程立均
所属机构: 华北制药集团新药研究开发有限责任公司 所在地区: 河北省 石家庄市 研究方向: 医药卫生 发文基金: 国家高技术研究发展计划
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赵伟 作品数:45 被引量:39 H指数:4 供职机构:华北制药集团新药研究开发有限责任公司 研究主题:单克隆抗体 人源 狂犬病病毒 抗狂犬病 阳性对照 贾茜 作品数:49 被引量:72 H指数:5 供职机构:华北制药集团新药研究开发有限责任公司 研究主题:苯乙酸 单克隆抗体 产黄青霉 人源 纯化 高健 作品数:95 被引量:158 H指数:7 供职机构:华北制药集团新药研究开发有限责任公司 研究主题:单克隆抗体 阳性对照 用药过程 宿主细胞 狂犬病毒 周兴军 作品数:20 被引量:17 H指数:3 供职机构:华北制药集团新药研究开发有限责任公司 研究主题:乙型肝炎疫苗 人源 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 病毒单克隆抗体 狂犬病病毒 刘晓志 作品数:29 被引量:68 H指数:5 供职机构:华北制药集团新药研究开发有限责任公司 研究主题:单克隆抗体 宿主细胞 阳性对照 用药过程 可变区
一种改进的糖蛋白染色鉴别方法的建立 被引量:6 2012年 目的建立一种更加灵敏高效的糖蛋白染色鉴别方法。方法在高碘酸-Schiff法的基础上,通过对固定、还原、氧化等溶液配方及染色时间的改变,对电泳凝胶糖蛋白染色法进行改进,并与传统高碘酸-Schiff法进行比较。结果重组单抗样品经改进的糖蛋白染色法染色,仅重链显色,轻链不显色;再经考马斯亮蓝染液复染,轻、重链均显色;改进的染色方法的糖含量检测灵敏度为0.15μg糖,而传统高碘酸-Schiff法的糖含量检测灵敏度为3μg糖。结论已成功建立了一种新的特异性好、灵敏度高且用时短的糖蛋白染色鉴别方法。 张世雄 程立均一种鼠源单克隆抗体及其制备方法和用途 本发明提供了一种鼠源单克隆抗体及其制备方法和用途。该鼠源单克隆抗体即抗NM57单克隆抗体,轻链可变区具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列,重链可变区具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。本发明还公开了编码该抗... 赵伟 魏敬双 王惠欣 刘晓志 常亮 程立均 李燕霞 刘艳玲 段迎霞 刘祥义 刘洪喜 于兰 李玉凤 张静 高健重组单抗药物的非还原电泳纯度分析 被引量:4 2010年 目的对重组单抗药物的非还原电泳纯度进行分析,排除样品制备过程中形成的一些假象。方法结合重组单抗的分子结构特征,改变常规SDS-PAGE条件,将抗体样品在不同的缓冲液及电泳条件下进行比较。结果抗体在非还原SDS-PAGE纯度检测中出现的次带,可通过在供试品缓冲液中加入烷基化试剂封闭自由巯基而几乎全部消除;通过降低电泳过程的环境温度,可有效降低主带上方高相对分子质量带的出现。结论单抗药物中由于含有多对二硫键引起的一些因电泳样品制备而形成的假象带,可以通过试验方法的修正而去除。 程立均 魏敬双 张世雄 李耿 贾茜关键词:纯度 二硫键 重组人抗狂犬病毒单克隆抗体的制备方法 本发明提供了重组人抗狂犬病毒单克隆抗体的生产方法,利用基因重组哺乳动物细胞成功生产出高纯度的人抗狂犬病毒单克隆抗体NM57,该株抗体稳定性好、特异性强,能够中和目前中国境内的代表性狂犬病毒街毒株,特别适用于狂犬病暴露后预... 贾茜 高健 惠觅宙 魏敬双 赵伟 陶冉 程立均 贺建功 白冠仁文献传递 不同pH诱导重组和血源人血白蛋白构象变化的光谱分析 2010年 目的分析不同pH诱导重组人血白蛋白(Recombinant human serum albumin,rHSA)和血源人血白蛋白(Plasma-derived human serum albumin,pHSA)的构象变化。方法在不同pH值条件下,分别经紫外和荧光光谱扫描分析rHSA与pHSA及3批rHSA的二阶导数谱及275nm和295nm激发波长下的荧光光谱。结果 rHSA与pHSA的最大吸收波长均为278nm,二阶导数谱和荧光光谱均随pH值发生变化,趋势基本一致;3批rHSA的紫外和荧光光谱间无显著差异。结论 rHSA在不同pH值条件下的构象变化与pHSA基本一致,3批rHSA的构象具有良好的批间一致性。 刘俊乐 魏敬双 程立均 杜威世 张世雄 王志明 贾茜关键词:白蛋白类 蛋白质构象 PH 光谱分析 河蟹精子膜蛋白的生化特性 被引量:1 2010年 利用含1% TritonX-100和0.1%SDS的提取缓冲液提取河蟹(Eriocheir sinensis)精子膜蛋白。对所得的精子膜蛋白溶液进行SDS-PAGE电泳分析。结果显示,河蟹的精子含有12种不同的膜蛋白组分。对这些精子膜蛋白组分的生化特性进行分析,结果表明,河蟹精子膜蛋白是1组呈酸性的低分子量糖蛋白,分子量为21.6~75.5kD,等电点在4.8左右。 王琦 康现江 程立均 穆淑梅 曹刚关键词:河蟹 精子膜蛋白 生化特性 富含GC的DNA片段在哺乳动物细胞基因超高表达调控中的重要作用 被引量:4 2010年 通过在结构基因或基因启动子的5’和/或3’端加入天然1.006kb或人工合成0.733kb的富含GC的DNA片段(包括内含子),所构建的稳定表达载体在实验室规模实现了20多种蛋白质在哺乳动物细胞中超高表达.该实验提供了证据表明,非编码的富含GC的DNA片段(包括内含子)是一种超级"染色质开放元件",在哺乳动物细胞基因表达中起关键作用.实验还进一步表明,哺乳动物细胞的基因表达调控在染色质水平主要与DNA的一级结构,即DNA的GC含量有关. 贾茜 吴洪涛 周兴军 高健 赵伟 阿奇思 魏敬双 候利华 吴书音 张莹 董向锋 黄艳敏 金炜元 朱红杰 赵兴卉 黄春华 邢丽苹 李丽文 马骏 刘西燕 陶苒 叶帅东 宋义高 宋羚羚 陈冠平 杜春玲 张雪婷 李博 王延涛 杨威 吉尔伯特 腾宇扬 冷国庆 李峦峰 刘文献 程立均 梁秋波 李郑武 张秀芹 左亚军 陈薇 李会成 惠觅宙关键词:GC含量 DNA结构 重组抗体的N-端氨基酸序列测定 被引量:2 2008年 目的建立具有焦谷氨酸封闭N-端的重组抗体N-端氨基酸序列分析方法。方法利用高温稳定的焦谷氨酸肽酶,在重组人源抗狂犬病病毒单抗样品高温变性条件下,去除其N-端焦谷氨酸封闭。经还原SDS-PAGE和电印迹后,进行N-端氨基酸序列测定,并与电印迹后在PVDF膜上去封闭处理效果进行比较。结果用该方法去封闭后的抗体样品N-端焦谷氨酸去除效果较好,可顺利进行N-端氨基酸序列测定;而电印迹后在PVDF膜上去封闭处理,N-端焦谷氨酸不能充分去除,无法进行N-端氨基酸序列测定。结论该方法适于具有焦谷氨酸封闭N-端的单抗的N-端氨基酸序列分析。 魏敬双 程立均 贾茜工业化哺乳动物细胞高效表达技术研究与应用 高健 刘晓志 董向峰 常亮 周兴军 刘文献 魏敬双 杜威世 赵伟 程立均 王慧欣 王志明 时蕾 马志珺 曹霖 张宇婷 本研究涉及真核生物通用基因表达机制研究,首次提出并通过实验初步证明了以下两个观点:哺乳动物细胞基因的表达在染色质水平的结构调控主要与DNA的一级结构,即DNA的GC含量有关;非编码的富含GC的DNA片段(包括内含子)是一...关键词: 关键词:哺乳动物细胞 基因表达 基因工程制药 重组人源抗狂犬病病毒单克隆抗体的质控方法及质量标准的建立 目的建立重组人源抗狂犬病病毒单克隆抗体(rhRMcAb)的质控方法和质量标准。方法采用小鼠中和试验(MNT)和快速荧光灶抑制试验(RFFIT)分别测定6批rhRMcAb样品的中和活性;还原、非还原SDS-PAGE检测rh... 魏敬双 程立均 赵伟 周兴军 刘进怀 贾茜关键词:狂犬病病毒