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基于直扩RT-PCR技术的寨卡病毒快速检测方法的建立: 2024年; 目的建立基于直扩实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术的寨卡病毒快速检测方法。方法采用特殊功能的DNA聚合酶,以及优选PCR增强剂,以此建立直扩RT-PCR技术的寨卡病毒快速检测5种样本(全血、血清、唾液、咽拭子和尿)的方法。结果5种样本检测限分别为血清103 PFU/mL,尿、咽拭子和唾液102 PFU/mL,全血104 PFU/mL,标准曲线的拟合优度的可决系数均在0.98以上,扩增效率均在90%~110%;寨卡病毒核酸成功扩增,非寨卡病毒核酸均未能扩增;尿、全血和唾液样本的重复性实验中106 PFU/mL和102 PFU/mL两个浓度的6个重复Ct值的变异系数均<5%。该研究建立的直扩RT-PCR技术的寨卡病毒检测方法与常规RT-PCR技术的检测结果一致,8个寨卡病毒样本,均只检测出2个血清样本,其余62个非寨卡病毒样本及12个阴性样本均未得到扩增。结论成功建立基于直扩RT-PCR技术的寨卡病毒快速检测方法,该方法简便快捷且灵敏度高、特异度强。; 李浪古莉冰朱丽何建安叶颖张然李华文李福缘顾大勇; 关键词：DNA聚合酶

应用RT-PCR技术检测动物组织中的口蹄疫病毒: 2023年; 为探究RT-PCR技术在口蹄疫病毒中的应用,采集4家养殖场不同猪、牛、羊群血清样本共300份,检测口蹄疫O/GX/09-7株,按照病料处理、标准品RNA制备、DNA的聚合酶链式扩增、回收纯化、感受态细胞制备、阳性菌液保存步骤,以仪器(试剂)默认值为参考,判断检测结果。检测结果表明猪阳性率病例数为2例,阳性病例占比为1.92%(2/104),牛羊阳性率较低,各为1例,阳性病例占比分别为0.98%(1/102)、1.06%(1/94),总检出率1.33%(4/300)。相关部门和技术人员应根据口蹄疫检测结果,依据阳性病例数量、日龄、高发时段、高发动物类型等,第一时间做好消毒、扑杀、净化等一系列处理工作,以进一步控制疫情蔓延。; 叶尔保勒阿斯喀·夏热甫汉; 关键词：口蹄疫病毒 RT-PCR技术

RT-PCR技术在新型冠状病毒核酸检测的应用及质量评价分析: 2023年; 在新型冠状病毒感染患者的诊断中,采取有效检测方式进行及早诊断尤为重要。逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术有较高灵敏度和特异度。本文分析临床应用RT-PCR技术检测新型冠状病毒的常见问题和应对策略,旨在为疫情防控常态化形势下临床实验室正确、高效开展新型冠状病毒检测提供参考意见。; 李泽锐高静刘兴旺; 关键词：新型冠状病毒核酸检测

一种采用荧光RT-PCR技术检测秦岭细鳞鲑视锥视蛋白基因表达量的方法: 本发明公开了一种采用荧光RT‑PCR技术检测秦岭细鳞鲑视锥视蛋白基因表达量的方法，来检测秦岭细鳞鲑视锥视蛋白基因表达量，该检测方法操作简单便捷，避免引入其他误差因素，结果稳定性高，荧光检测的灵敏度高，特异型强，结果是直接...; 邵俭郭星辰王艺舟熊冬梅王桢璐姜海波甘雷

一种基于RT-PCR技术检测RB-N1基因型柑橘衰退病毒用试剂盒及其检测方法: 本发明提供了一种基于RT‑PCR技术检测RB‑N1基因型柑橘衰退病毒用试剂盒及其检测方法，属于植物病理学技术领域。本发明针对前期研究中分离的RB‑N1基因型柑橘衰退病毒设计一对特异性强的引物对，并建立了一种基于RT‑PC...; 易龙李双花周俊黄爱军苏华楠

基于恒温隔绝式荧光RT-PCR技术现场检测牛纽布病毒方法的建立及应用被引量：3: 2022年; 纽布病毒(nebovirus,NeV)是引起犊牛腹泻的新发病原,本试验旨在建立基于恒温隔绝式RT-PCR(insulated isothermal RT-PCR,iiRT-PCR)技术现场检测NeV的方法。根据NeV的RdRp基因的保守区域,设计并合成引物和探针,优化检测体系和检测试剂预混方法,建立检测NeV的iiRT-PCR方法。结果显示,成功建立了检测NeV的iiRT-PCR方法,该方法只特异性检出NeV,对牛冠状病毒、牛诺如病毒、A群牛轮状病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛凸隆病毒、牛大肠杆菌、牛沙门菌、牛瑞氏隐孢子虫和牛艾美尔球虫等无关病原不检出,批间变异系数为3.07%~3.12%,批内变异系数为2.45%~3.01%,检测下限为5.38 copies·μL^(-1)。应用此方法对2020—2021年采集自红原县、若尔盖县、凉山彝族自治州西昌市和阆中市的101份犊牛腹泻样本进行检测,NeV的检出率为64.36%。本研究成功建立了检测NeV的iiRT-PCR方法,具有特异性强、稳定性好和灵敏度高的特点,检测试剂预混后配合使用PetNAD核酸萃取试剂盒,可实现NeV的现场检测,从核酸提取到报告检测结果仅需1 h,操作方便,为NeV的快速诊断提供了有力的工具。; 崔雨晨岳华汤承

RT-PCR技术检测非洲猪瘟病毒的作用研究: 2022年; 2018年非洲猪瘟病毒在中国出现并蔓延,造成养猪业巨大损失。非洲猪瘟来势汹汹,如何对非洲猪瘟进行有效的检测对防治猪瘟病毒至关重要。RT-PCR检测技术是当前较好的一种检测方法。本文主要分析了RT-PCR技术检测猪瘟病毒的效果。; 李兴旺; 关键词：RT-PCR技术非洲猪瘟病毒

医院研究生RT-PCR技术的“三步法”科研带教被引量：1: 2022年; 随着研究生招收规模的逐年扩大和研究型医院的加速转型,在医院实验室开展课题研究工作的研究生数量日益增加。医院研究生RT-PCR技术科研带教过程中存在的主要问题有:学生基础知识参差不齐、既往动手实践机会少、存在知其然不知其所以然和缺乏系统高效的RT-PCR技术培训体系等情况。通过总结本实验室多年来的有益做法和经验教训,并参考相关单位的情况,依照循序渐进、由浅入深和理论联系实际的总体原则,将医院研究生的RT-PCR技术科研带教工作凝练为“三步法”科研带教模式,分别为最初的感性认识培养阶段、动手实操的理性认识培养阶段和最终理论联系实际的深刻认识培养阶段。实践表明,该教学模式能够增强研究生分析和解决实际问题的能力,可迅速提升科研带教效果。; 罗渊梅竹松郭丙乾房龙梅王广云; 关键词：医院实验室实时荧光定量PCR

FPSA/TPSA联合DD3mRNA(RT-PCR技术)检测在前列腺癌早期诊断的探讨: 2021年; 对比和分析FPSA/TPSA联合DD3mRNA(RT-PCR技术)检测在前列腺癌早期诊断意义。方法:对fPSA∕tPSA联合DD3 mRNA检测结果在前列腺癌的相关性进行探讨。结果:fPSA∕tPSA比值法和DD3 mRNA法,两法的单独检测和两者联合检测之间其差异有统计学意义结论:本课题从fPSA∕tPSA值与DD3 mRNA在前列腺癌的单独检测以及两法联合检测结果,揭示fPSA∕tPSA值与DD3 mRNA两法联合检测对提高前列腺癌早期诊断具有其临床价值。; 梁勇彪曾江辉曾贝贝李瑞屈雅川; 关键词：RT-PCR技术

基于一步法RT-PCR技术检测或辅助检测南方番茄病毒的引物对和方法: 本发明公开了基于一步法RT‑PCR技术检测或辅助检测南方番茄病毒的引物对、RT‑PCR试剂、RT‑PCR试剂盒及其应用和方法。该引物对由引物STV‑812‑F和引物STV‑812‑R组成；所述STV‑812‑F为如下(a...; 邱艳红徐秀兰张海军田文赵桂新; 文献传递

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