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鸽圆环病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用: 2025年; 为了建立鸽圆环病毒(PiCV)的快速检测方法,依据PiCV Rep基因的保守序列区域设计了荧光定量PCR的引物和探针,并建立了快速检测PiCV的荧光定量PCR方法。结果显示,构建的PiCV荧光定量PCR方法在1.44×10,1~1.44×10^(7)/μL拷贝标准品间具有良好的线性关系,线性相关系数达0.9866;该方法具有良好的敏感性,其检测病毒系列含量下限为14.4拷贝/μL;该方法特异性良好,与鸽新城疫病毒、鸽疱疹病毒、鸽腺病毒等病毒及鸽组织DNA不存在交叉反应;该方法重复性较好,批内重复试验变异系数均介于0.454%~0.473%,批间重复试验变异系数均介于0.367%~0.869%。与传统普通PCR方法相比,所建立的PiCV荧光定量PCR方法敏感性更高,临床样品PiCV检出率更高,两者检测符合率为93.75%。结果表明,所建立的PiCV荧光定量PCR方法为临床检测鸽圆环病毒提供了一种快速、灵敏的检测方法,为PiCV的流行病学调查和主动监测提供了技术支撑。; 刘存刘砚涵祝夕超李法凯张栋邵新宇田野孙圣福陈静; 关键词：荧光定量PCR

奶牛乳房炎5种致病菌多重PCR检测方法的建立与应用: 2025年; 为建立一种能快速检测奶牛乳房炎主要病原菌(大肠埃希氏菌、无乳链球菌、肺炎克雷伯氏菌、金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌)的多重PCR检测方法,根据大肠埃希氏菌phoA基因、无乳链球菌ef-tu基因、肺炎克雷伯氏菌Khe基因、金黄色葡萄球菌Nuc基因和肠炎沙门氏菌invA基因设计特异性引物,优化PCR反应体系与反应程序并进行特异性试验,同时分别构建含病原菌基因的pMD-19T重组质粒进行灵敏性试验。结果显示,多重PCR反应的最适引物工作浓度为0.8μmol/L,最适退火温度为59.6℃,最佳延伸时间为40 s,最合适的循环数为30次;优化后的多重PCR反应体系可扩增出5种目标病原菌的特异性条带;5种病原菌PCR检测灵敏度可达到5 copies/μL。进一步利用该多重PCR反应体系对采集的108份乳房炎乳样进行检测,检测结果显示,108份样本的阳性检出率为77.8%,大肠埃希氏菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌和肠炎沙门氏菌的检出率分别为23.1%、8.3%、34.3%、8.3%、5.6%。结果表明,建立了一种具有良好特异性和灵敏性的多重PCR检测方法,在临床生产实践中可用于快速鉴定奶牛乳房炎的致病菌,为奶牛乳房炎的诊断、防控与流行病学调查提供了方法基础。; 王雪容张宇张海森杨王浩靳亚平陈华涛; 关键词：奶牛乳房炎病原菌多重PCR

荧光PCR检测仪: 本发明提供一种荧光PCR检测仪，涉及荧光检测技术领域。荧光PCR检测仪包括：加热台主体部及加热台分体部，加热台分体部可拆卸式连接于加热台主体部；加热模块，加热模块与加热台主体部连接；荧光信号检测模块，适于获取样品的荧光检...; 苏勋文刘东东武瑾马润国肖佳铭王永林唐晨石娟任利利王晓旭

一种实时荧光定量PCR检测装置: 本发明涉及荧光定量PCR技术领域，提出了一种实时荧光定量PCR检测装置，包括壳体和荧光定量PCR检测装置本体，所述壳体位于荧光定量PCR检测装置本体的内腔并与荧光定量PCR检测装置本体固定连接，所述荧光定量PCR检测装置...; 张玉新贾浩程韩泽雨于录国李润刘永刚王建栋路璐

一种大小鼠病毒项多重PCR检测方法: 本发明涉及鼠病检测方法技术领域，且公开了一种大小鼠病毒项多重PCR检测方法，包括以下步骤：S1、准备待测样品核酸；S2、准备阴性质控品、阳性质控品和无模版对照；S3、将待测样品核酸、阴性质控品、阳性质控品和无模版对照分别...; 冯小龙张利清孙云雷李海琳曹满园

柑桔溃疡病菌PCR检测方法(引物)筛选: 2024年; 为准确检测柑桔溃疡病菌,减少检测过程中假阳性和假阴性结果,进而为农业执法部门和口岸一线检疫鉴定提供参考,采用已报道的14对常规PCR和实时荧光PCR引物/探针,对来自不同国家和地区的22株柑桔溃疡病菌及9株黄单胞菌属其他菌株进行了特异性测试和灵敏度比对分析,对优选引物采用9份具柑桔溃疡病症状的样品进行检测验证。结果表明,引物对JYF5(XccF05)/JYR5(XccR05)和Xac01/Xac02的检测特异性高,对柑桔溃疡病菌DNA的检测灵敏度均为3 pg/μL;其他12对引物/探针会出现不同程度上的假阳性或假阴性,其中,XAcF/XAcR对来自泰国的酸橙样品和阳性菌株进行检测均为假阴性。推荐JYF5(XccF05)/JYR5(XccR05)和Xac01/Xac02这2对引物用于柑桔溃疡病菌的检测。; 滕少娜孙涛周林孔德英姚廷山李敏易建平; 关键词：柑桔溃疡病菌引物常规PCR 实时荧光PCR

杜鹃芽枯病菌PCR及实时荧光PCR检测: 2024年; 根据GenBank中杜鹃芽枯病菌(Seifertia azaleae)及其相关种ITS序列设计特异引物SA1/SA2和探针SA-P,建立杜鹃芽枯病菌常规PCR和实时荧光PCR检测方法。引物SA1/SA2能扩增5株S. azaleae菌株DNA,得到351 bp的预期扩增产物,其他供试菌株均不能扩增出预期产物,检测灵敏度达60 pg菌体DNA。探针SA-P对5株S. azaleae均表现为阳性扩增,其他供试菌株均为阴性扩增,检测灵敏度可达60 fg菌体DNA,比常规PCR高1000倍。对杜鹃花苞样品和叶片样品的检测结果表明常规PCR和实时荧光PCR检测方法均可用于进境杜鹃种苗中杜鹃芽枯病菌的快速检测。; 龚静如段维军龚婕王寅鹏崔金璐易建平; 关键词：常规PCR 实时荧光PCR

一种非洲猪瘟三重荧光定量PCR检测试剂盒: 本发明公开了一种非洲猪瘟三重荧光定量PCR检测试剂盒，包括ASFV p72基因特异引物探针、内参猪β‑actin的引物探针、ASFV I177L基因特异引物探针和ASFV MGF基因特异引物探针中的至少一种，本发明提供的...; 韩相敏马晶晶赖志林李明贾济宇孟楠孔维苏高俊锋盘金华

数字PCR检测装置和PCR检测方法: 提供一种可高精度检测溶解曲线的数字PCR检测装置和PCR检测方法。该数字PCR检测装置为检测试样内所含的DNA的数字PCR检测装置，包括：控制被供应试样的试样容器的温度的温度调节器，所述试样容器以平面阵列状配置了作为多个...; 中川树生田中淳子岛崎让原田邦男

犊牛腹泻主要病原三重荧光定量PCR检测方法及其应用: 本发明公开了一种犊牛腹泻主要病原三重荧光定量PCR检测方法及其应用，属于分子生物学检测技术领域。本发明解决了常规PCR在灵敏度、效率和病原含量测定等方面存在不足的问题。所述检测方法以待检测样品的RNA或DNA为模板，选择...; 尹鑫王芳常继涛姜志刚

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