国家自然科学基金(30171170) 作品数:12 被引量:136 H指数:8 相关作者: 王拥军 施杞 刘梅 孙鹏 周重建 更多>> 相关机构: 上海中医药大学 第二军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
益气化瘀方对大鼠颈椎间盘软骨终板内血管的影响 被引量:60 2002年 目的 :探讨益气化瘀方对椎间盘软骨终板内血管状态的影响 ,了解椎间盘营养供应的情况。方法 :选择 8月龄清洁级 SD雄性大鼠 5 0只。选择 5月对照组、5月模型组为本实验观察时段。大鼠随机分为对照组、模型组 ,益气化瘀方、活血通络方、芬必得组 ,每组 1 0只 ,雌雄各半。体视学分析、Dissector自动计数分析软骨终板内血管芽的数量、面积 ;免疫组化检测血管内皮生长因子 ( VEGF)在软骨终板的表达情况 ,进行VEGF与血管芽之间的相关性分析。结果 :益气化瘀方可以增加血管芽的数量和面积 ,与活血通络方作用相似 ,优于芬必得 ;模型组软骨终板内 VEGF表达明显 ,但表达率减少 ;益气化瘀方 VEGF表达量降低 ,但表达率增加明显。VEGF的表达与血管芽密度有正相关。结论 :益气化瘀方可以增加血管芽数量和 VEGF的表达 ,促进血管修复、再生和增加椎间盘营养供应的作用。 王拥军 施杞 周重建 兰凤莉 沈培芝 刘梅 徐宇关键词:益气化瘀方 软骨终板 VEGF 中药对退变颈椎间盘的作用机理研究概述 被引量:8 2003年 回顾近年来中药对退变颈椎间盘作用机理的研究所取得的进展 ,显示中药的作用主要为 :改善椎间盘营养功能 ,调节椎间盘细胞外基质的结构和功能 ,抑制椎间盘炎性介质 ,以及调控椎间盘细胞因子等。这些研究为临床诊治提供了较有价值的参考依据。 孙鹏 施杞 王拥军关键词:颈椎病 中医药疗法 退变椎间盘 益气化瘀方及其拆方对大鼠椎间盘纤维环细胞凋亡相关因子的作用 被引量:10 2005年 目的:研究益气化瘀方及其拆方药理血清对大鼠诱导凋亡椎间盘纤维环细胞bcl-2、Bax及半胱氨酸蛋白酶8(caspase-8)表达的影响。方法:用细胞免疫化学和积分光密度分析等方法比较分析益气化瘀方及其拆方益气方、化瘀方药理血清,以及胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)对抗-Fas抗体(anti-Fas antibody)诱导凋亡大鼠椎间盘纤维环细胞bcl-2、Bax及caspase-8表达的影响。结果:益气化瘀方、益气方、化瘀方及IGF-1血清处理组与凋亡模型组相比,bcl-2表达升高,Bax及caspase-8表达降低,均有统计学意义(P<0.01);益气化瘀方组与益气方、化瘀方组比较,Bax表达明显降低,有统计学意义(P<0.05)。结论:益气化瘀方及其拆方可以调控大鼠椎间盘纤维环细胞内Bax、bcl-2和caspase-8表达,其延缓椎间盘退变的机制可能与调控细胞的凋亡相关因子有关。 周泉 王拥军 施杞 孙鹏 周重建 胡志俊 刘梅关键词:益气化瘀方 椎间盘 纤维环细胞 CASPASE-8 粘附斑激酶信号转导与串话研究进展 被引量:5 2005年 卞琴 王拥军 施杞关键词:信号转导 串话 益气化瘀法防治椎间盘退变性疾病的应用与发展 根据中医气血理论,经过长期的临床实践,逐步形成了"调和气血"防治椎间盘退变性疾病的学术思想和"益气化瘀"的防治法则,总结出防治椎间盘退变性疾病的经验方——"益气化瘀方"。 施杞 王拥军关键词:椎间盘退变性疾病 细胞生物学 分子生物学 益气化瘀法 中医药疗法 文献传递 退变大鼠颈椎间盘细胞凋亡的实验研究 被引量:26 2002年 目的 :动态观察大鼠颈部动静力失去平衡后颈椎间盘细胞凋亡的改变。方法 :建立动静力失衡性颈椎间盘退变模型 ,透射电镜、TUNEL法、流式细胞仪PI法检测造模 3、5、7月后椎间盘细胞凋亡程度。结果 :退变椎间盘内有典型凋亡的细胞 ,以软骨细胞为主。与对照组比较 ,各个模型组软骨细胞凋亡指数明显升高 (P <0 .0 1 ) ;模型组间比较 ,5月、7月较 3月细胞凋亡指数明显升高 (P <0 .0 1 )。结论 :退变椎间盘软骨细胞凋亡数目增多可能是椎间盘退变的机理之一。 王拥军 施杞 李家顺 贾连顺 周重建 刘梅关键词:颈椎间盘退变 椎间盘退行性改变 细胞凋亡 大鼠退变颈椎间盘组织基因表达谱的研究 被引量:24 2002年 目的 :研究正常和退变模型大鼠颈椎间盘的基因表达谱 ,分析大鼠颈椎间盘基因表达水平的变化 ,用于指导诊断和治疗。 方法 :建立动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型 ,从造模后 5个月对照组和模型组大鼠颈椎间盘中抽提 m RNA ,经逆转录分别用 cy3、cy5荧光标记 ,获得两组动物椎间盘 c DNA的探针 ,再与 5 12 c DNA基因表达谱芯片杂交 ,结果由激光扫描仪扫描并用软件进行图像分析、标准化处理、ratio值分析、聚类分析。结果 :共筛选出 18条表达有差异的基因 ,11条基因表达量明显下降 (ratio<0 .4 ) ,其中细胞信号转导类有 4条 ;7条基因表达量明显上升 (ratio>2 .5 )。这些基因在颈椎间盘退变的表达模式与其他的报道类似。 结论 :退变大鼠椎间盘基因表达的调节发生变化 。 王拥军 施杞 李家顺 贾连顺关键词:基因芯片 基因表达谱 椎间盘退变 大鼠颈椎间盘凋亡软骨细胞基因表达谱的研究 2005年 目的分析正常和诱导凋亡的大鼠颈椎间盘软骨细胞基因表达水平的变化。方法建立大鼠颈椎间盘软骨细胞培养体系,使用抗Fas抗体诱导凋亡,分别从正常组和诱导凋亡组的大鼠颈椎间盘软骨细胞中抽提mRNA,经反转录后用Cy3、Cy5荧光标记,获得椎间盘软骨细胞cDNA的探针,再与B iostarR-40 s的基因表达谱芯片杂交,ScanArray 4 000激光扫描仪扫描,GeneP ix Pro 3.0图像处理软件进行图像分析、标准化处理、Ratio值分析、聚类分析。结果凋亡细胞与正常细胞比较,共筛选出明显变化的基因231条。在30条表达有差异的已知基因中,20条基因表达量明显下降(Ratio<0.5),10条基因表达量明显上升(Ratio>2)。变化的基因包括蛋白酶类,生长因子类,信号转导通路类等方面。结论初步筛选出大鼠颈椎间盘软骨细胞的凋亡相关基因,为研究颈椎病在基因水平上的病理变化提供了基础。 孙鹏 王拥军 施杞 周泉 刘梅 胡志俊关键词:椎间盘 软骨细胞 基因芯片 生物信息学 益气化瘀方调控颈椎间盘细胞基因表达谱的研究 被引量:17 2003年 目的 :分析正常、退变SD大鼠颈椎间盘基因表达水平的变化 ,研究益气化瘀方对大鼠退变颈椎间盘基因表达谱的调节作用。方法 :建立动、静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型 ,分别从正常、退变和益气化瘀方组大鼠颈椎间盘中抽提mRNA ,经反转录后分别用Cy3、Cy5荧光标记 ,获得动物椎间盘cDNA的探针 ,再与 5 12点cDNA基因表达谱芯片杂交 ,激光扫描仪扫描并进行图像分析、标准化处理、ratio值分析、聚类分析。结果 :模型组与对照组比较 ,共筛选出 18条表达有差异的基因 ,11条基因表达量明显下降 (ratio <0 4 ) ,7条基因表达量明显上升 (ratio >2 5 )。益气化瘀方与模型组比较 ,共筛选出 2 2条表达有差异的基因 ,益气化瘀方上调 18条基因 (ratio >2 5 ) ,下调 4条基因 (ratio <0 4 )。其中在上述检测中表达最明显的是信号传导类基因 ,益气化瘀方能够上调多数细胞信号传导类基因 (如PTK等 )。结论 :初步筛选出大鼠退变椎间盘中相关基因 ,与已报道基因在颈椎间盘退变的表达模式类似 ,说明大鼠椎间盘退变受到各种基因的调控 ,初步阐明了颈椎病在基因水平上的发病机理。益气化瘀方参与了椎间盘细胞内相关基因的调控 ,参与椎间盘细胞内外的信号传导过程 ,从基因表达角度解释了中药治疗颈椎病的药效机理 ,丰富了中医? 王拥军 施杞 李家顺 贾连顺 周重建 刘梅关键词:益气化瘀方 细胞 基因表达谱 基因芯片 颈椎间盘退变 椎间盘软骨细胞凋亡相关因子的表达研究 被引量:2 2004年 押目的探讨椎间盘软骨细胞凋亡状态下Bax、Bcl-2等凋亡相关因子的表达变化情况。方法使用酶消化法获取雄性SD大鼠椎间盘软骨细胞,抗Fas抗体诱导凋亡,免疫组化法检测大鼠正常与凋亡椎间盘软骨细胞的Bax、Bcl-2的表达,CMIAS-99B型医学图像系统进行体视学分析,进而比较分析大鼠正常与凋亡椎间盘软骨细胞的凋亡相关因子的表达变化情况。结果使用免疫组化法,发现正常组的Bax轻度表达,凋亡模型组的Bax表达明显,二者有非常显著差异;正常组的Bcl-2高度表达,凋亡模型组的Bcl-2轻度表达,二者有非常显著差异(P<0.01)。结论凋亡的大鼠椎间盘软骨细胞内Bax、Bcl-2的表达与正常状态相比有明显变化。 孙鹏 王拥军 施杞关键词:椎间盘 软骨细胞 BAX BCL-2