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安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2010A116)
安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2010A116)
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 相关作者：黄龙全张剑韵蒋守花王灵红钮甜甜更多>>
- 相关机构：安徽农业大学更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 茶树鲜叶中维生素B_6代谢酶PLK的活性分析被引量：1
- 2010年
- 吡哆醛激酶(Pyridoxal Kinase,PLK)是维生素B6(VB6)代谢关键酶。从茶鲜叶中直接提取含PLK的粗酶液,经过硫酸铵沉淀、透析处理后,采用苯肼衍生化方法检测定PLK活性,并对其基本酶学性质进行分析。结果表明,提取时加入100%茶鲜重的PVPP,效果最佳。纯化后的茶鲜叶PLK比活力为0.737nmol/(min·mg),纯化倍数为4.0;当有二价金属离子存在时,PLK才具有催化活性,其中Zn2+对其催化作用最强。该酶的最适反应温度为60℃;在pH6.0左右酶活力最高。在最适反应条件下,测得反应底物ATP和PL的Km值分别为19.3μmol/L和53μmol/L。
- 钮甜甜张剑韵黄龙全
- 关键词：维生素B6吡哆醛激酶活性分析
- 茶树鲜叶中维生素B_6代谢酶PNPO的活性分析
- 2010年
- 采用液氮研磨、Tris-HCl+KPO4缓冲液(pH8.5)浸提法和硫酸铵沉淀法从茶树鲜叶中提取磷酸吡哆醇氧化酶(PNPO)粗酶液,并通过苯肼法研究其酶学性质。结果表明,以磷酸吡哆胺(PMP)为底物,PNPO催化反应的最佳时间为30min,最适温度为50℃,最适pH6.5。在pH6.0~9.0,温度10~40℃的条件下,此酶稳定。在最适条件下测得反应底物PMP的Km值为2.34mmol/L。
- 李艳霞张剑韵黄龙全
- 关键词：茶树磷酸吡哆醇氧化酶维生素B6
- 采用高效液相色谱技术分析茶树体内维生素B_6被引量：3
- 2010年
- 采用高效液相色谱技术对茶树叶片等组织中维生素B6(VB6)的存在形态进行了分析。结果表明:叶片、嫩茎和根中VB6的含量依次为3.36、1.27、0.18μg/g鲜重;叶片组织中各型VB6的构成比为:吡哆醇21%、吡哆醛2.4%、吡哆胺19.3%、磷酸吡哆醛40.8%和磷酸吡哆胺17.9%;叶片中VB6的含量随叶片的成熟而增加,因叶老化而降低。
- 蒋守花张剑韵黄龙全
- 关键词：茶树维生素B6高效液相色谱
- 烟草NtPLR1基因克隆与表达分析
- 2017年
- 维生素B_6(VB_6)在植物体内参与多种生化反应,对植物生长至关重要,吡哆醛还原酶(PLR)是VB_6代谢转换的作用酶,催化吡哆醛(PL)生成吡哆醇(PN),对维持细胞内VB_6的动态平衡发挥重要作用,而PLR在植物中鲜有报道。以拟南芥Arabidopsis thaliana吡哆醛还原酶氨基酸序列At PLR1为模板,在公用数据库通过同源比对获得数条烟草Nicotiana tabacum Nt PLR1基因的片段,结合互补脱氧核糖核酸(c DNA)的末端快速扩增-聚合酶链式反应(RACE-PCR)技术获得了烟草吡哆醛还原酶Nt PLR1基因。该基因全长1 370 bp,编码369个氨基酸残基,预测其编码蛋白的分子量为41 kDa,理论等电点为9.42。氨基酸多序列比对结果表明:Nt PLR1与其他物种的PLR1相似性较高。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析结果表明:外源吡哆醛PL处理时,Nt PLR1表达先升高后降低,在4 d达到顶峰。相应地,高效液相色谱分析结果表明:烟草叶片中PL含量随时间逐渐降低而吡哆醇PN含量逐渐升高,表明Nt PLR1可像酵母PLR一样,催化PL形成PN。此外,定量分析结果表明:Nt PLR1在烟草根、茎和叶片中均有表达,其中在叶片中表达显著高于其他部位(P<0.05)。在紫外线、氧化和盐害胁迫下,Nt PLR1的表达与对照相比均显著上调(P<0.05),表明Nt PLR1对这3种逆境有响应,可能参与烟草的抗逆过程。将Nt PLR1连入原核表达载体p ET32a,并进行诱导表达,成功表达出目的蛋白。报道的烟草Nt PLR1基因功能为进一步探明植物PLR基因的功能和调控机制以及VB_6的生物合成提供了重要参考。
- 李冰冰刘国峰魏书黄龙全张剑韵
- 关键词：植物学维生素B6烟草基因克隆
- 逆境条件下烟草维生素B_6存在形态的变化被引量：1
- 2013年
- 维生素B6(VB6)是一类吡啶化合物的总称。以组培烟草为材料,采用高效液相色谱结合荧光检测技术,分析紫外线、低温、盐和弱光胁迫对烟草体内VB6各存在形态含量的影响。结果表明:逆境条件下,VB6各存在形态含量发生变化,其中以磷酸吡哆醛和吡哆醇含量升高最明显。
- 王灵红黄龙全张剑韵
- 关键词：维生素B6逆境
