国家自然科学基金(30370617)
- 作品数：7 被引量：20H指数：3
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- DcR3在预防博莱霉素大鼠模型发生肺纤维化中的作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨DcR3在预防博莱霉素大鼠模型发生肺纤维化中的作用。方法采用博莱霉素复制肺纤维化动物模型。分为正常对照组、博莱霉素组、博莱霉素+DcR3组,给药时间2 w,各组分别于2、4、6、8 w处死大鼠6只,收集肺泡灌洗液的细胞和上清检测细胞因子含量。左肺组织冻存留作羟脯氨酸检测;右肺组织固定用作组织染色。结果博莱霉素+DcR3组肺泡炎的程度表现为逐渐减轻的过程,炎症程度均低于BL组(P<0.05);BL+DcR3组肺纤维化程度无明显加重趋势,与对照组比较差异显著(P<0.05),与BL组比较有显著性差异(P<0.01)。结论 DcR3的早期应用,可减轻博莱霉素大鼠模型肺的的局部炎症,可能在一定程度上达到预防肺纤维化形成的目的。
- 杨洋任锦刘晶马忠森
- 关键词：DCR3炎症肺纤维化
- 人DcR3融合蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备被引量：2
- 2007年
- 目的:制备DcR3融合蛋白及其多克隆抗体,并鉴定其特异性。方法:将亚克隆构建的pET28a(+)/DcR3重组表达质粒转化入大肠杆菌(E.coli)BL21菌株,IPTG诱导表达,镍柱亲和层析法纯化目的蛋白,SDS-PAGE及Western blot分析蛋白产物,将纯化的目的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,并对其进行纯化及鉴定。结果:pET28a(+)/DcR3重组表达质粒在E.coli中诱导表达相对分子质量(Mr)为33000的目的蛋白,表达量约占菌体蛋白总量的38%,纯化后的目的蛋白纯度达98%。Western blot显示纯化蛋白与抗DcR3单克隆抗体(mAb)具有良好的反应性。纯化后多克隆抗体效价达1.28×10-6。结论:DcR3蛋白在E.coli中得到高效表达,成功制备高纯度DcR3蛋白及高效价抗DcR3多克隆抗体,为研究DcR3在组织中的表达、分布,研制ELISA试剂盒以检测恶性肿瘤及自身免疫性疾病等患者血清DcR3表达水平提供实验基础。
- 吴春风马忠森王秀丽杨俊玲杨洋张越图们乌力吉乔俊华
- 关键词：DCR3原核表达蛋白质纯化多克隆抗体
- DcR3 mRNA在白血病细胞中的表达及意义被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨DcR3 mRNA在急性白血病(AL)细胞中的表达及其临床意义。方法:选择AL患者46例,其中急性髓系白血病(AML)28例,急性淋巴细胞白血病(ALL)18例,27例非恶性血液病患者作为对照组,采用RT-PCR方法检测骨髓单个核细胞(BMNC)中DcR3 mRNA的表达水平,并分析其与临床参数的关联性。结果:AL组DcR3 mRNA表达阳性率(67.4%)及表达水平(0.56±0.09)高于对照组(40.7%,0.39±0.19)(P<0.05);AML组DcR3 mRNA表达阳性率(71.4%)及表达水平(0.56±0.09)与ALL组(61.1%,0.53±0.08)比较差异无显著性(P>0.05);AL患者DcR3 mRNA的阳性表达率在白细胞计数≥30×109.L-1时升高。结论:DcR3基因可能通过抑制白血病细胞凋亡途径参与白血病发病过程。
- 陈鹏王秀丽李景贺贾娇媛卢爱萍姜玉珍
- 关键词：急性白血病基因表达
- DcR3对人肺成纤维细胞合成Ⅳ型胶原的作用被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨诱骗受体3(DcR3)对人肺成纤维细胞(HLF)合成Ⅳ型胶原的作用。方法:Over-PCR方法构建DcR3的真核表达载体,脂质体法转染HLF细胞,Westernblo检测HLF细胞合成Ⅳ型胶原的含量。结果:成功构建了pvax1-DcR3真核表达载体并转染HLF细胞;转染组细胞ColⅣ表达量明显升高,从12h开始持续到72h,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);而转染+抗体组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);转染组不同时间ColⅣ表达量有统计学意义(F=34.25,P<0.05)。结论:DcR3促进HLF细胞合成Ⅳ型胶原的能力,可能是加速肺纤维形成的因素之一。
- 杨洋乔俊华安继红张越吴春风郏博马忠森
- 关键词：HLF
- 抗人DcR3单克隆抗体的研制及其鉴定被引量：3
- 2008年
- 目的：制备抗人DcR3单克隆抗体（mAb），并鉴定其特异性。方法：纯化的His．DcR3融合蛋白免疫小鼠，应用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗人DcR3 mAb并进行纯化，纯化后的抗体经Western blot和ELISA方法鉴定其特异性、Ig亚型和效价。结果：获得5株稳定分泌抗DcR3 mAb的杂交瘤细胞，均属IgG1亚型，其腹水抗体效价为1×10^-5～1×10^-7，Western blot显示5株细胞分泌的mAb均可识别DcR3蛋白，其中1株（181）可与SW480细胞成分反应。结论：成功建立稳定分泌抗人DcR3mAb的杂交瘤细胞株，其分泌的抗体特异性强、效价高，为研究DcR3在组织中的表达、分布及研制ELISA试剂盒奠定基础。
- 吴春风马忠森王秀丽杨俊玲杨洋张越图们乌力吉乔俊华
- 关键词：DCR3单克隆抗体
- 诱骗受体3对肺纤维化动物模型早期的作用被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨诱骗受体3(DcR3)对肺纤维化动物模型早期的作用。方法:博莱霉素(BL)气管内灌注复制大鼠肺纤维化模型,ELISA检测支气管肺泡上清中的TGF-β的含量,HE和MASSON染色观察大鼠模型肺组织病理变化。结果:BL+DcR3组TGF-β的含量与对照组比较无统计学差异(P>0.05),与BL组比较有统计学意义(P<0.05)。BL+DcR3组2周的炎症程度和4周的肺纤维化程度明显低于BL组。结论:DcR3早期应用可抑制肺纤维化动物模型TGF-β的产生,从而延缓或阻止肺纤维化的发生。
- 郏博杨洋齐欣萌王春田王宏茂杜闯王祥马忠森
- 关键词：诱骗受体3肺纤维化
- 特发性肺纤维化患者外周血单个核细胞T淋巴细胞亚群及Th1／Th2型细胞因子的检测被引量：6
- 2008年
- 目的:通过流式细胞术检测特发性肺纤维化(IPF)患者外周血T淋巴细胞亚群及Th1/Th2型细胞因子水平,探讨其在IPF发病机制中的作用及临床意义。方法:采用流式细胞术检测25例IPF患者外周血单个核细胞(PBMC)的T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+及CD8+)以及Th1型细胞因子(IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4)水平,并观察CD4+/CD8+和Th1/Th2比值变化。25例健康体检者为正常对照组。结果:IPF组患者CD4+以及CD4+/CD8+比值均低于正常对照组(P<0.05),CD8+明显高于正常对照组(P<0.01),CD3+水平与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。IPF组患者IL-4水平高于正常对照组(P<0.01),IFN-γ的水平与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05),Th1/Th2比值显著低于正常对照组(P<0.01)。结论:细胞免疫过强和Th2型免疫优势可能参与IPF发病,这将为IPF的诊断和细胞因子治疗提供理论基础。
- 吴春风马忠森王秀丽杨广民马寅芙杨俊玲尹金植陈鹏
- 关键词：特发性肺纤维化TH1/TH2T淋巴细胞亚群流式细胞术
