国家自然科学基金(30400437)
- 作品数：7 被引量：24H指数：3
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- SR-A受体参与抑制LPS刺激RAW264.7产生炎症因子被引量：6
- 2006年
- 目的探讨清道夫受体A能否抑制LPS刺激RAW 264.7产生炎症因子。方法LPS诱导小鼠巨噬细胞株RAW 264.7 SR-A受体上调后,用LPS再次刺激,观察SR-A受体的上调能否抑制RAW 264.7对LPS的反应,最后采用遗传互补实验观察转染SR-A受体后能否抑制LPS活化NFκ-B。结果LPS刺激SR-A受体已上调的RAW 264.7产生的炎症因子明显下降,而遗传互补实验证实SR-A受体确实能抑制LPS通过TLR4活化NFκ-B。结论SR-A受体参与负调控LPS对RAW 264.7的活化,防止过强的炎症反应。
- 徐文岳吴玉章王莉王惠明王沂芹赵婷婷梁云飞姜曼
- 关键词：LPS清道夫受体RAW264.7炎症因子
- 外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞与乙型肝炎疫苗接种后应答关系的研究被引量：2
- 2009年
- 目的通过检测乙型肝炎（简称乙肝）疫苗接种后弱应答和无应答人外周血CIM＋CD25＋调节性T细胞（CIM＋CD25＋regulatoryTcell，简称Treg细胞）的频率，探讨CIM＋CD25＋调节性T细胞与乙肝疫苗接种后弱和（或）无应答之间的关系。方法利用流式细胞分析方法对25例乙肝疫苗无应答、30例乙肝疫苗弱应答者外周血Treg细胞的频率进行分析，另外选取20例乙肝疫苗强应答者作为对照。结果强应答组Treg细胞的频率为（4．32±1．21）％，弱应答组Treg细胞的频率为（7．01±1．06）％，无应答组Treg细胞的频率为（12．75±2．01）％，无应答组和弱应答组与强应答组相比Treg细胞频率显著升高（t=8．426，t=3．289，P值均〈0．01）。结论乙肝疫苗接种后无应答和弱应答现象与外周血CIM＋CD25＋调节性T细胞频率升高存在一定关系。
- 牛微杨曌尚小云傅晓岚唐艳姜曼王莉
- 关键词：抗体生成流式细胞术
- Fucoidan选择性抑制LPS诱导巨噬细胞分泌IL-12被引量：1
- 2006年
- 目的探讨配体fucoidan活化清道夫受体后能否抑制LPS刺激巨噬细胞分泌IL-12。方法不同剂量的fu-coidan(以多价阴离子chondroitin为阴性对照)与RAW264.7作用10 min后,加入等量的LPS刺激,检测上清中IL-12p70I、L-6和TNF-α;同时观察不同剂量fucoidan对RAW264.7贴壁的影响。结果不同剂量的fucoidan能不同程度促进LPS诱导RAW264.7分泌炎症因子IL-6和TNF-α,但却能明显地抑制IL-12的分泌;随着所加fucoidan量的增加,RAW264.7细胞的贴壁能力逐渐下降。结论Fucoidan可能通过与清道夫受体SR-A(scavenger receptor A)结合发挥其特异抑制LPS诱导巨噬细胞分泌IL-12的作用。
- 徐文岳吴玉章王莉王惠明王沂芹赵婷婷梁云飞牛微
- 关键词：IL-12RAW264.7LPS
- 基于survivin的肿瘤生物治疗研究进展被引量：3
- 2006年
- survivin是一种细胞凋亡抑制蛋白,属于IAP(inhibitor apoptosis protein)蛋白质家族。由于其独特的结构、特殊的组织学分布,成为肿瘤生物治疗领域的研究热点,已有大量研究证明其作为治疗靶点的有效性。本文着重综述survivin在肿瘤生物治疗策略中的研究进展。
- 杨曌王莉
- 关键词：SURVIVIN生物治疗
- 体外转录制备的siRNAs对SARS-CoV复制的抑制作用
- 2005年
- 目的体外研究针对SARSCoVRNA依赖性RNA聚合酶(RNAdependentRNApolymerase,RdRp)的小干扰RNA(SmallinterferenceRNA,siRNA)对SARSCoV感染的抑制效应。方法利用Ambion公司在线设计工具,设计出4条针对RdRp基因的siRNAs,并在体外利用试剂盒进行转录合成。在SARSCoV感染前1d,将这4条体外转录的siRNAs用Lipofectamine2000试剂转染入VeroE6细胞中。感染后,每天观察感染细胞的细胞病变效应(Cytopathiceffect,CPE)。第5天,用空斑形成实验(Plaqueformationunit,PFU)检测感染细胞培养上清液中SARSCoV滴度。结果CPE结果显示,在感染后的前4d,各siRNAs均能有效地保护细胞免受感染;在第5天,4条siRNAs中有3条仍能有效保护细胞不被感染。PFU实验结果显示,在第5天,所有siRNAs转染的细胞培养上清液中,SARSCoV的滴度均显著低于阳性对照(P<0.001)。结论实验结果表明针对SARSCoV的RdRp基因的siRNAs能有效而特异地抑制该病毒在哺乳动物细胞中的复制和繁殖,提示如果应用合适的给药途径,RNAi策略可以用于体内抑制SARSCoV的感染。
- 石孝民周高标毛丽伟姜曼黎万玲何仰东吴玉章倪兵
- 关键词：RNA干扰小干扰RNA
- CD4^+ CD25^+调节性T细胞对乙肝疫苗弱/无应答者外周血单个核细胞分泌IL-4水平和抗-HBs产生的影响被引量：9
- 2007年
- 目的:通过分析乙肝疫苗弱/无应答者外周血单个核细胞(PBMC)剔除CD4+ CD25+调节性T细胞(简称Treg细胞)和不剔除Treg细胞后,用乙肝表面抗原(HBsAg)诱导,检测其培养上清IL-4分泌水平和抗-HBs的产生水平,来探讨Treg细胞与乙肝疫苗弱/无应答现象的关系。方法:选择25例乙肝疫苗无应答者,30例弱应答者,同时选择20例强应答者作为对照,用HBsAg在体外诱导剔除和不剔除Treg细胞的3组人外周血PBMC,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清的IL-4分泌水平和抗-HBs的产生水平。结果:剔除Treg细胞的外周血PBMC经HBsAg诱导,其培养上清IL-4分泌水平强应答组、弱应答组和无应答组相比无明显差异(P>0.05),其抗-HBs的产生水平也无明显差异(P>0.05);不剔除Treg细胞的外周血PBMC经HBsAg诱导,其培养上清IL-4分泌水平与抗-HBs的产生水平弱/无应答组与强应答组相比差异有显著性(P<0.01),弱/无应答组的IL-4分泌水平与抗-HBs的产生水平显著低于强应答组。结论:不剔除Treg细胞的外周血PBMC经HBsAg诱导,其培养上清IL-4分泌水平和抗-HBs的产生水平弱/无应答者与强应答者相比显著低下。由于IL-4主要是由Th2细胞分泌,因此我们推测乙肝疫苗弱/无应答现象可能是由于Treg细胞抑制了Th2细胞的极化,从而影响了机体的体液免疫应答。
- 牛微杨曌尚小云吴玉章唐艳姜曼黎万玲王莉
- 关键词：TREG细胞抗-HBS
- 质粒介导的RNAi抑制SARS-CoV复制和感染被引量：3
- 2005年
- 目的研究RNAi作为治疗SARS-CoV感染新策略的可能性。方法选择并克隆针对SARS-CoV编码基因的共同前导序列非结构蛋白-1(Non-structureprotein1,NSP1)的siRNAs;RT-PCR和FACS法检测所选取的siRNAs对NSP1基因抑制的特异性和有效性;利用MTT法检测选取的siRNAs对病毒感染的细胞生存率的影响;空斑形成实验证实在siRNAs存在下病毒量减少情况;RT-PCR和Western-blot法进一步证实感染细胞中S和N基因在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果结果显示重组质粒衍生的靶向SARS-CoVNSP1的siRNAs能特异地抑制靶序列表达;在体外培养的VeroE6细胞中能显著抑制SARS-CoV的复制与繁殖。感染1d后,RT-PCR和Western-blot结果显示,同对照组相比,SARS-CoV的S和N基因的mRNA和蛋白质表达均显著减少。结论NSP1序列是SARS-CoV的RNAi策略的有效靶标,这些siRNAs很可能广泛地抑制了SARS-CoV亚基因组的合成及随后的蛋白质表达。
- 严春晖倪兵刘锋姬西宁
- 关键词：RNA干扰小干扰RNA
