国家自然科学基金(30070701)
- 作品数：12 被引量：61H指数：4
- 相关作者：伍津津朱堂友鲁元刚刘荣卿麦跃更多>>
- 相关机构：第三军医大学大坪医院第三军医大学西南医院成都军区总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 人毛乳头细胞的冻存被引量：1
- 2002年
- 寻找一种不影响人毛乳头细胞生物活性的冻存方法。采用标本沉降式液氮冻存方法 ,冻存新分离的人毛乳头 ;在冻存 1月、3月和 6月时解冻复苏 ,接种培养 ,观察毛乳头的贴壁率和细胞生长情况。复苏冻存了 1月、3月和 6月的毛乳头 ,培养 2天时毛乳头贴壁率为 90 %～ 95 %左右 ,与新分离的毛乳头贴壁率相近 ;瓶内细胞融合时间也基本相同 ,为 15天。液氮冻存人毛乳头不会影响其细胞生物活性 。
- 鲁元刚伍津津赵莉蓉麦跃
- 关键词：毛乳头细胞冻存生物活性
- Frizzled4在小鼠毛囊周期中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的探讨Wnt蛋白的受体分子Frizzled4在小鼠毛囊周期中的表达、功能及其意义。方法利用实时定量PCR、RT-PCR、Western blot和免疫荧光等技术分别检测Frizzled4 mRNA和蛋白在毛囊生长期(P1d、P3d、P8d)、退化期(P16d)和静止期(P21d)中的表达。免疫荧光技术检测Frizzled4在小鼠皮肤上皮细胞JB6 cl30-7b中的定位,MTT检测用抗Frizzled4抗体处理JB6 cl30-7b细胞后的增殖情况。结果在毛囊生长期早期,Frizzled4 mRNA和蛋白在P1d的小鼠背部皮肤中表达明显,膜表达于Bulge、毛囊外根鞘及毛球外侧。在P3d,Frizzled4蛋白表达明显上调,主要表达于Bulge、毛囊外根鞘、内根鞘、precortex、部分毛球外侧。在生长中期(P8d),Frizzled4蛋白的表达最强,集中在毛囊Bulge、外根鞘上段及内根鞘。当毛囊进入退化期(P16d),Frizzled4 mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05),此时主要定位于Bugle。而在静止期,Frizzled4 mRNA和蛋白表达最低(P<0.05),只有少量Frizzled4阳性细胞出现在毛囊Bulge。免疫荧光技术检测Frizzled4蛋白同样也在JB6 cl30-7b细胞膜中表达。MTT结果显示与对照组相比,10μg/mL的抗Frizzled4抗体处理JB6cl30-7b细胞后光密度值明显降低(P<0.05),而20μg/mL的抗Frizzled4抗体处理后的光密度值降到最低(P<0.05)。结论 Frizzled4在毛囊周期中的表达具有时空特异性。伴随着毛囊的生长,Frizzled4的mRNA和蛋白水平都呈现高表达,随着毛囊的退化而表达降低,直至静止期维持低表达水平。拮抗Frizzled4蛋白的作用促使细胞增殖受到明显抑制,提示Frizzled4的表达与毛囊细胞的增殖和分化相关。
- 陈年伍津津邱伟明唐辉唐书谦
- 关键词：毛囊小鼠WNT抗体
- 在双层皮肤替代物中诱导毛囊形成的初步研究被引量：3
- 2007年
- 目的探索人毛乳头细胞和外根鞘细胞在双层皮肤替代物中诱导毛囊形成的可能性。方法用毛乳头细胞和与外根鞘细胞构建复方壳多糖双层皮肤替代物,观察其体外和大白鼠移植后的组织学特征。结果体外毛乳头细胞和外根鞘细胞构建的皮肤替代物表皮细胞排列更紧密、角化突出,真皮内可见与表皮相连的上皮细胞柱及球形膨大细胞团。但移植后未见肯定的毛囊样结构形成。结论目前的细胞培养技术尚不能在双层皮肤替代物中诱导毛囊形成。
- 朱堂友郝飞伍津津毕建军杨涛
- 关键词：毛囊毛乳头细胞外根鞘细胞皮肤组织工程
- 毛乳头细胞诱导毛囊形成的研究被引量：25
- 2003年
- 目的 探讨培养的毛乳头细胞在体内外条件下诱导毛囊形成的可能性。方法 采用酶消化法获得毛乳头细胞、真皮鞘细胞、毛囊上、下段及球部细胞 ,进行毛囊组织工程重建 ,或用游离细胞混合移植于裸鼠 ,组织学观察毛囊形成情况。 结果 毛囊间表皮细胞、毛囊上段上皮细胞、下段上皮细胞和球部细胞在间质细胞凝胶上均可形成双层结构的组织工程皮肤 ,在真皮鞘细胞胶原凝胶上毛囊的上、下段上皮细胞形成了毛囊结构 ,移植于裸鼠后 8周毛乳头细胞胶原凝胶诱导毛囊上、下段细胞形成了毛囊。低代毛乳头细胞与毛囊上皮细胞混合移植形成了数量较多、结构典型的毛囊 ,并有肉眼可见的毛发纤维产生。结论 毛囊的真皮成分细胞即毛乳头细胞、真皮鞘细胞在体内、外均具有诱导毛囊形成的能力 ,通过与毛囊上皮细胞之间的相互作用 ,可诱导毛囊形成。
- 伍津津刘荣卿麦跃程波吕中法鲁元刚朱堂友
- 关键词：毛乳头细胞酶消化法组织工程皮肤
- 人毛乳头细胞增殖和胶原合成测定被引量：1
- 2004年
- 目的:观察毛乳头细胞、真皮鞘细胞与成纤维细胞的增殖和胶原合成情况。方法:采用3H-胸腺嘧啶摄人、3H-脯氨酸摄入方法,观察体外培养的人毛乳头细胞、真皮鞘细胞、成纤维细胞的增殖活性和胶原合成情况。结果:3H-胸腺嘧啶掺人结果表明,细胞繁殖具有明显的活跃高峰,3种细胞在基础培养基中第11天达掺入高峰,而在常规培养基中有两个掺入高峰,即第5天和第11天。3H-脯氨酸摄人结果表明,细胞内摄入无明显差异,而递质中的胶原含量有明显差异,成纤维细胞显著高于毛乳头细胞和真皮鞘细胞,表明两者的功能有一定的差异。结论:常规培养基是这3种真皮细胞很好的培养基,能够明显促进它们的生长和繁殖,而毛乳头细胞和真皮鞘细胞分泌胶原的能力低于成纤维细胞,说明它们在合成胶原的功能方面有一定的差异。
- 伍津津鲁元刚朱堂友李伟刘荣卿
- 关键词：毛囊毛乳头细胞成纤维细胞细胞增殖胶原合成
- 表皮真皮分离方法的探索被引量：17
- 2004年
- 目的 探索一种适合细胞培养的分离真表皮的酶消化法。方法 将分离酶配成 0 1%、0 2 %、0 5 % 3个浓度 ,在 4℃或 3 7℃条件下消化头皮或包皮 ,摸索消化的时间 ,并与 0 2 5 %胰蛋白酶消化法进行对比。结果 0 5 %分离酶在 4℃条件下消化 16～ 18h ,或 3 7℃条件下消化 1h ,能够很好地分离表皮与真皮 ,再用胰蛋白酶将表皮游离成角质形成细胞 ,活细胞率高 ,培养后细胞融合时间短。结论 分离酶能够选择性消化基底膜成分而起到很好的分离表皮与真皮的作用 ,分离酶和胰蛋白酶联合消化法是一种非常理想的分离角质形成细胞的方法 ,同时又能够避免成纤维细胞的污染。
- 伍津津朱堂友鲁元刚杨宏珍
- 关键词：表皮真皮酶消化法
- 毛乳头细胞诱导毛囊形成的可能性研究(英文)被引量：1
- 2004年
- 背景毛囊在伤口愈合,肿瘤发生等过程中起主导作用,由于其在活体内影响因素较多,故难以研究其生物学作用机制。目的利用培养的毛乳头细胞观察体内外条件下诱导毛囊形成的可能。设计非随机非对照的实验研究。地点和对象实验在第三军医大学大坪医院野战外科研究所完成。对象为正常人头皮中获取毛乳头细胞、真皮鞘细胞、毛囊上、下段及球部细胞。干预将毛乳头细胞、真皮鞘细胞分别与毛囊上、下段上皮细胞进行体外三维培养重建,用游离细胞混合移植于裸鼠,组织学观察毛囊形成情况。主要观察指标毛囊毛乳头细胞、真皮鞘细胞对分段毛囊上皮细胞的诱导分化作用。结果毛囊间表皮细胞、毛囊上段上皮细胞、下段上皮细胞和球部细胞在间质细胞凝胶上均可形成双层结构的组织工程皮肤,在真皮鞘细胞胶原凝胶上毛囊的上、下段上皮细胞形成了毛囊结构,移植于裸鼠后毛乳头细胞胶原凝胶诱导毛囊上、下段细胞形成了毛囊。低代毛乳头细胞与毛囊上皮细胞混合移植形成了数量较多、结构典型的毛囊,并有肉眼可见的毛发纤维产生。结论毛囊的真皮成分细胞即毛乳头细胞、真皮鞘细胞在体内、外均具有诱导毛囊形成的能力,通过与毛囊上皮细胞之间的相互作用,诱导毛囊形成。
- 伍津津刘荣卿麦跃程波吕中法鲁元刚朱堂友
- 关键词：毛囊生物医学工程细胞培养
- 构建人头皮毛乳头细胞和真皮鞘细胞快捷高效分离培养的方法被引量：3
- 2005年
- 目的:将显微法和两步酶法相结合,构建快捷分离培养纯的人头皮毛囊毛乳头细胞和真皮鞘细胞的方法。方法:从真皮-皮下组织交界处横断头皮,拔出脂肪组织中的完整毛囊,解剖显微镜下分离出毛乳头和真皮鞘,毛囊毛乳头用2g/L胶原酶37℃孵育4h左右后悬浮培养;真皮鞘碎片接种在涂有胶原的培养板中。培养的细胞用α-平滑肌肌动蛋白组化及碱性磷酸酶染色鉴定及鉴别。结果:获得纯化的毛乳头细胞和真皮鞘细胞。结论:将原有两方法结合后的新技术,既达到了快的目的,也解决了细胞纯度问题,是高效的人毛囊真皮成分细胞分离培养方法。
- 朱堂友郝飞伍津津位争伟
- 关键词：生物医学工程细胞培养
- 人毛囊细胞来源双层皮肤替代物的构建和组织学特征被引量：5
- 2007年
- 目的探索人毛囊细胞构建的双层皮肤替代物的组织学特征。方法用毛乳头细胞、真皮鞘细胞分别与外根鞘细胞构建复合壳多糖双层皮肤替代物,分析其体外和移植至大白鼠后的组织学特征。结果毛囊来源细胞构建的皮肤替代物中表皮细胞排列更紧密、角化突出,真皮内可见与表皮相连的上皮细胞柱及球形膨大细胞团形成。结论毛囊细胞是构建皮肤替代物的良好细胞来源。
- 朱堂友郝飞伍津津毕建军吴国选杨涛
- 关键词：毛囊毛乳头细胞外根鞘细胞皮肤组织工程
- 复方壳多糖组织工程皮肤的应用与推广被引量：1
- 2010年
- 由第三军医大学大坪医院野战外科研究所研制的复方壳多糖组织工程皮肤具有表皮和真皮双层结构，含有角质形成细胞和成纤维细胞，组织结构接近天然皮肤。）物理特性良好，有一定的弹性和韧性，可任意移动、剪切、随意缝合，适合手术需要，具有很强的抗感染能力。适合于治疗大面积烧烫伤、慢性难愈性溃疡（糖尿病性溃疡、褥疮及静脉性溃疡）、疤痕疙瘩切除后的皮肤缺损，其市场前景巨大。
- 陈宇伍津津周林陈洪张跃银
- 关键词：壳多糖组织工程皮肤
