国家自然科学基金(31060237)
- 作品数:4 被引量:31H指数:2
- 相关作者:张仲凯董家红苏晓霞方琦郑雪更多>>
- 相关机构:云南省农业科学院云南省烟草公司云南省农业生物技术重点实验室更多>>
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- 番茄环纹斑点病毒NSs蛋白缺失突变体对RNA沉默影响的初步分析
- 番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)属于布尼亚病毒科(Bunyaviridae),番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒.TZSV为单链线状三分体RNA病毒,3个RNA片段根...
- 郑宽瑜董家红张仲凯
- 关键词:缺失突变体
- 云南传毒介体蓟马及其寄主植物种类和发生动态
- 番茄斑萎病毒属(Tospovirus)是布尼亚病毒科(Bunyaviridae)中唯一可侵染植物的成员,主要由蓟马传播,是一类对农业生产具有严重破坏作用的植物病毒,每年在世界范围内造成数亿美元的经济损失,被列为世界为害最...
- 郑雪李宏光刘春明肖俊华李兴勇陈永对陈宗麒张仲凯董家红
- 关键词:传毒介体
- 云南省红河地区传播番茄斑萎病毒属病毒的蓟马及其寄主植物种类调查被引量:20
- 2013年
- 2011年7月至2012年8月对云南省红河州传播番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒的蓟马种类及其寄主植物进行了系统调查。明确了西花蓟马、花蓟马、烟蓟马和棕榈蓟马4种为传毒蓟马。其寄主植物主要有辣子草、粉花月见草、茴茴蒜等30种以上田间杂草和白菜、蚕豆、番茄等超过20种作物。
- 郑雪刘春明李宏光张洁董家红张仲凯
- 关键词:传毒介体
- 番茄斑萎病毒属病毒非结构蛋白NSs的生物信息学分析被引量:1
- 2014年
- 番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒编码的非结构蛋白NSs,可能在病毒复制、转录、抑制RNA沉默中起重要作用,本文利用生物信息方法对21个Tospovirus病毒成员的NSs序列进行分析,为进一步研究NSs的功能提供参考信息。从GenBank数据库中下载NSs基因序列,用DNAMAN5.0做NSs相似性矩阵分析,发现一些Tospovirus病毒成员之间的NSs氨基酸序列相似性很低,最低仅为7.1%;用ClustalX2.1进行NSs的氨基酸多序列比对分析,发现Tospovirus病毒成员的NSs相对保守区主要位于NSs的C端的位置,高度保守的氨基酸位点共有9个;PROSITE对NSs进行模体预测分析,结果显示Tospovirus病毒NSs共有的蛋白修饰:C蛋白激酶磷酸化、酪蛋白激酶II磷酸化和N-酰基化。此外,不同种的Tospovirus病毒NSs模体也表现出了多样性的特点。预测结果为下一步研究NSs功能奠定了基础。
- 郑宽瑜董家红苏晓霞方琦郑雪张仲凯
- 关键词:番茄斑萎病毒属非结构蛋白NSS生物信息学
- 云南澳洲坚果苗木感染番茄斑萎病毒属病毒初报被引量:12
- 2013年
- 在云南省临沧市永德县海拔约800m的澳洲坚果(Macadamia sp.)种苗繁育基地发现叶片褪绿、黄化、叶脉间呈现近似圆形或不规则褐色枯斑的植株。为了确认植株病因,采集典型病株,应用电子显微镜负染色法、超薄切片和DAS-ELISA进行检测,在澳洲坚果苗木病叶分离物Maca-LC的粗汁液和病叶超薄切片中均观察到有类似番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒粒体。该病毒粒子为球形,直径80~85nm。进一步应用DAS-ELISA方法鉴定,病叶与Tospovirus的西瓜银色斑驳病毒(Watermelon silver mottle virus,WSMoV)/花生芽坏死病毒(Groundnut bud necrosisvirus,GBNV)复合抗血清呈阳性反应。通过病症典型症状、病毒形态学观察及血清学方法检测表明,侵染云南澳洲坚果种苗的病毒分离物Maca-LC为番茄斑萎病毒属Tospovirus病毒。
- 方琦丁铭董家红尹跃艳张磊苏晓霞李婷婷张丽珍彭潞波张仲凯
- 关键词:澳洲坚果番茄斑萎病毒属超薄切片
- 番茄环纹斑点病毒非结构蛋白NSs的原核表达及多抗血清制备被引量:1
- 2015年
- 用RT-PCR从感染番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)的番茄中扩增出编码病毒非结构蛋白NSs基因,将NSs基因构建到原核表达载体p ET-30 a中,获得原核表达载体p ET-30a-NSs,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。SDSPAGE电泳分析显示,高效诱导表达了57k Da融合蛋白。用回收纯化的融合蛋白免疫家兔,获得多抗血清。间接ELISA测定多抗血清的效价为1/8192。用制备好的抗血清对TZSV感病病样进行Western blotting检测,能检测到特异性条带。结果表明该抗血清可用于TZSV的检测,并为进一步研究NSs功能奠定了基础。
- 郑宽瑜董家红尹跃艳方琦苏晓霞张仲凯
- 关键词:非结构蛋白原核表达抗血清