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改良SDS提取书虱总RNA的效果评估
2019年
目的建立有效的提取书虱总RNA的方。方分别采取改良SDS、传统SDS和TRIzol提取书虱总RNA;采用1%琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性;核酸蛋白分析仪测定RNA纯度和浓度,纯度以A260/A280、A260/A230表示,通过浓度推算产率;以β-actin为目的基因,RT-PCR初步评价RNA提取效果。同时,用改良SDS探究不同数量的书虱总RNA提取效果。结果改良SDS产率最高。经方差分析,3种方的浓度差异具有统计学意义(F=17.874,P<0.001),经SNK每组互比,改良SDS浓度较高,其次为TRIzol,传统SDS较低。TRIzol未见28s条带;传统SDS有gDNA污染;而改良SDS电泳结果显示28s、18s条带完整清晰,条带之间无明显弥散现象,说明提取的RNA完整性较高。3种方提取的RNA经RT-PCR均能扩增出阳性条带。30只书虱即可获得高质量RNA,满足后续实验要求。结论改良SDS操作简单、成本低、耗时少,适于书虱总RNA的提取。
卢莹黄文雨黄梦蕊王波陈潜刘啸汪书然孙恩涛
关键词:RNA提取书虱
例谈植物DNA粗提取的CTABSDS与盐析被引量:4
2018年
介绍植物DNA粗提取的CTABSDS及盐析的原理与步骤,结合典例分析科学探究核心素养表现、答题要求及水平划分,旨在突破高考中DNA提取鉴定的情境材料实验设计分析题,提升实验复习的有效性。
沙丽萍
关键词:CTAB法SDS法盐析法
优化的SDS提取刺五加基因组的研究
2015年
目的:探索出利用十二烷基硫酸钠(SDS)提取刺五加基因组的最佳工艺条件,为今后提取多酚、多糖及其它次生代谢产物多的植物基因组提供参考。方:采用正交试验对提取溶剂Na Ac的浓度、SDS提取液中Na Cl的浓度、SDS的含量等条件进行优化。对DNA的提取效果,采用紫外分光光度检测、琼脂糖凝胶电泳检测进行分析。结果:OD260/OD280为1.817,无蛋白质和RNA污染。得率为6.138ng/mg,浓度为102.3ng/L。即改良的最佳方案是Na Ac的浓度为2.5mol/L,SDS的含量为2.5%,SDS提取液中Na Cl的浓度为0.35mol/L。
杨祥波
关键词:刺五加DNA提取SDS法
A Rapid Metagenomic DNA Extraction from Sediments: Potassium Dichromate SDS Method被引量:2
2015年
[Objective] The objective of this study was to report an improved method for rapid DNA extraction from black-order sediments, without any purification step. [Methods] Sediments in eutrophic lake are complex ecosystems and soil microbes involved in anthropogenic nutrient cycling are very important. DNA-based molecular methods offer new tools for characterization of these mixed communities of mi- croorganisms. However, it is very difficult to remove humic substances, heavy met- als that co-existed with genome DNA representing the microbial community directly from these complex systems and can interfere with subsequent genetic analysis. The potassium dichromate solution was firstly used to remove humic substances. [Results] The steps of removing humic substances and DNA extraction were per- formed simultaneously that improved the speed of extraction to approximately 1 hour and the nucleic acids that were obtained with this method did not need to be washed with 70% ethanol and dissolved directly in sterile water for total bacterial 16S rDNA, nosZ gene of denitrifying bacteria, pmoA of methanotrophs, nifH of nitro- gen-fixing bacteria, amoA of ammonia-oxidizing bacteria and ammonia-oxidizing ar- chaea molecular ecology analyses. [Conclusion] This method could provide a plat- form for preparing a fast sediments DNA extraction.
李靖宇
关键词:MICROORGANISMSEDIMENT
用改良SDS提取适于PCR扩增的小麦基因组DNA被引量:9
2014年
由于PCR技术已经被广泛地应用于小麦分子生物学研究领域中,因此建立一种适合PCR扩增的DNA快速提取方十分必要。对传统的SDS提取进行改良和优化后,经检测发现,改良后的SDS提取提取的小麦基因组DNA产量高、纯度好,适用于PCR分析。与传统的CTAB相比,改良的SDS的特点是快速、试验成本低、污染少、可在室温下简便操作,因此研究结果为大批量DNA样品的提取提供了参考。
侯泽菁常廼滔
关键词:小麦DNA提取SDSPCR
采用CTAB与SDS提取白术DNA的研究被引量:5
2013年
[目的]获取白术中高质量基因组DNA。[方]选取新鲜白术叶片,破碎细胞壁,用经改良的CTAB与SDS进行DNA分离纯化提取。[结果]改良CTAB提取的DNA OD值为1.8~1.9,较改良SDS的OD值(1.5~1.6)高。[结论]改良CTAB提取的DNA浓度和纯度较高,可作为模板用于后续分子标记的研究。
黄恒王晓丽
关键词:白术CTABSDS
提取板栗DNA的CTABSDS的比较被引量:5
2012年
分别采用十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)和十二烷基磺酸钠(SDS)提取板栗(Castanea mollis-sima BL.)基因组DNA,取适量DNA进行琼脂糖凝胶电泳,并利用紫外可见分光光度计测定所提取的DNA在260和280 nm的吸光度及其比值,利用Eco RⅠ和MseⅠ双酶切后进行随机扩增长度多态性(AFLP)分析。结果表明,两种方均能从板栗中提取出一定质量的、比较完整的、纯度比较高的DNA,SDS提取的板栗DNA的纯度更高、质量更好。
王少斌程水源王燕许锋姜德志陈慧娟李琳玲程华
使用改良的SDS提取银杏不同器官DNA的研究被引量:2
2012年
使用改良的SDS提取银杏老枝、半木质化嫩枝韧皮部及叶子的基因组DNA,结果表明:从嫩技韧皮部和嫩叶提取DNA可获得较好的效果,但老叶提取DNA因杂质较多,需要多次纯化。
廖云蓉
关键词:银杏DNA提取
改良SDS提取多种植物基因组DNA研究被引量:34
2011年
结合传统SDS提取DNA和Silica吸附柱纯化DNA的优点,建立了能进行多种植物基因组DNA提取的改良SDS,为提取植物基因组DNA通用方的建立提供了参考。
单志吴宏亮李成磊陈惠吴琦
关键词:基因组DNA植物
SDS和CTAB提取西藏黄籽油菜干种子DNA用于SSR分析被引量:13
2011年
选用8个西藏黄籽油菜干种子作材料,分别采用SDS和CTAB的微量提取基因组DNA,取适量的该DNA进行琼脂糖凝胶电泳,并利用uv1100型紫外分光光度计测定所提取的DNA在260nm、280nm的光密度值及比值,并进行SSR标记。结果表明,2种方均能从西藏黄籽油菜干种子中提取出一定量的比较完整且纯度较高的DNA,用琼脂糖凝胶检测时,表现带型清亮,每个样品带型较一致,利用SDSCTAB提取西藏黄籽油菜干种子DNA,均适用于SSR分析。但用CTAB提取的干种子DNA的纯度更高、量多、质量更好,更适于制备SSR分子标记的模板DNA。
旦巴何燕卓嘎孟霞王建林
关键词:黄籽油菜干种子CTAB

相关作者

石庆华
作品数:45被引量:214H指数:8
供职机构:新疆农业大学农学院
研究主题:鹰嘴豆 CTAB法 SDS法 NACL胁迫 棉花
李喜凤
作品数:97被引量:474H指数:12
供职机构:河南中医药大学
研究主题:蒲公英 桔梗 指纹图谱 HPLC HPLC指纹图谱
张桦
作品数:117被引量:309H指数:8
供职机构:新疆农业大学
研究主题:梭梭 克隆 鹰嘴豆 NAC转录因子 基因克隆
代培红
作品数:103被引量:283H指数:10
供职机构:新疆农业大学
研究主题:棉花 基因克隆 大赖草 克隆 陆地棉
牛慧媛
作品数:5被引量:19H指数:3
供职机构:公安部物证鉴定中心
研究主题:DNA检验 SDS法 PCR 法医物证学 DNA提取方法