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抑制血管紧张素原基因表达的RNAi抑制剂及其应用: 本发明涉及一种用于抑制血管紧张素原(AGT)表达的siRNA，包括正义链及反义链，所述正义链序列如AGCCCACAGAGUCUACCCAAU所示；所述反义链序列如AUUGGGUAGACUCUGUGGGCUCU所示。还提供...; 刘新建范福顺高明章莫振先马亚茹刘海淇王斌杰周敏华钱长庚

抑制血管紧张素原基因表达的RNAi抑制剂及其应用: 本发明涉及一种用于抑制血管紧张素原(AGT)表达的siRNA，包括正义链及反义链，所述正义链序列如AGCCCACAGAGUCUACCCAAU所示；所述反义链序列如AUUGGGUAGACUCUGUGGGCUCU所示。还提供...; 刘新建范福顺高明章莫振先马亚茹刘海淇王斌杰周敏华钱长庚

RNAi抑制高迁移率族蛋白B2表达对人肝癌细胞HepG2迁移及侵袭能力的影响及机制: 2023年; 目的采用RNA干扰技术下调肝癌细胞中高迁移率族蛋白B2(HMGB2)的表达,观察其对肝癌细胞迁移及侵袭能力的影响,并阐明其作用机制。方法体外培养人肝癌细胞HepG2,分为HMGB2 RNA干扰组(HMGB2 siRNA)及阴性对照组(NC),分别以脂质体2000为载体,转染敲除HMGB2序列的RNA寡核苷酸(RNA oligo)及RNA干扰无关序列。采用RT-qPCR及Western blot法检测细胞中HMGB2 mRNA及蛋白表达水平以验证干扰效果;采用细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测敲低HMGB2对肝癌细胞迁移及侵袭能力的影响;Western blot法检测敲低HMGB2对HepG2细胞EMT相关蛋白表达的影响。结果HMGB2 siRNA组细胞HMGB2 mRNA及蛋白表达水平低于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),表明RNA干扰成功;细胞划痕及Transwell侵袭实验结果显示,HMGB2 siRNA组细胞愈合率及侵入小室的细胞数量少于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),表明下调HMGB2表达可降低HepG2细胞的迁移及侵袭能力;Western blot结果显示,HMGB2 siRNA组HepG2细胞N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平低于NC组,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论下调HMGB2表达可抑制肝癌细胞的上皮间质转化进程,进而降低其迁移及侵袭能力。; 魏雁虹杨晨雪杨广民宋帅李明杨海娇魏海峰; 关键词：肝癌迁移上皮间质转化

应用Zidovudine与RNAi抑制J亚群禽白血病病毒的体外复制: 禽白血病是由逆转录病毒科的禽白血病病毒（Avian leukosis virus,ALV）感染所致的一种传染性肿瘤疾病,给全球养禽业造成了巨大的经济损失。根据病毒囊膜糖蛋白的特性不同,可将ALV分为A-K共11个亚群,其...; 王群; 关键词：禽白血病病毒齐多夫定逆转录酶

RNAi抑制小菜蛾Br-Z2/3基因对下游细胞凋亡基因表达及化蛹的影响被引量：1: 2021年; 【目的】本研究旨在构建用于小菜蛾Plutella xylostella蛹期特异表达基因Br-Z2/3 dsRNA合成的体外原核表达系统,研究RNAi抑制Br-Z2/3基因对小菜蛾Br-Z2/3和细胞凋亡基因表达及化蛹的影响。【方法】构建小菜蛾L4440-Br-Z2/3重组载体,转化大肠杆菌Escherichia coli HT115感受态细胞,经IPTG诱导大量获得Br-Z2/3 dsRNA,显微注射Br-Z2/3 dsRNA至小菜蛾4龄幼虫进行RNAi;qPCR检测干扰Br-Z2/3基因12和24 h后小菜蛾4龄幼虫Br-Z2/3及其下游细胞凋亡基因reaper,caspase-9和Gadd45g的表达量;观察并统计Br-Z2/3 RNAi后小菜蛾4龄幼虫的化蛹率、平均化蛹时间、蛹畸形率和幼虫死亡率。【结果】成功实现了Br-Z2/3 dsRNA的原核表达。qPCR结果表明,RNAi干扰Br-Z2/3后,小菜蛾4龄幼虫Br-Z2/3基因和相关联的细胞凋亡基因reaper表达量显著下降,但caspase-9和Gadd45g表达量显著上升。注射Br-Z2/3 dsRNA的处理组,化蛹率显著低于对照组,且化蛹高峰期推迟,幼虫死亡率显著高于对照组且畸形蛹率增加。【结论】本研究成功构建了用于小菜蛾Br-Z2/3基因dsRNA合成的体外原核表达系统,利用显微注射法对Br-Z2/3进行RNA干扰,证明Br-Z2/3是调控小菜蛾化蛹的关键基因。; 胡晓汉田素芬李亚勍林硕陈艺欣魏辉顾晓军黄劲飞王曦莹李志华; 关键词：小菜蛾细胞凋亡基因化蛹

中蜂囊状幼虫病毒RNAi抑制因子筛选及机制研究: 目的本研究以建立绿色荧光蛋白和双荧光素酶基因的RNA干扰体系为模型,对中蜂囊状幼虫病毒（Chinese sacbrood virus,CSBV）的RNAi抑制因子进行筛选,探讨CSBV逃避RNAi作用过程可能机制,并通过...; 王琛; 关键词：结构蛋白 RNA干扰 DICER酶; 文献传递

番茄miRNA通过跨界RNAi抑制灰霉病菌侵染的活性鉴定及分子机制研究: MiRNA是一类不编码蛋白质的单链小分子RNA，通过与靶RNA的互补结合，诱导基因沉默，参与对真核生物的生长发育及逆境胁迫应答调控。研究发现:miRNA可以在相互作用的有机体之间传播，并在对方体内诱导基因沉默，这种机制被...; 孟鑫; 关键词：番茄灰霉菌病菌侵染; 文献传递

赤拟谷盗TRE基因家族特性及RNAi抑制表达效果分析被引量：2: 2019年; 分析赤拟谷盗海藻糖酶基因(Trehalase,简称TRE)家族的特性及RNAi介导的TRE基因沉默后的相互作用效果。采用生物信息学和相关软件分析5个海藻糖酶基因序列特征以及二级结构等分子特性并推测其生理功能,用MEGA 6.0软件构建TRE与其它昆虫TRE的系统进化树;采用注射RNAi技术,分别干扰赤拟谷盗海藻糖酶基因mRNA的表达;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测单个海藻糖酶基因表达抑制后对其它TRE基因mRNA表达的影响。赤拟谷盗4个可溶性海藻糖酶TRE1蛋白相似性高,具有类似的二级结构,即含有相似比例的α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲,膜结合型海藻糖酶TRE2与TRE1在蛋白质的二级结构上差异较大;系统进化树分析表明赤拟谷盗的可溶性海藻糖酶与其它昆虫的TRE1聚集在一起,膜结合型海藻糖酶与其它昆虫的TRE2聚集在一起;RNAi实验结果表明单独干扰某个TRE1基因的mRNA表达后,其它3个TRE1基因的表达有的上升,有的下降,而TRE2基因表达都为显著下降;单独干扰TRE2基因表达,则其它4个TRE1基因的表达一致显著下降。赤拟谷盗可溶性TRE1和膜结合型TRE2的二级结构差异较大,单个TRE基因表达被抑制后,其他TRE基因存在连锁抑制或者互补功能。; 唐斌唐斌肖仲久曾伯平潘碧莹李昆李昆; 关键词：赤拟谷盗海藻糖酶基因特性 RNAI

异色瓢虫酪氨酸羟化酶基因不同发育历期表达及RNAi抑制黑化效果分析被引量：2: 2019年; 酪氨酸代谢在昆虫黑色素形成中具有重要的调控作用。本研究为探讨酪氨酸代谢调控异色瓢虫黑色素代谢平衡及其发育的影响,先检测异色瓢虫不同发育阶段酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)基因表达情况,采用RNAi技术对4龄幼虫注射dsTH RNA抑制酪氨酸羟化酶mRNA表达,探索其在蛹期和成虫羽化阶段黑色素形成中的潜在功能。研究结果表明,TH基因在4龄幼虫体内的表达量最高,而在预蛹阶段和羽化后第2天开始表达量显著性下降。其次,dsTH RNA注射后能够显著降低TH本基因的表达,且异色瓢虫4龄幼虫发育缩短,与注射dsGFP RNA组相比较,提前化蛹。最后,dsTH RNA注射后异色瓢虫蛹的重量略有增加,且发育出现异常,即蛹的颜色变化不加深,与对照组相比较,无黑色斑点出现。这些结果表明成虫是在蛹期开始形成黑色素的,及酪氨酸羟化酶能够通过调控酪氨酸代谢途径而影响异色瓢虫化蛹阶段的发育和表皮颜色的变化。相关研究结果有助于丰富酪氨酸代谢调控异色瓢虫表型的内容,为将来保护异色瓢虫,并将其用于害虫生物防治提供理论基础。; 张道伟王莎莎张萌钱正敏曾伯平唐斌; 关键词：异色瓢虫酪氨酸羟化酶 RNA干扰

RNAi抑制NOB1表达对肝癌BEL-7402细胞增殖及p38MAPK磷酸化水平的影响被引量：2: 2019年; 目的:探讨RNAi下调Nin1结合蛋白(NOB1)表达对肝癌细胞增殖及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)磷酸化水平的影响。方法:以肝癌BEL-7402细胞作为研究对象,将肝癌细胞分为空白对照组、siRNANC组、NOB1 siRNA组3组,其中siRNA-NC组、NOB1 siRNA组分别为稳定感染阴性对照慢病毒和NOB1 siRNA慢病毒的肝癌细胞,空白对照组为不做慢病毒感染的肝癌细胞。用qRT-PCR和Western blot检测干扰效果。CCK-8法测定细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞中磷酸化p38MAPK和活化的Caspase-3蛋白的表达情况。结果:NOB1 siRNA组细胞中NOB1表达水平、细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,磷酸化p38MAPK和活化的Caspase-3蛋白表达水平升高,与空白对照组、siRNA-NC组比较,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论:下调NOB1表达具有抑制BEL-7402细胞增殖、诱导细胞凋亡、促进细胞中p38MAPK磷酸化的作用。; 张斌刘岳林建清倪亚安毛盛名; 关键词：肝癌 BEL-7402细胞 P38MAPK

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