搜索到34篇“ WESTERNBLOT法“的相关文章
- 以融合蛋白为抗原的简化Westernblot法诊断囊虫病被引量：8
- 1998年
- 目的：为囊虫的诊断提供简便有效的方法。方法：猪囊尾蚴ｃＤＮＡ表达文库中筛选出的β－半乳糖苷糖－猪囊虫ｃＤＮＡ编码的融合蛋白为抗原，进行简化的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析。结果：四个克隆的融合蛋白（ｃＣ１、ｃＣ２、ｃＰ１和ｃＨ１）联合使用，检测１２４例人囊虫病血清中的抗囊尾蚴ＩｇＧ抗体，阳性率达９３．７％，三个克隆的融合蛋白（ｃＣ１、ｃＣ２、和ｃＰ１）联合使用，检测３８例猪囊虫病血清中的相应抗体，阳性率达１００％，均高于各克隆融合蛋白单独使用的阳性率，且与其他寄生虫病血清无交叉反应。结论：以融合蛋白为抗原所进行的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析具有高度灵敏性和特异性，且简便易操作。
- 彭郁葱陈蕊雯孙树汉戴建新戴建新
- 关键词：囊虫病融合蛋白免疫诊断WESTERNBLOT法
- 二氢杨梅素改善抑郁样行为及应激诱导认知障碍的作用被引量：4
- 2018年
- 目的研究二氢杨梅素(DHM)对抑郁样行为及学习记忆的影响。方法将小鼠随机分成无应激+溶媒组(NS+Veh)、无应激+DHM组(NS+DHM)、应激+溶媒组(CRS+Veh)以及应激+DHM组(CRS+DHM),应激组小鼠经历10 d应激,DHM组小鼠在应激后5 d注射DHM,应激结束后所有小鼠依次进行旷场、新颖物体识别、Y迷宫、悬尾、强迫游泳等实验测试,观察DHM对小鼠的自发活动、学习记忆及抑郁样行为的作用。将WKY大鼠随机分为两组Veh组和DHM组,一部分大鼠(每组8只)依次进行旷场和FST测试,另一部分(每组4只)断头取脑,采用Western blot法检测海马内脑源性神经营养因子(BDNF)的水平。结果 CRS+Veh组小鼠在Y迷宫和新颖物体识别测试中的学习记忆能力显著低于NS+Veh组,CRS+DHM组小鼠在Y迷宫和新颖物体识别测试中的学习记忆能力显著高于CRS+Veh组,而与NS+Veh组比较,NS+DHM组在Y迷宫和新颖物体识别测试中的学习记忆能力无显著性差异; CRS+Veh组小鼠在悬尾和强迫游泳测试中的不动时间显著高于NS+Veh组,CRS+DHM组小鼠在悬尾和强迫游泳测试中的不动时间显著低于CRS+Veh组,同时,与NS+Veh组比较,NS+DHM组的悬尾和强迫游泳测试中的不动时间显著降低。在WKY大鼠中,DHM组在强迫游泳测试中的不动时间显著低于Veh组;在旷场测试中两组大鼠穿越的格子数无显著性差异。结论 DHM改善应激诱导小鼠记忆损伤,但对正常小鼠学习记忆无影响; DHM可改善正常小鼠、慢性应激小鼠、WKY大鼠的抑郁样行为以及上调WKY大鼠BDNF的表达。
- 于旭东曲浩天朱晓峰肖志勇田绍文
- 关键词：二氢杨梅素抑郁应激脑源性神经营养因子旷场实验WESTERNBLOT法
- 屋尘螨与鸡蛋白交叉过敏的流行病学分析及实验研究
- 目的：过敏反应主要由血清中免疫球蛋白 E（IgE）介导，通过效应细胞释放生物活性介质而产生各种临床表现，如荨麻疹、血管神经性水肿等。有时，即使是微量蛋白质也可引起敏感个体出现致命的反应。随着对过敏性疾病的不断研究，交叉过...
- 刘桂丽
- 关键词：屋尘螨流行病学WESTERNBLOT法
- 人胎盘胎儿侧间充质干细胞无血清培养上清对肺脏上皮细胞氧化应激的保护作用被引量：6
- 2017年
- 背景:前期研究证实人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清具有一定的清除活性氧自由基的能力,且本身具有一定的抗氧化酶活性。目的:探究人胎盘胎儿侧间充质干细胞在无血清培养条件下所得上清对氧化应激损伤的肺脏上皮细胞的保护作用及其作用机制。方法:分别使用不同浓度的过氧化氢(200,400,500,600,800μmol/L)对肺脏上皮细胞A549细胞系进行6,12,24 h的氧化刺激,通过CCK-8法对肺脏上皮细胞存活率进行检测,得出存活率为50%时的过氧化氢浓度作为氧化损伤模型的最适条件。用Hochest33258染色及Western Blot对模型有效性进行验证。采用无血清培养基培养胎盘胎儿侧间充质干细胞,收集P3代细胞培养上清将其作用于氧化损伤的肺脏上皮细胞,培养24 h,即上清组。同时设立损伤组(仅进行氧化损伤)和维生素C组(培养基中添加100μmol/L的维生素C)。利用流式细胞术对各组细胞凋亡情况进行检测以及Western Blot检测凋亡相关蛋白及氧化应激经典信号通路Nrf2-Keap1-ARE信号通路相关蛋白的表达。结果与结论:(1)CCK-8法检测得出,采用600μmol/L的过氧化氢对肺脏上皮细胞进行24 h的氧化刺激,A549细胞存活率为(56.41±3.31)%。Hochest33258染色及Western Blot证实模型的可靠性;(2)流式细胞术结果显示维生素C组和上清组氧化损伤细胞的凋亡率与损伤组细胞相比有不同程度的降低,其中上清组与损伤组相比差异有统计学意义(P<0.05);(3)Western Blot对凋亡相关蛋白的检测显示,与损伤组对比,维生素C组和上清组凋亡促进基因Bax蛋白表达减弱,凋亡抑制基因Bcl-2蛋白表达增强,且差异有统计学意义(P<0.05)。Nrf2-Keap1-ARE信号通路相关蛋白显示与损伤组对比,维生素C组和上清组Nrf2蛋白表达增强,Keap1分子表达减弱且差异有统计学意义(P<0.05);(4)上述结果提示,实验成功构建了肺脏上皮细胞损伤模型,且人胎盘胎儿侧间充�
- 付雪刘国攀张玉洁严秀蕊马晓娜刘晓明魏军
- 关键词：干细胞间充质干细胞氧化应激WESTERNBLOT法
- Cripto-1、p-AKT及PTEN在宫颈癌中表达及临床意义
- 宫颈癌在全球妇女新发病例中占第二位，也是妇女癌症死因的第三位。2012年，宫颈癌全球年发病量为527，600例，每年的死亡人数为265，700例，57％新发宫颈癌病例出现在发展中国家。在发展中国家中，宫颈癌新发病例数为4...
- 余延晓
- 关键词：宫颈癌PTEN基因WESTERNBLOT法
- 结肠癌细胞起源的白细胞介素1α对血管内皮细胞增殖和迁移的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨结肠癌细胞起源的白细胞介素1仅（IL—1α）及其受体拮抗剂IL—1α对血管内皮细胞的影响。方法Westernblot法检测IL-1α和IL-1I型受体（IL-1R1）在结肠癌细胞中的表达，细胞增殖和迁移实验检测外源性的IL-1α和IL—1α对胎儿脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖和迁移的影响；采用双层培养系统检测肿瘤细胞起源的IL-1α对血管内皮细胞增殖和迁移的影响，以及IL-1α对血管内皮细胞的作用。结果Westernblot检测显示，IL-1α蛋白在高肝转移结肠癌HT-29和WiDr细胞中表达，而在低肝转移结肠癌CaCo-2和CoL0320细胞中不表达。细胞迁移实验显示，对照组、1ng／mrIL—1α组、10n异／mlrIL—1α组和100ng／mlrIL—1α组的穿膜细胞数分别为（17．9±3．6）个、（23．2±4．2）个、（31．7±4．5）个和（38．6±4．9）个，IL-1α能够显著提高HUVEC的迁移能力，并与IL-1α浓度有关（均P〈0．01）。细胞增殖实验显示，对照组、1ng／mlrIL—1α组、10ng／mlrIL—1α组和100ng／mlrIL—1α组的吸光度值分别为1．37±0．18、1．79±0．14、2．14±0．17和2．21±0．23，IL—1α能够显著提高HUVEC的增殖能力，并与IL-1α浓度有关（均P〈0．叭）。IL—1α能够抑制HUVEC的迁移和增殖（均P〈0．01）。在共同培养系统中，对照组、HUVECs＋10pg／mlrIL—1α组和HUVECs＋HT-29组中血管内皮生长因子（VEGF）水平分别为（1．697±0．072）ng／ml、（3．507±0．064）ng／ml和（4．139±0.039）ng／ml，HUVECs＋10pg／mlrIL-1α组和HUVECs＋HT-29组分别与HUVECs组比较，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论结肠癌细胞起源的IL-1α在结肠癌的转移过程中有重要作用，其通过结合IL-1RI提高结肠癌细胞VEGF的分泌水平，强化血管内皮细胞的增殖和迁移，进而促进肿瘤的新生血管；而IL-1α具有抑制IL-1α水平的作用，从而抑制结肠癌的新生血管。
- 马家驰陈泉顾远晖李一平房伟刘美玲陈晓昌郭庆金马世勋
- 关键词：血管内皮细胞增殖白细胞介素1Α结肠癌细胞WESTERNBLOT法HUVECS
- 新疆哈萨克族胃癌中抑癌基因smad4甲基化及异常表达
- 目的：
探讨新疆哈萨克族胃癌与smad4基因甲基化的关系，分析smad4蛋白失活在新疆哈萨克族胃癌发生中的作用，筛选出与该民族胃癌发生相关的smad4基因异常甲基化位点。
方法：
1.采用west...
- 刘玺
- 关键词：SMAD4WESTERNBLOT法胃癌哈萨克族
- 文献传递
- Nodal蛋白在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义
- 研究背景: 膀胱肿瘤是泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤，是一种直接威胁患者生存的疾病。在全世界范围内膀胱肿瘤的发病率在男性占全身肿瘤的第8位，在女性为第25位。男女患病率比约为3∶1。据统计，2011年世界膀胱癌新发病例数达...
- 胡尧
- 关键词：膀胱肿瘤尿路上皮癌RT-PCR法WESTERNBLOT法
- 文献传递
- α-突触核蛋白影响BDNF表达机制的研究
- 2012年
- 目的：研究α-突触核蛋白对BDNF（brain--derivedneurotrophicfactor）表达的影响及作用机制。方法：利用分子克隆技术构建α-突触核蛋白真核表达载体并转染PC12，建立稳定高表达细胞株；MTT法检测细胞存活率；Westernblot法、ELISA法和Confocal检测的蛋白表达及蛋白磷酸化的改变；
- 苑玉和陈乃宏
- 关键词：Α-突触核蛋白WESTERNBLOT法分子克隆技术细胞存活率蛋白磷酸化
- 富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域基因3在肝癌细胞株中的表达及对细胞周期、侵袭性和凋亡的影响
- 2012年
- 目的观察富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域基L大J3（LRIG3）在3种肝癌细胞株HepG-2、LM3和7721中的表达，探讨LRIG3基因对肝癌细胞株HepG-2、LM3和7721的细胞周期、侵袭能力和凋产的影响。方法将过表达的LRIG3质粒和空白质粒经脂质体法分别转染肝癌细胞株HepG-2、LM3和7721中，相对廊分为实验组和对照组，采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot法检测LRIG3表达水平变化，采用流式细胞仪、Transwell法及原佗末端转移酶标记（TUNEL）等方法对细胞株的生物学行为进干亍分析。
- 齐永庄乾元彭鄂军李有元刘飞叶章群
- 关键词：肝癌细胞株细胞周期WESTERNBLOT法逆转录-聚合酶链反应
