上海市农科院青年科技发展基金(2005-02) 作品数:3 被引量:7 H指数:2 相关作者: 李震 于瑞嵩 邵菁 沈世缘 董世娟 更多>> 相关机构: 上海市农业科学院 南京师范大学 上海市农业遗传育种重点实验室 更多>> 发文基金: 上海市农科院青年科技发展基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
重组猪α干扰素的亲和层析 被引量:1 2007年 真核系统表达的猪α干扰素(PoIFN-α)发酵液,经离心、收集上清液、透析过滤处理,通过FPLC-HisTrap HP Kit亲和层析系统分离纯化,最后以SDS-PAGE银染法检验。结果表明,在不同pH和NaCl浓度情况下,发酵液经亲和层析系统分离纯化后均可以得到较为单一的目的蛋白组分,而在pH8.2,NaCl0mmol/L的情况下得到的目的蛋白更纯,且非特异性吸附也较少。 邵菁 于瑞嵩 董世娟 朱于敏 沈世缘 曹祥荣 李震重组猪α-干扰素的纯化及生化性质鉴定 被引量:2 2008年 对巴斯德毕赤酵母高效分泌表达的猪α-干扰素(PoIFN-α)纯化工艺和纯化后重组蛋白的部分生化特性进行了研究,结果表明:猪α-干扰素(PoIFN-α)发酵液经离心、透析、过滤处理之后,依次利用亲和层析和离子交换层析使目的蛋白得到了纯化.经N端氨基酸测序,Western-blot,对酸、热、巯基乙醇的稳定性和糖基化程度等检测后发现,所表达的猪α-干扰素N端氨基酸序列(前5个)正确,对酸和热基本稳定,二硫键对目的蛋白的活性至关重要,没有发现目的蛋白的糖基化. 邵菁 于瑞嵩 董世娟 朱于敏 沈世缘 曹祥荣 李震关键词:离子交换层析 糖基化 生化性质 重组毕赤酵母产猪IFNα的诱导条件 被引量:4 2007年 采用Plackett-Burman实验设计,选取甲醇、酵母粉、蛋白胨、K2HPO4.12H2O、MgSO4、(NH4)2SO4、pH和PTM1这8个对重组猪IFNα表达量有影响的相关因子进行筛选,用SAS软件进行统计分析,分析表明:甲醇、蛋白胨以及K2HPO4.12H2O对重组猪IFNα表达量具有显著性影响;之后采用Box-Behnken设计及响应面分析法确定最佳的诱导条件。在最优条件下,重组猪IFNα表达量比优化前提高了2.46倍。 张丽曼 于瑞嵩 段作营 李震 毛忠贵关键词:PLACKETT-BURMAN 毕赤酵母