搜索到31篇“ LOVO细胞系“的相关文章
- TWS119对结肠癌LOVO细胞系增殖能力和耐药性的影响
- 2015年
- 目的探讨TWS119对结肠癌LOVO细胞系的耐药性和增殖能力的影响。方法将LOVO细胞系分成3组,分别为2μmol/L TWS119处理组、1μmol/L TWS119处理组和阴性对照组,TWS119处理组加入2、1μmol/L的TWS119,对照组加入等体积DMSO,培养24 h后分别进行Western blot和q RT-PCR检测β-链蛋白(β-catenin)多药耐药相关蛋白1(MRP1)及P糖蛋白(P-gp)的表达,用流式细胞分析检测细胞周期,用CCK8检测细胞耐药性变化。结果与阴性对照组比较,2μmol/L TWS119处理组和1μmol/L TWS119处理组细胞中MRP1、P-gp的m RNA和β-catenin、MRP1、P-gp的蛋白表达,G2/M期细胞比例均明显升高(P<0.05)。虽然1μmol/L TWS119处理组在5、10μmol/L5-氟尿嘧啶(5-Fu)作用下存活率无明显变化(P>0.05),但2μmol/L TWS119处理组存活率明显升高(P<0.05);而且在15μmol/L 5-FU作用下处理组存活率明显升高(P<0.05)。结论在体外实验中,TWS119可以通过上调Wnt/β-catenin信号通路活性增强结肠癌细胞的耐药性和增殖能力,揭示癌细胞耐药性、Wnt/β-catenin通路和ABC转运体如P-gp、MRP1等存在联系。
- 冯家豪杨伟金孙政
- 关键词:结直肠癌化疗耐药WNT/Β-CATENIN信号通路
- TWS119对结肠癌LOVO细胞系增殖能力和耐药性的影响
- 目的: 探讨TWS119对结肠癌LOVO细胞系的耐药性和增殖能力的影响。 方法: 将LOVO细胞系分成3组,分别为2μmol/L TWS119处理组、1μmol/L TWS119处理组和阴性对照组,处理组加入TWS...
- 冯家豪
- 关键词:结直肠癌化疗耐药信号通路
- 文献传递
- LoVo细胞系中结肠癌干细胞样细胞的分离、培养及鉴定被引量:2
- 2010年
- 目的:从结肠癌LoVo细胞系中分离、鉴定具有CD44+/EPCAMhigh特异表型的结肠癌干细胞样细胞,观察其生物学行为,证实该细胞系中结肠癌干细胞样细胞的存在。方法:从普通血清培养的LoVo细胞系中以流式细胞仪分选具有CD44+/EPCAMhigh表型的细胞,接种于添加生长因子的无血清培养基中,观察其增殖过程,继而诱导分化。MTT法、流式细胞术检测CD44+/EPCAMhigh、EPCAMlow和未分选LoVo细胞的增殖能力及细胞周期分布。3种细胞接种裸鼠,比较不同细胞的成瘤率;免疫荧光技术检测小鼠次代CD44+/EPCAMhigh细胞中CD44/EPCAM的表达。结果:LoVo细胞中有17.4%的CD44+/EPCAMhigh细胞,并能在添加生长因子的无血清培养基中呈细胞球样生长,且可连续传代;在血清的诱导下,呈贴壁分化生长,其形态与未分选LoVo细胞无差别。CD44+/EPCAMhigh细胞增殖能力高于EPCAMlow细胞及未分选LoVo细胞,且细胞周期多集中在G0/G1期。以500个CD44+/EPCAMhigh细胞接种裸鼠成瘤率为90%(9/10),而1×104个EPCAMlow细胞成瘤率为0(0/10)。小鼠移植瘤中次代CD44+/EPCAMhigh细胞仍能少量表达CD44和EPCAM。结论:LoVo细胞中存在CD44+/EPCAMhigh结肠癌干细胞样细胞,CD44+/EPCAMhigh可用于结肠癌肿瘤干细胞的深入研究。
- 张洪也程勇胡祥吕原武乃金
- 关键词:结肠癌LOVO细胞株肿瘤干细胞干细胞样细胞
- shRNA抑制Twist表达对结肠癌LoVo细胞系生物学行为的影响
- 目的:观察shRNA抑制Twist基因表达后对结肠癌LoVo细胞生物学行为的影响,并探讨Twist与结直肠癌生长转移的关系。
方法:采用半定量RT-PCR法和Western blot法从mRNA和蛋白水平分别...
- 张洪也
- 关键词:TWIST结肠癌细胞系肿瘤生长
- 文献传递
- bmi-1shRNA逆转录病毒表达载体的构建及稳定转染LoVo细胞系的建立被引量:4
- 2010年
- 目的构建针对原癌基因bmi-1的shRNA逆转录病毒表达载体,建立稳定转染的LoVo细胞系,探讨稳定转染bmi-1shRNA对大肠癌细胞LoVo靶基因表达的影响,为下一步应用RNAi技术治疗打下基础。方法设计合成靶向bmi-1基因编码短发夹RNA的两条寡核苷酸序列,另设计无义对照序列,构建重组载体pSIREN-bmi-1及pSIREN-bmi-1-C,载体经脂质体2000介导转染LoVo细胞,通过嘌呤霉素筛选,建立稳定转染的LoVo细胞系,显微镜观察、MTT检测、荧光定量PCR、Western blot检测bmi-1表达受抑后对细胞的增殖影响。结果成功构建了针对bmi-1基因的shRNA表达载体,建立了稳定转染的LoVo细胞系,bmi-1shRNA对LoVo细胞bmi-1mRNA表达抑制率为80%、bmi-1蛋白抑制率为82%,P<0.05。结论针对bmi-1基因的shRNA表达载体能够明显抑制结肠癌细胞LoVo的增殖能力,bmi-1mRNA与蛋白表达受抑制,但对细胞形态学无明显影响。
- 汪云霞魏亚明王晓华朱晓莹黄颖烽
- 关键词:BMI-1基因转染短发夹RNA
- 人结肠癌LoVo细胞系经草酸铂或伊立替康处理后的蛋白质组学分析
- 第一部分:
目的:分析草酸铂处理后人结肠癌LoVo细胞系的差异表达蛋白,从蛋白质组学角度探讨草酸铂对人结肠癌LoVo细胞系的作用机制。
方法:按照MTT法进行细胞增殖的检测,计算草酸铂半数抑制浓度。用100m...
- 陈家诚
- 关键词:结肠癌草酸铂伊立替康蛋白质组学分析抗癌机制
- 文献传递
- Nrf3基因对大肠癌LoVo细胞系生长的影响被引量:2
- 2008年
- 目的:在体外检测Nrf3基因对大肠癌LoVo的生长影响作用。方法:构建其融合蛋白真核表达载体,脂质体介导该真核表达载体转染大肠癌LoVo细胞系,FCM观察其在体外对大肠癌LoVo细胞系细胞周期和凋亡的影响;荧光显微镜观察候选基因亚细胞定位。结果:构建融合蛋白真核表达载体pEGFP-N1-Nrf3。RT-PCR方法检测Nrf3的表达,与芯片检测结果基本一致。荧光显微镜下观察Nrf3定位于细胞核内。FCM分析显示Nrf3影响下LoVo G2/M+S期细胞所占比例较对照组明显减少,G0/G1细胞所占比例明显增加。证实Nrf3可抑制大肠癌LoVo细胞的DNA合成和有丝分裂,促使细胞阻滞于G0/G1期,抑制大肠癌LoVo细胞的体外生长。FCM分析显示Nrf3在体外对大肠癌LoVo细胞的凋亡无影响。结论:Nrf3在体外具有抑制大肠癌增殖的功能,对大肠癌的细胞凋亡无影响,为肿瘤抑制基因。
- 王强李晓利白雪娟黄仲曦崔春平丁彦青张金萍姚开泰许红民
- 关键词:肠肿瘤质粒流式细胞术
- SDZ对人大肠癌LOVO细胞系的作用及其对E-、N-Cadherin表达的影响
- 2008年
- 目的:研究SDZ对人大肠癌LOVO细胞系的作用及其对上皮型、神经型钙黏蛋白(E-、N-Cadherin)表达的影响。方法:用倒置显微镜和电镜观察SDZ对人大肠癌LOVO细胞的凋亡情况,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测加药后E-、N-Cadherin的表达情况。结果:SDZ对人大肠癌LOVO细胞株有促进凋亡的作用;对E-Cadherin的表达有上调作用,对N-Cadherin的表达无影响。结论:SDZ有加强肿瘤细胞间的黏附性,降低肿瘤浸润和转移的能力。
- 吴迪佟金学
- 关键词:中药逆转录-聚合酶链反应
- TF/FⅦa体外诱导大肠癌LOVO细胞系表达MMP-7mRNA的研究被引量:2
- 2007年
- 目的观察组织因子/活性凝血七因子(TF/FⅦa)诱导大肠癌 LOVO 细胞系表达基质金属蛋白酶7(MMP-7)mRNA 及信号传导途径。方法构建靶向组织因子基因干扰的 RNAi 质粒并稳定转染 LOVO 细胞获得 TFRNAi LOVO 细胞系,Western blot 检测干扰效率;RT-PCR 观察100 nmol/L FⅦa刺激0、4、8、12、24 h 后 LOVO 细胞中 MMP-7mRNA 的变化,Northern blot 证实时间效应及测定0、10、50、100、200 nmol/L FⅦa刺激后的 MMP-7mRNA 水平;100 nmol/L FⅦa分别刺激LOVO 细胞0、4、8、12、16、24 h,Western blot 测定 p-P38的水平;Northern blot 分别检测预先使用10 mmol/L P38阻断剂 SB203580 0.5 h 再以100 nmol/L FⅦa刺激 LOVO 细胞8 h 及100 nmol/L FⅦa刺激 TFRNAi LOVO 细胞系8 h 后 MMP-7mRNA 水平。结果 Northern blot 结果显示 FⅦa刺激MMP-7mRNA 表达存在时间、浓度依赖性;Western blot 测定 FⅦa刺激 p-P38表达存在时间依赖性。应用 P38通路阻断剂 SB203580后 MMP-7mRNA 基因表达下降59.2%,转染组织因子干扰质粒的LOVO 细胞中,MMP-7mRNA 的表达水平较 LOVO 细胞组下降48%。结论活性Ⅶ因子与组织因子结合诱导体外大肠癌 LOVO 细胞系表达 MMP-7mRNA,其机理可能与 P38通路有关。
- 张剑权万远廉刘玉村汪欣汤坚强吴涛朱静潘义生
- 关键词:结直肠肿瘤肿瘤转移P38
- 组织因子/活化凝血Ⅶ因子复合物对大肠癌LoVo细胞系表达基质金属蛋白酶-7的调控作用被引量:1
- 2007年
- 目的:观察活化凝血Ⅶ因子(actived factorⅦ,FⅦa)对大肠癌LoVo细胞系表达基质金属蛋白酶-7(ProMMP-7)的影响,探讨其可能的组织因子信号转导通路。方法:(1)用Western blot检测100nmol/L FⅦa刺激LoVo细胞系不同时间点及不同浓度FⅦa刺激LoVo细胞系12h后细胞ProMMP-7蛋白水平;用Western blot检测5mg/L组织因子(tissue factor,TF)抗体预孵育LoVo细胞系0.5h后再给予100nmol/L FⅦa刺激12h后细胞ProM-MP-7蛋白水平。(2)观察用100nmol/L FⅦa刺激时丝裂原激活蛋白激酶(MAPKs)各亚通路信号蛋白(包括细胞外信号调节激酶ERK1/2,丝裂原激活蛋白激酶P38及c-Jun-N末端蛋白激酶JNK)磷酸化水平变化。(3)在FⅦa刺激前0.5h分别加入ERK1/2,P38和JNK信号通路特异阻断剂PD98059,SB203580和SP600125,培养12h后检测细胞ProMMP-7蛋白的变化。结果:(1)FⅦa可刺激LoVo系细胞表达ProMMP-7并呈时间依赖性和剂量依赖性,在刺激的12h左右ProMMP-7达峰值,是正常对照组的5.5±0.6倍(P=0.006);用TF抗体预处理的LoVo细胞系,其FⅦa上调ProMMP-7表达的作用被完全阻断。(2)用100nmol/L FⅦa刺激LoVo细胞5min时,MAPKs磷酸化活性蛋白p-ERK1/2和p-P38表达水平开始增加,至10min时达峰值(分别为对照组的2.2±0.3倍和3.9±0.5倍,P值分别为0.02和0.01),存在时间效应关系,而p-JNK活性无改变(为对照组的1.1±0.1倍)。(3)ERK1/2通路阻断剂PD98059及P38通路阻断剂SB203580可部分减少FⅦa上调LoVo细胞系表达ProMMP-7的效应,分别降低了32%±5%(P=0.01)和61%±10%(P=0.009),JNK通路特异性阻断剂SP600125对ProMMP-7的表达无明显影响。结论:FⅦa通过与LoVo细胞表面的TF结合诱导ProMMP-7的表达,并呈时间依赖性和剂量依赖性;ERK1/2和P38MAPKs亚通路参与LoVo细胞TF信号转导通路并与TF/FⅦa调控ProMMP-7表达有关。
- 汤坚强万远廉刘玉村戎龙汪欣吴涛潘义生朱静
- 关键词:结直肠肿瘤基质金属蛋白酶类丝裂原激活蛋白激酶类
相关作者
- 李锋
- 作品数:798被引量:4,155H指数:25
- 供职机构:华中科技大学同济医学院
- 研究主题:骨质疏松 后路 腰椎 颈椎 破骨细胞分化
- 王长海
- 作品数:118被引量:950H指数:17
- 供职机构:第四军医大学西京医院
- 研究主题:中医药疗法 中药 血液流变学 骨密度 菊藤胶囊
- 李军昌
- 作品数:113被引量:751H指数:15
- 供职机构:第四军医大学西京医院
- 研究主题:芪丹通脉片 中药 血液流变学 活血通脉片 中医药疗法
- 鲍军强
- 作品数:16被引量:126H指数:8
- 供职机构:解放军第260医院
- 研究主题:水通道蛋白2 大黄总蒽醌 水通道蛋白4表达 水通道蛋白4 LOVO细胞系
- 张文生
- 作品数:8被引量:76H指数:6
- 供职机构:第四军医大学
- 研究主题:水通道蛋白2 大黄总蒽醌 水通道蛋白4表达 水通道蛋白4 LOVO细胞系