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- 半滑舌鳎突触体相关蛋白29基因(SNAP29)克隆及其组织分布和时序表达分析
- 2024年
- 为了分析半滑舌鳎突触体相关蛋白29基因(SNAP29)的分子生物学特征、组织分布特点以及感染海藻希瓦氏菌后的时序表达规律,通过RT-PCR、生物信息学网站、qRT-PCR技术对半滑舌鳎SNAP29基因进行了扩增、生信分析和表达特征研究。结果表明,半滑舌鳎SNAP29基因CDS区长度为789 bp,编码262个氨基酸,理论等电点(pI)为5.39,分子质量为29.71781 ku,有2个典型的SNARE结构域;二级结构主要由α-螺旋和无规卷曲组成,二级结构和三级结构基本一致;多序列比对结果显示,半滑舌鳎与欧洲鲈鱼SNAP29基因相似性最高;SNAP29基因在健康半滑舌鳎所测的各组织中均有表达,在鳃组织中表达最高,在脑组织中表达量最低;利用海藻希瓦氏菌人工感染半滑舌鳎后,SNAP29基因在肠道组织、心脏组织和脑组织中表达量主要呈现上调趋势,在肝脏、头肾、脾脏组织中主要呈现下调表达,SNAP29基因在健康半滑舌鳎组织中均有表达;海藻希瓦氏菌感染半滑舌鳎的肠道、脑、心脏、肝脏、头肾、脾脏组织中SNAP29基因呈现差异表达。综上,SNAP29可能参与机体免疫应答过程或病理生理过程。
- 吴茵茵温思怡韩卓然孙敬锋
- 关键词：半滑舌鳎基因克隆QRT-PCR
- 针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织miR-29a-3p、miR-29b-3p表达的影响
- 2024年
- 目的观察针刺干预72 h后脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠缺血侧海马区miR-29a-3p、miR-29b-3p的表达,探讨针刺促CIRI修复的机制。方法30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和针刺组,每组10只,造模组大鼠使用线栓法制备CIRI模型,假手术组只剥离血管不插入线栓;假手术组和模型组只捆绑不针刺,针刺组捆绑后针刺“大椎”“百会”“水沟”穴,一天治疗两次,共治疗7次。采用Garcia评分法对神经功能进行评定,TTC染色法检测脑梗死面积比,qRT-PCR法检测缺血侧海马区miR-29a-3p、miR-29b-3p的表达。结果干预前与假手术组比较,造模组Garcia评分显著降低(P<0.01),脑梗死面积比显著增加(P<0.01),患侧海马区miR-29a-3p、miR-29b-3p表达量降低(P<0.05,P<0.01);干预72h后与模型组比较,针刺组Garcia评分明显上升(P<0.01),脑梗死面积比显著下降(P<0.01),患侧海马组织miR-29a-3p、miR-29b-3p的表达量明显增加(P<0.01)。结论针刺可减少CIRI大鼠缺血侧脑梗死面积、改善神经功能损伤、发挥脑保护作用,可能与干预72h后上调缺血侧海马区miR-29a-3p、miR-29b-3p表达有关。
- 王瑶江姗姗谢灿明向静唐红汪红娟李展富刘晓月陈楚淘田浩梅
- 关键词：针刺脑缺血再灌注损伤
- miR-29a在心血管疾病中的研究进展
- 2024年
- 心血管疾病(CVD)是目前威胁人类健康的最严重疾病之一,其包括急性心肌梗死(AMI)、高血压、心房颤动(AF)、肺动脉高压(PAH)、肥厚性心肌病(HCM)等诸多疾病,随着疾病的病理生理变化及心肌纤维化、心肌肥厚、心力衰竭及心肌缺血的发生发展,心脏结构等也随之改变,最终病情进展恶化。miR-29a可以参与多种CVD的发生发展过程,在心肌细胞的纤维化、心肌重构等方面起到调节作用,是一个非常有潜力的治疗靶点和有前景的生物标志物,本文就miR-29a的分子结构及其在CVD中的作用研究进展作一综述。
- 王燕庆王彦玲陈华刘东霞
- 关键词：心血管疾病心肌纤维化心肌重构
- 甘草次酸对大肠癌HT-29细胞化疗增敏作用机制研究
- 2024年
- 目的:研究甘草次酸增强奥沙利铂对大肠癌HT-29细胞化疗敏感性的作用机制。方法:将大肠癌HT-29细胞分为对照组、甘草次酸组(甘草次酸浓度为100μmol/L)、联合组(100μmol/L甘草次酸+25 mg/L奥沙利铂)和阳性对照组(奥沙利铂25 mg/L)。采用四氮唑蓝法检测各组HT-29细胞增殖率;通过Annexin V/PI双标流式细胞术检测各组HT-29细胞凋亡比例;通过蛋白质印迹法检测各组HT-29细胞中核转录因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)、B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、激活型胱天蛋白酶3(caspase-3,CASP-3)蛋白表达。结果:与对照组相比,联合组和阳性对照组HT-29细胞增殖率降低(P<0.05),联合组和阳性对照组凋亡细胞比例均升高(P<0.05);甘草次酸组、联合组和阳性对照组NF-κB、Bcl-2蛋白相对表达量均降低(P<0.05),而激活型CASP-3蛋白表达升高(P<0.05)。结论:甘草次酸可能通过调控NF-κB信号通路增强奥沙利铂对大肠癌HT-29细胞的化疗敏感性。
- 高野李凤岩闫睿白剑苗兰英
- 关键词：大肠癌HT-29细胞核转录因子ΚB甘草次酸
- MiR-29a/b/c对葡萄膜黑色素瘤细胞功能的影响及机制
- 2024年
- 目的:探索miR-29a/b/c对葡萄膜黑色素瘤(UM)细胞功能的影响及其作用机制。方法:使用脂质体转染技术将hsa-miR-29a/b/c或基质金属蛋白酶2(MMP2)特异性siRNA转染进UM细胞。使用MTS实验和Matrigel Transwell实验分别检测UM细胞增殖和侵袭能力的变化。使用半定量PCR实验检测UM细胞中MMP2m RNA水平表达量的变化。使用ELISA实验检测UM细胞上清中MMP2蛋白分泌量的变化。结果:转染miR-29a/b/c抑制了UM细胞的增殖(P<0.05)和侵袭能力(P<0.05)。MiR-29a/b/c不影响MMP2 mRNA转录,但均能抑制UM细胞分泌MMP2(P<0.05)。在UM细胞中干扰MMP2抑制UM细胞的侵袭能力(P<0.05)。结论:Mi R-29a/b/c抑制UM细胞的增殖和侵袭。MiR-29a/b/c减少其下游靶蛋白MMP2的分泌,在UM细胞中干扰MMP2抑制细胞侵袭。
- 潘虹婷王超朱鲜侯强
- 关键词：葡萄膜黑色素瘤基质金属蛋白酶2
- IL-29和TLR4在嗜酸性粒细胞浸润鼻息肉中的表达及临床意义
- 2024年
- 鼻息肉是鼻腔及鼻窦黏膜上皮组织的慢性炎症性疾病,是耳鼻咽喉科的常见病之一。鼻息肉的发生与上皮屏障功能障碍、接触过敏原或病原体以及免疫功能失调有关,是炎症和纤维蛋白沉积的结果。尽管鼻内镜手术已较成熟,仍有部分鼻息肉难治疗且复发率高,研究发现超过50%慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者可出现复发。白细胞介素-29(interleukin-29,IL-29)是新发现的Ⅲ型干扰素成员。它通过与其受体复合物结合介导信号转导并激活下游信号通路,从而诱导炎症成分的产生。Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)是Toll样受体家族的成员,参与先天免疫,并通过识别脂多糖或细菌内毒素介导炎症反应。研究表明,TLR4在鼻息肉组织中的表达明显升高。IL-29和TLR4在炎症反应的调控中发挥重要作用,但两者与嗜酸性粒细胞浸润鼻息肉的相关性目前尚不明确。探究发现与嗜酸性粒细胞浸润鼻息肉相关的临床指标,能为鼻息肉的诊治提供新的思路。
- 晏慧娟肖旭平钟宇
- 关键词：嗜酸性粒细胞鼻息肉TOLL样受体4
- miR-29a-3p、FKBP14在宫颈癌组织中的表达及对预后的预测作用
- 2024年
- 目的探讨微小RNA-29a-3p(miR-29a-3p)、FK506相关蛋白14(FKBP14)在宫颈癌组织中的表达及对预后的预测作用。方法收集沧州市妇幼保健院2016年7月至2018年7月期间住院手术的110例宫颈癌患者的癌组织及癌旁组织,qRT-PCR检测miR-29a-3p表达水平,免疫组织化学检测FKBP14蛋白表达;miR-29a-3p与FKBP14表达的相关性采用Spearman相关分析;miR-29a-3p、FKBP14表达与预后的关系采用Kaplan-Meier法分析;多因素Cox回归分析患者预后的影响因素。结果与癌旁组织比较,宫颈癌组织中miR-29a-3p表达水平降低,FKBP14阳性率增加(P<0.05);低分化、肿瘤直径≥4cm、FIGO分期Ⅱ期miR-29a-3p低表达、FKBP14蛋白阳性表达患者比例高于中高分化、肿瘤直径<4 cm、FIGO分期Ⅰ期患者(P<0.05);宫颈癌组织miR-29a-3p与FKBP14的表达水平呈负相关(P<0.05);miR-29a-3p高表达患者5年生存率高于低表达患者,FKBP14阳性表达患者5年生存率低于阴性表达患者(P<0.05);FKBP14是患者死亡的危险因素,miR-29a-3p是保护因素(P<0.05)。结论宫颈癌组织miR-29a-3p低表达、FKBP14高表达,二者与患者5年预后有密切联系,有可能成为预后判断的生物指标。
- 代莎莎范宁宁田航璇胡永立
- 关键词：宫颈癌预后
- lncR-HOXA-AS3靶向miR-29a对前列腺癌细胞凋亡和自噬的影响被引量：1
- 2024年
- 目的 探讨长链非编码RNA(lncR)HOXA-AS3和微小RNA-29a(miR-29a)对前列腺癌(PCa)细胞凋亡、自噬的影响。方法 体外培养人PCa细胞(DU-145、LNCaP、C4-2B)和人正常前列腺细胞RWPE-1,采用RT-qPCR法检测细胞中lncR-HOXA-AS3和miR-29a表达。应用双荧光素酶报告基因实验验证lncR-HOXA-AS3和miR-29a之间的靶向调控关系。取对数生长期LNCaP细胞,分为si-NC组、si-HOXA-AS3组、si-HOXA-AS3+anti-miR-NC组和si-HOXA-AS3+anti-miR-29a组,利用脂质体转染法分别将si-NC、si-HOXA-AS3、si-HOXA-AS3+anti-miR-NC、si-HOXA-AS3+anti-miR-29a转染至各组LNCaP细胞,应用RT-qPCR法检测各组细胞中lncR-HOXA-AS3和miR-29a表达,应用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,应用Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白Caspase-3及自噬相关蛋白LC3II、LC3I、Beclin 1表达。结果 与正常前列腺细胞相比,人PCa细胞中lncR-HOXA-AS3表达均明显升高(P均<0.05),而miR-29a表达均降低(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因显示lncR-HOXA-AS3能靶向miR-29a抑制荧光素酶活性(P<0.05)。与si-NC组比较,si-HOXA-AS3组LNCaP细胞lncR-HOXA-AS3表达降低(P<0.05),miR-29a表达升高(P<0.05),细胞凋亡率升高(P均<0.05),Caspase-3、LC3Ⅱ/LC3I及Beclin 1蛋白表达升高(P均<0.05)。与si-HOXA-AS3+anti-miR-NC组比较,si-HOXA-AS3+anti-miR-29a组LNCaP细胞miR-29a表达下降(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),Caspase-3、LC3Ⅱ/LC3I及Beclin1蛋白表达下降(P均<0.05)。结论 抑制lncR-HOXA-AS3表达能靶向调控miR-29a基因促进PCa细胞凋亡和自噬。
- 李强刘晶张国民王亮刘志飞朱研峰
- 关键词：前列腺癌细胞凋亡
- miR-29c-3p调控ERLIN2抑制肺腺癌发展的作用
- 2024年
- 目的:探讨miR-29c-3p在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)发生发展中的作用。方法:利用公共数据库分析miR-29c-3p和ERLIN2在肺腺癌中的表达及其与临床病理参数的相关性。采用qRT-PCR检测miR-29c-3p在LUAD细胞系和正常支气管上皮细胞系中的表达,CCK8、细胞克隆形成、Transwell和伤口愈合实验评估miR-29c-3p在细胞增殖、迁移和侵袭中的作用,利用生物信息学工具预测miR-29c-3p下游靶基因,并通过双荧光素酶报告基因分析验证靶向关系。结果:miR-29c-3p在肺腺癌组织和细胞中低表达。miR-29c-3p低表达患者的预后较差,miR-29c-3p是肺腺癌患者的独立预后因素,并与淋巴结转移状态和临床分期密切相关。细胞实验表明,抑制miR-29c-3p可促进A549细胞的增殖、迁移和侵袭。生物信息学分析表明,ERLIN2是miR-29c-3p的靶基因,二者表达呈负相关。通过双荧光素酶报告基因测定验证了上述靶向关系。在UALCAN数据库中,ERLIN2在肺腺癌组织中高表达,并与患者年龄、性别、吸烟、肿瘤分期、淋巴结转移和TP53突变状态密切相关,ERLIN2高表达患者总生存率低于低表达患者。结论:miR-29c-3p通过靶向ERLIN2抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,是肺腺癌患者的独立预后因素。
- 卞婷婷姜岱山张雅莉王斯楚刘益飞
- 关键词：肺腺癌增殖迁移
- 子宫肌瘤患者血清miR-29和miR-210表达水平变化及临床意义
- 2024年
- 目的检测子宫肌瘤患者血清微小RNA-29(miR-29)和miR-210表达水平变化,并分析其临床意义。方法选取2016年6月-2019年6月首都医科大学附属北京潞河医院收治的143例子宫肌瘤患者作为研究组,另取同期体检且一般资料与研究组相匹配的100名健康者作为对照组。采用Pearson法分析子宫肌瘤患者血清miR-29和miR-210表达水平的相关性,多因素logistic回归分析影响子宫肌瘤发生的相关因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-29和miR-210对子宫肌瘤的诊断价值。结果研究组血清miR-29(1.33±0.36)和miR-210(1.26±0.33)表达水平均显著高于对照组miR-29(1.02±0.16)和miR-210(1.07±0.19),差异均有统计学意义(t=8.068、5.186,P均<0.001)。子宫肌瘤患者血清miR-29与miR-210表达水平成正相关(r=0.784,P<0.05)。研究组有盆腔炎史、腹壁脂肪厚度≥20 mm、乳腺增生患者所占比例高于对照组,差异均有统计学意义(χ^(2)=4.879、4.559、4.622,P均<0.05)。血清miR-29和miR-210单独检测诊断子宫肌瘤的曲线下面积(AUC)分别为0.762、0.802,二者联合检测的AUC为0.880,联合检测优于各自单独检测(Z_(联合vs.miR-29)=5.817,P<0.001;Z_(联合vs.miR-210)=2.928,P=0.003)。有盆腔炎史、腹壁脂肪厚度≥20 mm、有乳腺增生、miR-29≥1.11、miR-210≥1.17均为发生子宫肌瘤的危险因素(P均<0.05)。结论血清miR-29和miR-210表达水平与子宫肌瘤的发生密切相关,二者联合检测对子宫肌瘤具有较高的诊断价值。
- 徐丕丽张慧
- 关键词：子宫肌瘤
