搜索到374篇“ T-RFLP技术“的相关文章
- 基于DNA条形码和PCR-RFLP技术的进口紫草ITS2序列特征研究
- 2024年
- 目的:基于DNA条形码和PCR-RFLP技术研究进口紫草ITS2序列的特征,为市场紫草药材和饮片的质量控制与真伪鉴别提供参考依据。方法:选用ITS2区域作为对进口紫草和紫草对照药材进行比较、鉴定的DNA条形码序列,并基于DNA条形码和PCR-RFLP技术比较不同来源进口紫草的ITS2序列与紫草对照药材的异同。结果:39份进口紫草样品经限制性内切酶AluI酶切后,其产物的琼脂糖凝胶电泳检测结果显示,仅DH3在500 bp左右有条带,而在100~300 bp无条带,其余样品均在100~300 bp有2条或3条明显条带;进口紫草样品与紫草对照药材的ITS2序列进行比对,其中样品DH3与紫草对照药材的碱基差异最多,有15个碱基差异,样品F2与紫草对照药材的ITS2序列一致,其他进口紫草样品与紫草对照药材的碱基差异为1~9个碱基;从聚类结果中可以看出进口紫草样品DH3与其他进口紫草样品和紫草对照药材均明显区分,独自为一枝,而与紫草对照药材共同聚为一枝且支持率≥50%的样品共有14个。结论:选用ITS2区域,基于DNA条形码和PCR-RFLP技术,比较了进口紫草与紫草对照药材ITS2序列的异同,为紫草药材及饮片的有效鉴定提供参考依据,为紫草药材的市场监管提供有力保障。
- 刘杰戴胜云谷海媛乔菲连超杰过立农郑健马双成米加
- 关键词:DNA条形码限制性内切酶
- 一种基于PCR-RFLP技术快速鉴定哈蟆油的方法
- 本发明属于中药材鉴定领域,涉及一种采用DNA分子鉴定技术鉴定中药材哈蟆油的方法,特别涉及一种PCR‑RFLP法快速鉴定中药材哈蟆油及其真伪的方法。基于限制性片段长度多态性聚合酶链反应,扩增待检测样品的cyt‑b基因特定片...
- 王东夏明钰刘姣
- 基于RT-PCR和RFLP技术鉴别鸡传染性法氏囊病病毒强弱毒株的试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种基于RT‑PCR和RFLP技术鉴别鸡传染性法氏囊病病毒强弱毒株的试剂盒及其应用。所述的试剂盒含有用于扩增鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的引物对以及SpeI、SacI和StuI限制性内切酶。本发明所建立的基...
- 唐丽杰周晗王丽徐义刚李一经韩冰林庆宇
- 文献传递
- 基于PCR-RFLP技术的常见家栖鼠鼠种鉴定方法的建立及河北省HFRS宿主动物监测
- 目的: 通过建立一种家栖鼠常见鼠种的分子生物学鉴定方法,了解河北省2019年各地市鼠类动物的种类构成,结合鼠密度、携带汉坦病毒情况和基因型别等,为肾综合征出血热(Hemorrhagic Fever with Renal...
- 严慧
- 关键词:肾综合征出血热宿主动物监测家栖鼠
- 文献传递
- 利用mtCOI PCR-RFLP技术鉴别草地贪夜蛾水稻型和玉米型被引量:1
- 2020年
- 本研究基于mtCOI基因,利用相关软件及系统发育分析,筛选鉴别水稻型和玉米型草地贪夜蛾的酶切位点,并利用PCR-RFLP技术对两者进行鉴定。结果表明:水稻型个体的mtCOI基因序列在154~159 bp处存在SacⅠ酶切位点,玉米型则无该酶切位点;利用mtCOIPCR-RFLP技术可以有效鉴别草地贪夜蛾的水稻型和玉米型。本研究结果可为草地贪夜蛾水稻型、玉米型的快速鉴别及其精准防控提供参考。
- 王鹏孔宝玉朱军生国栋孔子艺胡磊褚栋
- 利用mtCOI PCR-RFLP技术鉴别草地贪夜蛾与其他3种形态相近昆虫被引量:2
- 2020年
- 【目的】田间调查发现草地贪夜蛾与甜菜夜蛾、斜纹夜蛾、粘虫常混合发生,传统的形态学鉴定方法不能快速鉴别出该虫,当前亟需快速鉴别该虫的方法。【方法】本研究分析了草地贪夜蛾与甜菜夜蛾、斜纹夜蛾、粘虫mtCOI基因序列的酶切位点,根据目的片段设计上游引物并进行PCR-RFLP验证。【结果】草地贪夜蛾个体在mtCOI片段的556~561 bp处均存在Sbf I内切酶酶切位点,斜纹夜蛾、甜菜夜蛾、粘虫均无Sbf I酶切位点。草地贪夜蛾PCR产物经过Sbf I内切酶酶切,可出现420 bp左右的特征带,斜纹夜蛾、甜菜夜蛾、粘虫种群均不能被Sbf I内切酶酶切。【结论】基于新设计引物扩增的mtCOI片段的PCR-RFLP方法可有效鉴别草地贪夜蛾与其他3个形态相近昆虫,研究结果为草地贪夜蛾的快速鉴别提供了方法。
- 孔子艺王鹏朱军生国栋迟秀丽孔宝玉胡磊褚栋
- 关键词:MTCOIPCR-RFLP
- 应用T-RFLP技术分析不同土壤温度和施肥方式下设施土壤细菌群落结构被引量:2
- 2019年
- 采用末端限制性片段长度多态性分析(T-RFLP)和荧光定量PCR技术,研究了两种土壤温度(对照不增温,10°C ±2°C;增温,20°C ±2°C)和两种施肥方式(对照不施肥;鸡粪有机肥底肥+尿素追肥)对土壤细菌群落结构及其多样性和数量特征的影响。结果表明:相同施肥方式下,土壤增温增加土壤速效养分含量,尤其在施肥时增加幅度更明显。分析显示施肥对土壤细菌群落结构的影响在不同土壤温度条件下表现不同。土壤不增温条件下,施肥增加细菌Pielou均匀度指数和Shannon-Weiner多样性指数,Simpson优势度指数降低;土壤增温条件下,则效果相反。与不增温比,增温使土壤细菌Pielou均匀度指数和Shannon-Weiner多样性指数降低,但物种个体数和Simpson优势度指数增加明显。增温改变了土壤细菌群落结构,62 bp和93 bp两种限制性末端片段在土壤增温条件下优势度提高,主要包括共生菌和杆菌。
- 董飞董飞闫秋艳李汛段增强
- 关键词:设施土壤T-RFLP技术施肥方式土壤温度
- 一种基于PCR-RFLP技术鉴定广地龙的方法
- 本发明公开了一种基于PCR‑RFLP技术鉴定广地龙的方法。本发明利用COI基因的通用引物进行PCR扩增,得到各蚯蚓品种的线粒体细胞色素氧化酶(COI)基因片段,并对其进行序列测序、对比,通过DNAMAN软件对不同品种蚯蚓...
- 黄庆毛润乾李志武
- 文献传递
- 基于文献计量法的T-RFLP技术统计分析
- 2018年
- 为全面系统地了解国内T-RFLP技术在土壤领域的研究进展,运用文献计量分析法,以中国知网(CNKI)为数据源,对2003~2017年的相关论文进行计量分析。结果表明:T-RFLP技术的发展和应用经历初期探索、技术成熟、应用受限三个阶段,且2010~2015年为相关文献发表的高峰时段;T-RFLP技术是被广泛采用的分析环境微生物群落的工具之一,但因其自身存在一定局限性,建议与其他定量分析方法相结合进行研究;山东农业大学具备优秀的科研团队,在T-RFLP技术相关研究有突出贡献,在国内占有重要地位;T-RFLP技术较为新颖且相对成熟,可以进行系统性综合性较强的研究。
- 刘淼
- 关键词:文献计量法T-RFLP土壤微生物群落
- 应用PCR-RFLP技术检测短喙矮小综合征鹅细小病毒被引量:1
- 2018年
- 为准确诊断鸭短喙矮小综合征(SBDS)以及鉴别鹅细小病毒感染鸭群中新发短喙矮小综合征鹅细小病毒(SBDS-GPV),本研究通过对GenBank登录的水禽细小病毒基因组核苷酸序列的比对分析,根据该病毒5'非编码区基因序列特征设计一对特异性引物,建立了SBDS-GPV聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测方法。特异性试验和敏感性试验显示,水禽细小病毒特异性引物可以扩增得到约200 bp的目的片段,SBDS-GPV PCR产物能够被SspⅠ酶切为140 bp和60 bp两个片段,番鸭细小病毒与德兹西氏病小鹅瘟病毒则不能被酶切,检出SBDS-GPV DNA的最低浓度为2.28×10~7拷贝/μL。利用该方法对14份疑似SBDS临床样品检测,阳性样本采用SPF鸭胚进行病毒分离,结果显示SBDS-GPV PCR-RFLP检测的阳性样本经病毒分离均为SBDS-GPV。上述研究表明,该SBDS-GPV PCR-RFLP检测方法特异性强、敏感性高,为SBDS的防控提供了有效手段。
- 王劭肖世峰林甦程晓霞程晓霞江丹丹林锋强朱小丽林锋强陈少莺
- 关键词:鹅细小病毒