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白藜芦醇通过核因子E2相关因子2/NAD(P)H:氧化还原酶1信号通路调控铁死亡的机制
2024年
目的探讨白藜芦醇(RES)通过激活核因子E2相关因子2(Nrf2)/NAD(P)H:氧化还原酶1(NQO1)信号通路在调控小鼠海马神经元HT22细胞铁死亡过程中的保护机制。方法采用Erastin诱导HT22细胞模型模拟铁死亡, 设置对照组、Erastin组、40、80 μmol/L RES处理组, 以及Erastin+RES+ML385组。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力, 流式细胞术和原位缺口末端标记法(TUNEL)法评估凋亡, 试剂盒测定细胞内活性铁和活性氧(ROS)含量, 荧光定量聚合链式反应(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分析Nrf2/NQO1信号通路。组间差异通过ANOVA和Tukey’s post hoc测试确定。结果 0.6 μmol/L的Erastin组细胞活力显著低于40 μmol/L的RES组(51.00±2.90比68.12±2.24, t=2.902, P<0.05);RES显著降低细胞凋亡率, 80 μmol/L RES处理的HT22细胞凋亡率显著低于Erastin组(6.12±0.93比18.21±2.05, t=3.858, P<0.05), 效果最佳。80 μmol/L的RES组细胞内活性铁和ROS含量显著低于Erastin组(活性铁:43.14±3.13比65.11±4.07, t=3.821, P<0.05;ROS:8.04±0.83比25.02±1.57, t=5.852, P<0.05)。RES预处理后Nrf2、NQO1和HO-1 mRNA及蛋白表达显著高于Erastin组(NQO1 mRNA:0.32±0.04比1.01±0.07, t=3.928, P<0.05;Nrf2 mRNA:0.25±0.03比1.04±0.06, t=3.785, P<0.05;HO-1 mRNA:0.26±0.05比1.02±0.08, t=3.957, P<0.05;NQO1蛋白:0.96±0.04比0.45±0.07, t=3.792, P<0.05;Nrf2蛋白:0.91±0.07比0.32±0.05, t=3.957, P<0.05;HO-1蛋白:1.21±0.04比0.25±0.03, t=4.535, P<0.05), 而ML385逆转了RES的保护效果, 导致RES+Erastin+ML385组的NQO1、Nrf2、HO-1蛋白表达显著少于RES+Erastin组(NQO1:0.67±0.05比0.92±0.08, t=4.276, P<0.05;Nrf2:0.71±0.05比0.94±0.07, t=4.121, P<0.05;HO-1:0.64±0.04比1.16±0.04, t=3.978, P<0.05)。结论 RES可能通过激活Nrf2/NQO1信号通路, 从而抑制Erastin诱导的神经元HT22细胞铁死亡。
张林郭田田王纵李力杨扬
关键词:白藜芦醇核因子E2相关因子2神经元
NAD(P)H依赖型氧化还原酶不对称还原胺化制备手性胺的研究进展被引量:6
2020年
不对称还原胺化反应是制备医药中间体手性胺结构单元的重要反应。目前已有许多不同种类的被应用于合成手性胺,其中NAD(P)H依赖型氧化还原酶催化的还原胺化反应最为引人注目,因为其能够一步将潜手性酮化合物完全转化为光学纯的手性胺化合物。文中以亚胺还原酶、氨基酸脱氢、冠瘿碱脱氢还原性酮胺化为例,从NAD(P)H依赖型氧化还原酶的结构特征、作用机理、分子改造及催化应用等方面,综述了其在不对称还原胺化合成手性胺领域的研究进展。
程峰李清华李恒薛亚平
关键词:手性胺
高氧暴露和小分子干扰RNA对A549细胞核转录相关因子-2与NAD(P)H:氧化还原酶1表达的影响及其与细胞凋亡的关系被引量:4
2020年
目的研究高氧暴露和小分子干扰RNA(siRNA)对A549细胞中细胞核转录相关因子2(Nrf2)、NAD(P)H:氧化还原酶1(NQO1)表达的影响,探讨其在高氧肺损伤中的作用及其与细胞凋亡的关系。方法将体外培养A549细胞随机分为4组:Ⅰ组为无干扰空气组;Ⅱ组为无干扰高氧组;Ⅲ组为Nrf2 siRNA转染空气组;Ⅳ组为Nrf2 siRNA转染高氧组;将Ⅱ组、Ⅳ组持续暴露于常压高浓度氧(950 mL/L O2,50 mL/L CO2)中;Ⅰ组、Ⅲ组仍置于50 mL/L CO2培养箱中。通过预实验从目的基因靶点siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3(分别加入对应脂质体复合物)中筛选出抑制Nrf2效率最高的Nrf2 siRNA,应用实时荧光定量聚合链反应(qPCR)、Western blot分别检测4组Nrf2、NQO1的mRNA及蛋白表达水平,应用免疫荧光和激光共聚焦显微镜分析干扰Nrf2后A549细胞中Nrf2、kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、抗氧化物反应元件蛋白的分布,观察各组细胞凋亡情况。结果1.Nrf2 siRNA可抑制Nrf2表达,siRNA-1组、siRNA-2组、siRNA-3组Nrf2 mRNA表达均被抑制,其中siRNA-1组的抑制效率最高(80.57%)。2.Ⅱ组Nrf2、NQO1 mRNA的相对表达量分别为4.553±0.498和5.866±0.582,与Ⅰ组相比,mRNA及蛋白表达量显著增高,细胞凋亡率[(21.67±0.75)%]增加,差异均有统计学意义(均P<0.01)。3.Ⅳ组Nrf2、NQO1 mRNA的相对表达量分别为0.937±0.057和0.789±0.058,与Ⅱ组相比,mRNA及蛋白表达显著减弱,细胞凋亡率[(35.83±0.42)%]进一步增高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论高氧暴露和siRNA导致A549细胞中Nrf2和NQO1表达异常,提示Nrf2和NQO1参与高氧肺损伤的发病过程;Nrf2、NQO1可能在高氧所致肺损伤及细胞凋亡中发挥保护作用。
翁博雯李帅蔡成孙俊芳张敏成利花
关键词:高氧肺损伤
NAD(P)H氧化还原酶-1和氨肽N荧光探针的设计合成及应用
目前癌症的研究和治疗仍然是生物医学界的的热点和难点。然而检测肿瘤相关是靶向抗癌的一个切入点,本文设计了两个探针,分别检测在肿瘤细胞中高表达的两种:人类NAD(P)H氧化还原酶同工-1(hNQO1)和氨肽N(A...
石潇
关键词:荧光探针氨肽酶N
文献传递
NADPH氧化还原酶1过表达在甲状腺髓样癌预后评估中的意义被引量:4
2015年
甲状腺髓样癌(MTC)约占全部甲状腺癌的8%~10%,其临床表现复杂多样,易于局部扩散和远处转移,恶性程度高,预后差。因此,寻找MTC的早期诊断及预后评估的有效分子靶标是临床治疗MTC亟待解决的关键问题。NADPH氧化还原酶1(NQ01)可专一性的催化真核细胞内类物质及其衍生物发生双电子还原反应,从而对类物质的损伤形成一种保护机制。
金哲洙崔雪莲张源杨洋李龙山林贞花陈丽艳
关键词:甲状腺髓样癌预后评估NAD(P)H:醌氧化还原酶过表达甲状腺癌远处转移
茚并三嗪类化合物作为依赖NAD(P)H氧化还原酶底物的用途
本发明公开了一系列茚并三嗪类化合物作为依赖NAD(P)H氧化还原酶底物的用途。这一系列茚并三嗪类化合物经依赖NAD(P)H氧化还原酶催化发生氧化还原循环反应,产生大量活性氧自由基,诱导强烈的氧化应激,从而对依赖N...
杨弋赵玉政呼庆勋苏倪王傲雪
文献传递
苏云金芽孢杆菌NAD(P)H:氧化还原酶基因的克隆和敲除载体的构建被引量:2
2012年
以苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种(Bacillus thuringiensis subsp.kurstaki)8010为研究材料,通过PCR技术获得Bt 8010菌株NAD(P)H:氧化还原酶基因上下游2个片段,以含有卡那霉素抗性基因的pDG780质粒为中间载体,通过切、连接和PCR,构建含待敲除NAD(P)H:氧化还原酶基因上下游片段、卡那霉素抗性基因的重组质粒pRN5101DKU,为后续Bt8010菌株NAD(P)H:氧化还原酶基因的敲除做准备.
李今煜肖水华黄天培
关键词:苏云金芽孢杆菌基因敲除载体
NAD(P)H:氧化还原酶1对多巴胺能细胞的保护作用被引量:2
2011年
目的:研究多巴胺(DA)对多巴胺能细胞的毒性作用、NAD(P)H:氧化还原酶1(NQO1)的保护作用及其机制。方法:运用MTT法检测多巴胺对神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)活性的影响;运用脂质体转染或Ⅱ相诱导剂预处理的方法对细胞进行预处理,并用免疫荧光方法检测转染效率;运用蛋白质印迹(Western blotting)方法检测细胞经过不同处理后胞内NQO1蛋白的表达情况;运用蛋白检测方法(硝基四氮唑蓝/甘氨酸法)检测细胞经不同处理后胞内化蛋白含量的变化。结果:多巴胺对细胞具有剂量依赖性毒性,且与细胞内化蛋白的含量相关;脂质体转染和Ⅱ相诱导剂萝卜硫素(SF)均能使细胞内NQO1表达量增高;NQO1高表达能缓解多巴胺对细胞造成的毒性;细胞内NQO1表达量增高能减少多巴胺引起的细胞内化蛋白含量。结论:细胞内NQO1的过表达可以减轻多巴胺对细胞产生的毒性作用。
王艳王娜俞国华袁崇刚
关键词:多巴胺SH-SY5Y细胞
温州地区汉族人群NADPH氧化还原酶1 C609T基因多态性与马兜铃酸肾病的关系
2010年
马兜铃酸肾病(AAN)是指服用含有马兜铃酸(AA)成分的中草药导致的急、慢性肾小管间质性疾病。AAN的发病存在较大的个体差异,摊测可能与参与AA生物转化的代谢基因多态性有关。
孙梅许菲菲陈必成章建娜林凡
关键词:代谢酶基因多态性马兜铃酸肾病NAD(P)H:醌氧化还原酶汉族人群
NADPH:氧化还原酶1对马兜铃酸还原代谢和肾毒性的影响
目的马兜铃酸(AA)主要成分AAI可致实验动物严重肾损伤。硝基还原是AAI体内代谢清除过程的必要步骤,但参与此过程的代谢及其在AAI肾毒性中的作用尚不明确。本研究探讨了在肾脏中活性较高的胞浆还原酶NADPH:氧化...
陈敏宫丽崑任进
关键词:马兜铃酸肾毒性双香豆素
文献传递

相关作者

王瑞
作品数:122被引量:524H指数:12
供职机构:河北医科大学第四医院
研究主题:食管癌 肺癌 基因多态性 非小细胞肺癌 肺肿瘤
李琰
作品数:166被引量:458H指数:10
供职机构:河北医科大学第四医院
研究主题:基因多态性 遗传易感性 发病风险 食管鳞状细胞癌 贲门腺癌
张健慧
作品数:58被引量:371H指数:11
供职机构:河北医科大学第四医院
研究主题:基因多态性 遗传易感性 食管癌 食管鳞状细胞癌 发病风险
郭炜
作品数:209被引量:524H指数:10
供职机构:中国石油天然气集团公司
研究主题:贲门腺癌 食管鳞状细胞癌 甲基化状态 甲基化 DNA甲基化
温登瑰
作品数:97被引量:699H指数:13
供职机构:河北医科大学第四医院
研究主题:食管癌 抗突变 贲门癌 致突变 上消化道癌