广东省科技计划工业攻关项目(2004B10401011) 作品数:22 被引量:110 H指数:6 相关作者: 邢达 谷怀民 魏华江 何博华 陈雪梅 更多>> 相关机构: 华南师范大学 广东药学院 中山大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 农业科学 更多>>
实时荧光等位基因特异性扩增法快速检测K-ras癌基因点突变 被引量:3 2007年 将荧光定量PCR技术与等位基因特异性扩增(Allele specific amplification,ASA)方法相结合,发展了一种可以快速检测基因点突变的实时荧光等位基因特异性扩增(Real-time ASA)方法.将该法用于检测K-ras癌基因第12位密码子发生的点突变,分别采用针对其不同点突变方式(GAT,GTT,CGT)设计的突变型引物对待测样品进行ASA,只有突变型样品能被顺利扩增出双链DNA产物,该产物才能与双链DNA染料SYBR GreenⅠ结合,发出荧光信号从而被检测到.用该法检测31例结肠癌组织中的K-ras癌基因点突变,其中有15例样品检出为突变型.Real-time ASA法可检测到样品中含量为1/1000的突变型基因,具有灵敏、快速、简便、安全、高通量和低成本等优点,可望用于大量临床样本的点突变筛查. 朱德斌 邢达 李贤 张岚关键词:点突变 结肠癌 高灵敏延迟荧光探测植物光合速率检测系统 被引量:3 2007年 提出了一个新的利用延迟荧光强度来表征植物光合速率的系统。根据延迟荧光光谱特征,选用硅雪崩光电二极管(Si-APD),使其运行在盖革(Geiger)模式下作为延迟荧光单光子探测器,采用有源抑制和门控模式(AQGC)进行驱动,对温度、偏压、鉴别电平等参数进行了优化。为了验证系统性能,以大豆(Zao Shu No.18)叶片为模型样品进行了延迟荧光衰减动力学和本底的测量以及延迟荧光强度与最大净光合速率的对比测量,实验结果表明延迟荧光的信噪比达到1000:1,延迟荧光强度与最大净光合速率的线性相关度达到0.984。该系统具有准确和受外界环境影响小的优点。 王俊生 许文海 黎坚 邢达 陈维山关键词:延迟荧光 单光子 一种新型种子活力快速检测系统的研制 被引量:4 2007年 为克服传统的种子活力测定方法存在的测量时间长、种子用量大、测量准确性差和灵敏度低等缺欠,提出了一种以89C55单片机为核心实现对种子活力的快速检测系统。该系统通过测量种子吸胀初期其化学发光(CL)探针试剂介导的CL强度来表征种子的活力。系统基于超弱发光探测技术,采用单光子计数模块(SPCM)来接收CL,具有很高的精度和信噪比,自带步进电机驱动和温度控制,通过通用串行总线(USB)接口与上位机连接,实时分析处理数据并显示。实验结果表明,该系统运行稳定,具有低成本、高精度和方便实用等优点。 黎坚 邢达 许文海关键词:种子活力 近红外光谱范围人肝癌变和热凝固导致组织吸收和散射特性的变化 被引量:9 2007年 研究了人肝的癌变及热凝固导致其对710,730,750,770,790,810,830,850,870和890nm的钛宝石激光的吸收和散射特性的变化,实验采用双积分球测量系统以及反向倍增法获取肝组织的吸收和散射特性参数。结果表明人肝的癌变导致其吸收系数发生了显著的减小,其变化的最大值在850nm,其值为86.12%,而变化的最小值在750nm,其值为82.65%。正常人肝组织热凝固导致其吸收系数明显变化,其吸收系数的变化的最大值在710nm,其值为79.55%,而变化的最小值在790nm,其值为0.72%。人肝癌组织热凝固导致其吸收系数显著地增大,其变化的最大值在810nm,其值为78.69%,而变化的最小值在710nm,其值为38.16%。人肝的癌变导致了肝组织的散射系数发生了显著的增大,其变化的最大值在710nm,其值为158.37%,而变化的最小值在890nm,其值为136.03%。正常人肝组织热凝固导致其散射系数显著地增大,其变化的最大值在890nm,其值为632.92%,而变化的最小值在710nm,其值为587.40%。人肝癌组织热凝固导致其散射系数显著地增大,其变化的最大值在810nm,其值为384.25%,而变化的最小值在710nm,其值为330.86%。肝组织的吸收和散射特性的变化也随着激光波长的变化而变化。 魏华江 邢达 何博华 谷怀民 巫国勇 陈雪梅 鲁建军关键词:人肝组织 钛宝石激光 癌变 热凝固 荧光相关谱测量技术研究 被引量:2 2007年 荧光相关谱(fluorescence correlation spectroscopy,FCS)是对处于热平衡态条件下的荧光分子发出的荧光强度涨落进行时间相关处理的一种单分子检测方法,能够直接测量分子在溶液里的扩散系数和浓度。影响FCS测量扩散系数准确性的因素有分子量子效率,测量时间,样本折射率和温度偏差等。用FCS分别测量溶有荧光染料罗丹明6G(rhodamine 6G,Rh.6G)和青色素Cy5甘油水溶液的粘滞系数,实验结果表明:荧光分子的量子效率是影响测量准确性的重要因素,要求其每秒发射的光子数目(photon counts per second,cps)至少达到1 000(photons/s)。 梁丽芳 邢达 陈同生 裴沂辉关键词:单分子检测 粘滞系数 量子效率 折射率 改进的同步迭代算法在光声血管成像中的应用 被引量:15 2007年 光声成像结合了光学成像和声学成像的优点,是一种高分辨率,高对比度的无损伤医学成像技术.一种改进的同步迭代算法应用于光声图像重建.仿真和模拟结果表明,与传统的代数迭代算法相比,在90°,135°,180°的有限场光声成像中,此算法对测量误差的校正和迭代次数的收敛上具有较大的优势,图像重建的速度和成像质量都有了明显的提高.实验中,一种圆形扫描结构的光声成像装置,用于180°的有限场扫描,利用改进的同步迭代算法,重建出了高对比度和高分辨率(60μm)的鸡胚胎光声血管图像.实验证明,这种算法的应用,大幅度减少了数据采集时间,为光声成像技术运用于实时监测血流灌注和肿瘤光动力治疗的血管损伤效应提供了潜在的应用价值. 向良忠 邢达 谷怀民 杨迪武 杨思华 曾吕明关键词:光声成像 采用空间分辨漫反射测定胃组织光学特性 被引量:10 2007年 研究了人正常胃黏膜及黏膜下层组织对488 nm,514.5 nm,532 nm,630 nm和632.8 nm的激光的光学特性及其差异,实验采用空间分辨反射光和CCD探测器以及非线性拟合确定组织光学特性。结果表明,人正常胃黏膜及黏膜下层组织对五个波长的激光的吸收系数、约化散射系数、光学穿透深度、漫射系数、漫反射率和漫反射率的位移都是随着激光波长的变化而变化的。其吸收系数的最大值在532 nm,其值为0.482 mm-1,最小值在632.8 nm,其值为0.224 mm-1,最大差异在532 nm和632.8 nm之间,其值为115%,最小差异在488 nm和532 nm之间,其值为1.90%。其约化散射系数的最大值在488 nm,其值为5.93 mm-1,最小值在632.8 nm,其值为3.87 mm-1,最大差异在488 nm和632.8 nm之间,其值为53.2%,最小差异在514.5 nm和532 nm之间,其值为3.25%。其光学穿透深度的最大值在632.8 nm,其值为0.612 mm,最小值在488 nm,其值为0.341 mm。其漫射系数的最大值在632.8 nm,其值为0.084 mm,最小值在488 nm,其值为0.055 mm。其漫反射率的最大值在630 nm,其值为0.356,最小值在532 nm,其值为0.271。其Δx的最大值在632.8 nm,其值为0.153 mm,最小值在488 nm,其值为0.100 mm。可见,人正常胃黏膜/黏膜下层组织对五个波长的激光的光学特性参数存在明显的差异。 魏华江 邢达 巫国勇 陈雪梅 何博华 鲁建军关键词:医用光学与生物技术 组织光学 光学特性 激光 光谱法研究FCLA与人血清白蛋白的相互作用 被引量:6 2007年 在生物学和医学中活性氧的检测非常重要。海萤荧光素类似物FCLA是检测单态氧(1O2)和超氧阴离子(O2-)的一种高灵敏的化学发光探针。文章用光谱法研究了FCLA与人血清白蛋白(HSA)的结合反应,发现FCLA对HSA的荧光有很强的猝灭作用。从荧光猝灭结果求得了FCLA与HSA的结合位点数。根据Frster非辐射能量转移机理探讨了二者相互结合时其给体-受体间的距离和能量转移效率,从而证实了它们的结合作用为静态猝灭过程。阐明了由于能量转移所导致的HSA荧光的猝灭及FCLA荧光的产生机理。通过光谱法对FCLA与HSA的相互作用的研究,阐明FCLA的运输过程及其在体内的作用机制,对实现利用探针在体检测活性氧具有一定的意义,同时也为药物动力分析、体内药物转运的研究提供了基础。 周静 魏言春关键词:人血清白蛋白 荧光猝灭 叶绿体延迟荧光中730nm成分产生机理的光谱学研究 被引量:7 2006年 叶绿体685nm延迟荧光成分被认为源于PSⅡ作用中心的电荷复合。利用多种光谱学测量手段研究了叶绿体延迟荧光光谱中730nm峰的产生机制。不同浓度下叶绿体延迟荧光光谱实验结果表明:初始随浓度的增加,延迟荧光光谱中685和730nm成分强度均增强;当浓度增加到7.8μg·mL-1时,685nm成分强度达最大,730nm成分强度继续上升;当浓度增加到31.2μg·mL-1时,延迟荧光光谱中730nm成分强度达最大,而685nm成分已明显下降。吸收光谱实验结果表明:A685A730在叶绿体浓度增加的过程中几乎不变。叶绿体730nm荧光成分的激发光谱实验结果表明:685nm光对730nm荧光有较高的激发效率。上述实验结果表明叶绿体延迟荧光光谱中730nm峰是由PSⅡ所发685nm成分激发PSⅠ所产生的荧光。同一浓度下叶绿体延迟荧光光谱波形随延迟时间(1~9s)的不变性进一步证明了这一结论。 王成龙 邢达 曾礼漳关键词:叶绿体 延迟荧光 重吸收 电化学发光反转录聚合酶链式反应技术检测齿兰环斑病毒 被引量:9 2006年 发展高效的病毒检测技术已成为当今生物学研究的热点之一。本研究将反转录聚合酶链式反应(PCR)技术与电化学发光分析方法结合起来,用于检测兰花中齿兰环斑病毒。检测过程中采用生物素标记的探针与PCR产物杂交,可起到筛选特异性产物的作用,从而避免假阳性结果的产生。三联吡啶钌标记探针与PCR产物杂交,既可以起到进一步筛选目的片段的作用,又可与分析液中的三丙胺反应,从而产生光信号,被电化学发光仪所检测到。在引物的5′端分别连接一段特异性核酸序列,既提高了钌探针与特异性产物的杂交几率,又增强了样品检测信号,从而提高了信躁比。实验结果表明:此方法灵敏度高、稳定性好、操作简单,可以从兰花样品中准确地检测到齿兰环斑病毒,有望发展成为一种高效的病毒检测方法。 唐亚兵 邢达 刘晋峰 朱德斌关键词:电化学发光 齿兰环斑病毒 三联吡啶钌