录调节因子ADA2)与植物休眠及低温胁迫相关。【结论】西伯利亚杏花芽分化及休眠过程的酵母杂交cDNA文库构建质量较高,具有完整的基因信息,且符合酵母文库的筛选标准。该文库的构建能够为解析西伯利亚杏花芽分化及休眠相关的分子调控网络机制奠定基础。; 陈俊兴包文泉敖敦蔺悦陈一潇伊茹徐宛玉王淋; 关键词：花芽 CDNA文库

生物胁迫下黄瓜酵母双杂交cDNA文库构建与鉴定: 2025年; 以黄瓜抗病高代自交系D9320为试验材料,采用Gateway技术构建了黄瓜霜霉病和棒孢叶斑病菌胁迫下黄瓜酵母双杂交cDNA文库。结果表明:酵母文库克隆数为350个,文库滴度为3.5×10^(7)CFU/mL,重组率达到100%,插入片段长度在750~2000bp,平均片段长度超过1000bp。文库容量和重组率及插入片段大小均说明霜霉病菌和棒孢叶斑病菌胁迫下黄瓜酵母双杂交cDNA文库构建成功,可用于黄瓜双抗机制互作蛋白的筛选。; 刘东潘春清张艳菊; 关键词：黄瓜霜霉病黄瓜棒孢叶斑病 CDNA文库酵母双杂交

番石榴果实酵母cDNA文库构建及评价: 2024年; 酵母文库是研究蛋白互作及转录调控的重要基础,构建番石榴果实酵母cDNA文库,是研究番石榴果实采后成熟复杂分子机制的重要途径。首先提取高质量番石榴mRNA,接着合成双链cDNA文库,再通过Gateway位点特异性重组手段将cDNA文库构建至酵母pGADT7-DEST表达载体上。检测结果显示,次级酵母cDNA文库库容量约为1.56×10^(7)cfu,插入cDNA片段长度为0.85~5.00kb,平均长度大于1.00 kb,且多态性丰富,表明文库质量较好。该酵母cDNA文库的构建为获取与果实成熟关键转录因子和系统性研究果实功能基因转录调控机制奠定了基础。; 萧允艺赵晓梦于泽浩刘金丰; 关键词：番石榴文库构建转录调控

矢车菊不同颜色花瓣酵母cDNA文库的构建: 2024年; 【目的】矢车菊花瓣的蓝色呈色和品种间花色变异的分子调控机制尚不明晰。本研究采用Gateway技术构建了矢车菊6个不同花色品种花瓣的酵母cDNA文库,以期进一步通过酵母单杂交或双杂交技术筛选参与调控花瓣呈色的关键互作蛋白。【方法】本研究以白色、粉色、红色、蓝色、紫色和墨色矢车菊花瓣为材料,提取总RNA后分离和纯化mRNA,合成双链cDNA后依次进行BP重组反应和LR重组反应,分别获得初级和次级文库。最后将次级文库质粒转化酵母Y187,获得矢车菊不同颜色花瓣的酵母cDNA文库。【结果】质量鉴定结果显示:初级文库的库容量为1.3×10^(7) CFU,重组率为100%,且插入片段长度均在1000 bp以上;次级文库的库容量为1.6×10^(7) CFU,重组率为100%,且插入片段长度均在1000 bp以上。酵母文库的滴度为3.5×10^(7) CFU/mL,随机挑选的24个单克隆经PCR检测后均扩增出明亮条带,重组率为100%,插入片段长度均大于1000 bp。【结论】本研究构建的矢车菊不同颜色花瓣酵母cDNA文库的质量较高,能满足酵母文库筛选的试验要求,为后续探究矢车菊花瓣的蓝色呈色和品种间花色变异的分子调控机制提供了材料基础。; 邓成燕王佳颖戴思兰; 关键词：花色酵母 CDNA文库 GATEWAY技术

cDNA文库的构建及其在兽医研究中的应用: 2024年; cDNA文库是一个包含特定组织或细胞类型全套基因表达信息的克隆集合,是进行基因表达分析和功能研究的重要工具。构建高质量的cDNA文库对于捕获全面的转录信息至关重要,这涉及样本的选择、处理、cDNA的合成和文库的构建等一系列步骤的优化。该文介绍了cDNA文库的概念、构建技术及其在兽医学中的应用,并对技术进展和未来的研究方向进行了展望。; 孙浩李文龙杨靖卿迟雪孙佳音刘东旭; 关键词：CDNA文库兽医学疾病诊断

白茶萎凋过程中cDNA文库筛选与EST分析: 2024年; 萎凋是白茶品质形成的关键工序。以国家级审定茶树良种‘福鼎大白茶’鲜叶—萎凋叶作为供试材料,利用双链特异性核酸酶(DSN)介导,进行抑制差减杂交技术,构建鲜叶—萎凋叶正向差减文库;利用反向印迹杂交(Northern-blot)技术进行筛选与评价文库质量,获得具有差异基因的阳性克隆,并将阳性克隆的测序结果进行ESTs分析和归类,分离出白茶加工过程中重要功能基因。从分子生物学角度分析白茶萎凋过程中品质形成的关键代谢途径与其基因调控的具体情况,证实白茶萎凋过程中的基因对品质形成具有重要影响。; 陈静叶乃兴陈桂信王鹏杰黄先洲潘玉华; 关键词：白茶萎凋 CDNA文库 EST分析

一种枯草芽孢杆菌全长cDNA文库构建方法及其定向筛选应用: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌全长cDNA文库构建方法及其定向筛选应用，属于基因工程技术领域。枯草芽孢杆菌B.subtilis是工业中常用的外源蛋白生产菌株，通过构建cDNA文库是筛选枯草芽孢杆菌功能基因的有效方法，本发明...; 吴敬张康朱昫飏

乙烯诱导的油茶酵母cDNA文库构建及CoFAD7上游调控因子筛选: 2024年; 外施乙烯可促进油茶种仁α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)积累,FAD7是影响ALA合成的关键基因。为了研究油茶CoFAD7表达的分子调控机制,本研究克隆CoFAD7的启动子,构建乙烯诱导的油茶种仁酵母单杂交cDNA文库,并通过酵母单杂交技术筛选与CoFAD7启动子结合的上游调控因子。结果表明,1395 bp的CoFAD7启动子序列含有多种激素调节与环境胁迫相关的顺式元件及转录因子结合元件。构建的cDNA文库库容为9.5×10^(6) CFU·mL^(-1),平均插入片段长度约1000 bp。通过酵母单杂交筛选获得4个转录因子AP2-3、NFYC-1、F-box和ZFP1,可以与CoFAD7启动子结合。以上结果为进一步探究CoFAD7基因响应乙烯调控ALA含量的分子机理提供参考。; 马晓玲陈佳昕柏芮欧阳翔; 关键词：油茶酵母单杂交 CDNA文库转录因子

马铃薯酵母双杂交cDNA文库构建及StIPT互作蛋白筛选鉴定: 2024年; 马铃薯(Solanum tuberosum)在生长发育过程中容易受到各种生物及非生物胁迫,从而严重影响其营养物质的积累,造成品质与产量的下降。细胞分裂素(CK)是一类调控胞质分裂、芽的形成和分化的植物激素,在植物抵御外界胁迫方面发挥重要作用。异戊烯基转移酶(IPT)是CK合成途径中的第一个限速酶,能够有效调控植物内源CK合成。为了研究IPT在马铃薯中的功能和作用机制,本研究成功构建了马铃薯酵母双杂交cDNA文库,检测文库容量为1.52×10^(7)cfu(菌落形成单位),插入片段长度750~2500 bp,重组率为100%。进而克隆出StIPT基因并将其与诱饵载体pGBKT7连接,通过杂交法(mating法)从文库中筛选到32个与StIPT互作的候选蛋白。通过酵母回转验证,确定了StIPT可与StVOZ1、StHXK4发生体内互作。本结果为深入解析StIPT在马铃薯生长发育和逆境响应中的作用提供理论基础,并为马铃薯抗逆新种质的选育提供基因资源。; 石源睿吴美玲单虔文贾小云冯雪段永红段永红唐锐敏; 关键词：马铃薯细胞分裂素异戊烯基转移酶

玉米大斑病菌cDNA文库的构建及转录因子StMR1互作蛋白的筛选被引量：1: 2024年; 【目的】筛选玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)转录因子的互作蛋白,解析黑色素调控转录因子StMR1调控玉米大斑病菌致病性的分子机制。为解析玉米大斑病菌侵染过程中转录因子的调控网络,阐明病菌的致病机理提供参考。【方法】收集玉米大斑病菌菌丝和孢子不同萌发阶段作为试验材料,采用Gateway方法构建玉米大斑病菌cDNA文库,使用同源重组的方法构建转录因子StMR1的诱饵载体,采用酵母双杂交技术筛选其互作蛋白并进行一对一验证。【结果】构建的玉米大斑病菌文库插入的平均片段长度大于1000 bp,初级文库及次级文库的库容量为1.2×107和1.04×107CFU,重组率为100%,可以用于酵母双杂交筛选。成功构建可以用于筛库的诱饵载体pGBKT7-StMR1,经初筛与复筛得到3个互作蛋白,一对一验证短链脱氢酶、糖基转移酶、富含亮氨酸重复序列蛋白均与转录因子StMR1存在互作。【结论】成功构建了丰富度高且质量好的玉米大斑病菌cDNA文库并筛选到了与转录因子StMR1互作的蛋白。; 王秋月段鹏亮李海笑刘宁曹志艳董金皋; 关键词：玉米大斑病菌 CDNA文库转录因子酵母双杂交

加载更多 ∨

相关作者

用户反馈

相关作者

用户登录

用户反馈