广东省自然科学基金(9451051501002539)
- 作品数：10 被引量：36H指数：4
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- 人胚肺成纤维细胞衰老过程中P66Shc启动子区CpG岛甲基化状态被引量：1
- 2011年
- 目的探讨人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中P66Shc的表达改变及其启动子区域的甲基化水平变化。方法荧光定量PCR方法检测细胞衰老过程中的mRNA表达改变,甲基化特异性PCR(MSP)定性检测甲基化的变化情况,亚硫酸氢盐修饰基因组结合克隆测序定量检测启动子区域CpG岛甲基化水平。结果人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中,P66Shc的mRNA表达水平逐渐升高,中年细胞组及复制性衰老细胞组mRNA表达分别升高至1.78和1.73倍,而早衰组却显著增高,至7.16倍;年轻细胞组、复制性衰老细胞组及早衰组P66Shc启动子区域CpG岛呈高甲基化水平,分别为94%、90%和90%。结论人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中P66Shc的mRNA表达水平逐渐升高,其启动子区CpG岛呈高的甲基化水平,不参与该基因表达调控。
- 张文娟纪卫东杨淋清许玉玲庄志雄
- 关键词：细胞衰老早衰P66SHC甲基化
- 人胚肺成纤维细胞衰老过程中胰岛素样生长因子2表观遗传活化作用
- 2010年
- 目的观察体外培养人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中及过氧化氢诱导早衰持续阶段胰岛素样生长因子2(IGF2)表观遗传学修饰。方法荧光定量PCR检测IGF2的mRNA表达,甲基化特异PCR检测其启动子区甲基化改变,染色质免疫沉淀结合定量PCR检测组蛋白修饰,包括组蛋白H3、H4乙酰化,H3(Lys4)及H4(Lys20)甲基化修饰。结果细胞复制性衰老过程中,中年细胞组及复制性衰老细胞组IGF2的mRNA表达升高,早衰持续组升高显著;细胞衰老过程中,仅复制性衰老细胞组在启动子区-658～-456bp具有一定的甲基化水平;复制性衰老细胞组的组蛋白修饰在启动子区-856～-634bp以H4乙酰化,H3甲基化修饰为主;+9～+145bp的修饰,复制性衰老细胞组受组蛋白H3及H4甲基化联合修饰,早衰持续组以H3甲基化修饰为主。结论细胞衰老过程中,IGF2启动子区组蛋白修饰联合调控其mRNA表达,复制性衰老与早衰的调控机制存在差异。
- 张文娟纪卫东杨淋清许玉玲张文姬庄志雄
- 关键词：细胞衰老胰岛素样生长因子2
- 细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中基因组DNA甲基化水平改变被引量：3
- 2010年
- 目的检测体外培养的人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的细胞早衰过程中基因组DNA甲基化及甲基转移酶DNMT1的表达改变。方法应用5-甲基胞嘧啶免疫荧光法及[3H]甲基掺入法检测细胞衰老不同阶段细胞基因组DNA整体甲基化变化趋势,以Q-PCR和Western Blot方法检测DNMT1的mRNA和蛋白表达变化。结果细胞复制性衰老过程及早衰过程中,与年轻细胞组相比,5-甲基胞嘧啶免疫荧光强度逐渐降低,[3H]甲基掺入实验结果显示,甲基化的CpG%分别为年轻细胞组68.2%,中年细胞组41.9%,复制性衰老组16.1%,而早衰起始组63.5%,早衰持续组18.0%。DNMT1的mRNA和蛋白表达水平一致,在细胞复制性衰老过程中,DNMT1表达呈下降趋势,复制性衰老细胞组表达水平最低,而早衰起始组DNMT1表达显著升高,早衰持续组又降低至同复制性衰老组水平。结论本试验条件下,在细胞复制性衰老及早衰过程中,基因组DNA甲基化水平逐渐降低,基因组低甲基化是衰老细胞的伴随状态,与DNMT1水平降低有关。
- 张文娟纪卫东杨淋清许玉玲张文姬庄志雄
- 关键词：细胞衰老DNMT1人胚肺成纤维细胞
- 广州市1997-2007年食物中毒流行特征分析被引量：11
- 2011年
- 目的探讨广东省广州市1997-2007年食物中毒的发生规律和流行特征,为有效预防和控制食物中毒提供科学依据。方法对广州市1997-2007年食物中毒发生的起数、人数、时空分布和病因进行统计分析。结果广州市1997-2007年共发生食物中毒462起,中毒8682例,死亡37例,年均发病率为10.70/10万;集体食堂发生的中毒起数最多,有180起,占38.96%;其次是饮食服务单位和家庭,分别有155和92起,占33.55%和19.91%,其他场所有35起,占7.58%;中毒例数也以集体食堂最多,有5437例,占62.62%;其次为饮食服务单位,有2366例,占27.25%;家庭和其他较少,分别有495和384例,占5.70%和4.42%;食物中毒起数和例数以第二、三季度高发,死亡例数则以第一季度高发;中毒食物以肉及肉制品和果蔬类为主,肉及肉制品的中毒发生原因主要是原料污染或变质。结论在食物中毒高发季节,控制肉及肉制品、果蔬类的原料污染和变质问题是预防食物中毒的关键。
- 张文娟裴桂张锦周张文姬
- 关键词：食物中毒食品安全
- 人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中差异甲基化基因谱分析
- 目的 筛检人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中年轻及复制性衰老阶段差异的甲基化基因,为细胞衰老相关基因的表观遗传调控机制提供理论依据.方法 以人胚肺成纤维细胞为研究对象,利用免疫共沉淀(MeDIP)方法捕获并富集甲基化基因组...
- 张文娟纪卫东杨淋清胡大林杨建平袁建辉庄志雄
- 关键词：肺成纤维细胞衰老甲基化
- 过氧化氢诱导细胞早衰过程中p66Shc的表观遗传修饰机制
- 目的:近年来研究表明,p66Shc在多种细胞中表达,参与细胞生长与氧化应激的信号转导途径,敲除该基因可以延长动物的寿命,这将机体衰老与信号转导联系起来,成为衰老机制研究的新热点。本研究主要观察体外培养的人胚肺成纤维细胞在...
- 张文娟纪卫东杨淋清杨建平许玉玲徐薇庄志雄
- 关键词：人胚肺成纤维细胞CPGP66SHC甲基化修饰
- 文献传递
- 人胚肺成纤维细胞衰老过程中Foxa2启动子区CpG岛的甲基化状态
- 2012年
- 目的探讨人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中Foxa2的表达改变及其启动子区CpG岛的甲基化水平变化。方法按传代情况将人胚肺成纤维细胞分为年轻细胞[第22代细胞,即22 PDL(populationdoubling levels,群体倍增水平)]组、中年细胞(35PDL)组、复制性衰老细胞(49PDL)组和氧化应激诱导的早衰细胞(premature senescence,PS)组。用荧光定量PCR方法检测人胚肺成纤维细胞衰老过程中Foxa2的mRNA表达改变,应用甲基化特异性PCR(MSP)检测启动子区-777～-478 bp甲基化的变化情况,并用亚硫酸氢盐修饰基因组结合克隆测序检测启动子区域CpG岛的甲基化水平。结果与年轻细胞组比较,中年细胞组人胚肺成纤维细胞Foxa2 mRNA的表达水平无明显变化;而复制性衰老细胞组和早衰细胞组人胚肺成纤维细胞Foxa2的mRNA表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。早衰细胞组的启动子区具有一定的甲基化水平;年轻细胞组、复制性衰老细胞组及早衰细胞组Foxa2启动子区CpG岛的甲基化水平分别为5.7%,17.1%和43.6%。结论人胚肺成纤维细胞衰老过程中Foxa2的mRNA表达水平逐渐降低,其启动子区CpG岛甲基化水平逐渐升高,参与其表达调控。
- 张文娟纪卫东杨淋清许玉玲庄志雄
- 关键词：细胞衰老早衰甲基化
- 人胚肺成纤维细胞衰老过程中P66Shc启动子区组蛋白修饰变化
- 2012年
- 目的检测体外培养的人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中及过氧化氢诱导细胞早衰阶段P66Shc启动子区的组蛋白修饰变化。方法按传代情况将人胚肺成纤维细胞分为年轻细胞(22 population doubling levels,22PDL)组、中年细胞(35PDL)组、复制性衰老细胞(49PDL)组和氧化应激诱导的早衰细胞(premature senescence,PS)组。检测P66Shc的mRNA表达及其启动子区IP1、IP2组蛋白修饰,包括组蛋白H3、H4乙酰化和H3(Lys4)甲基化修饰。结果与年轻细胞组比较,中年细胞组、复制性衰老细胞组和早衰组人胚肺成纤维细胞P66Shc mRNA表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。在P66Shc IP1启动子区(-1 641～-1 392 bp),中年细胞组和复制性衰老细胞组以H4乙酰化修饰为主,而早衰细胞组受H3、H4乙酰化和H3(Lys4)甲基化的联合修饰;在P66Shc IP2启动子区(-129～45 bp),中年细胞组和复制性衰老细胞组受H3(Lys4)甲基化修饰,而早衰细胞组受H4乙酰化和H4(Lys4)甲基化联合修饰。结论在细胞衰老过程中,P66Shc启动子区的组蛋白修饰参与其mRNA表达调控,复制性衰老与早衰的调控机制存在差异。
- 张文娟纪卫东杨淋清许玉玲庄志雄
- 关键词：细胞衰老P66SHC乙酰化
- 广州市某区2004-2008年生活饮用水水质监测结果分析被引量：12
- 2010年
- 目的了解广州市某区生活饮用水水质的卫生安全状况,为生活饮用水的卫生监督及管理提供科学依据。方法对该区2004-2008年管网末梢水和二次供水水质监测资料进行统计分析,检测指标包括浑浊度、菌落总数、总大肠菌群、游离余氯。结果抽检水样的管网末梢水综合合格率为41.45%,二次供水为31.21%;年度检测合格率逐年上升。管网末梢水综合合格率比二次供水高,两者的4项常规监测指标总合格率高低分布相一致;两者各季度综合合格率差异有统计学意义,第二、三季度偏低,各为23.30%和20.00%。菌落总数指标合格率与季度总合格率分布一致,二次供水游离余氯合格率明显低于管网末梢水。结论广州市该区生活饮用水的水质综合合格率逐年升高,但仍偏低,有季度分布差异,应加强对生活饮用水的防护与卫生监督。
- 张文娟赖俊梅张锦周张文姬
- 关键词：生活饮用水水质二次供水管网末梢水
- 人胚肺成纤维细胞衰老过程中Foxa2启动子区组蛋白修饰变化被引量：1
- 2013年
- 目的检测体外培养的人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中及过氧化氢诱导细胞早衰阶段Foxa2启动子区的组蛋白修饰变化。方法按传代情况将人胚肺成纤维细胞分为年轻细胞(22 population doubling levels,22PDL)组、中年细胞(35PDL)组、复制性衰老细胞(49PDL)组和氧化应激诱导的早衰细胞(premature senescence,PS)组。采用荧光定量PCR检测Foxa2的mRNA表达水平,染色质免疫沉淀方法检测其启动子区IP1(-740 bp^-596 bp)、IP2(-187 bp^+84 bp)的组蛋白修饰,包括组蛋白H3、H4乙酰化及H3(Lys4)、H4(Lys20)甲基化修饰。结果与年轻细胞组比较,复制性衰老细胞组和早衰组人胚肺成纤维细胞Foxa2 mRNA表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05),中年细胞组无明显变化。在Foxa2 IP1启动子区,衰老的细胞具有降低的H3组蛋白乙酰化和增加的H4(Lys20)甲基化修饰;在IP2启动子区,衰老的细胞具有降低的H3(Lys4)甲基化修饰特征。结论在细胞衰老过程中,Foxa2启动子区特异的组蛋白修饰参与调控其mRNA表达水平。
- 张文娟纪卫东杨淋清许玉玲欧艺庄志雄
- 关键词：细胞衰老乙酰化甲基化
