国家自然科学基金(81230043)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- 基于生物信息学的抑癌基因NDRG2相互作用蛋白预测及验证被引量：1
- 2013年
- NDRG2(N-Myc downstream regulator gene 2)是NDRG家族成员之一.以往研究表明,该家族与细胞的增殖和分化有关.而该分子参与的细胞信号通路及调节机制尚未阐明.本研究利用保守蛋白间相互作用(interologs)的生物信息学方法预测NDRG2相互作用分子,并通过免疫共沉淀(Co-IP)及His pull-down蛋白体外结合实验方法对预测结果进行验证.生物信息学软件预测和分析结果表明,细胞中存在多个可能与NDRG2发生相互作用分子.结合文献报道,从中选取了3个候选分子Gnb1、Rgs16及Rgs5进行分子生物学实验验证.Co-IP及His pull-down实验结果表明,3个候选分子中,Rgs5蛋白能够和NDRG2蛋白相互作用,而其它2个候选分子与NDRG2的相互作用未获得实验室方法的验证.研究结果表明,生物信息学分析与实验室验证相结合是一种高效省时的蛋白质相互作用研究策略.通过这种策略证实NDRG2可以与Rgs5蛋白相互作用,为后续NDRG2功能的研究提供了有效的线索.
- 牛天水刘学武李霞茹懿王秦豪张璟
- 关键词：生物信息学NDRG2蛋白质相互作用
- 慢病毒介导的N-myc下游调节基因-2对肾癌细胞株786-0增殖及细胞周期素D1、p21表达的影响
- 2013年
- 目的观察N—myc下游调节基因-2（NDRG2）对肾癌细胞株786—0增殖及细胞周期素（Cyclin）D1、p21表达的影响。方法以携带人NDRG2基因的慢病毒载体感染体外培养的肾癌细胞株786-O。采用间接免疫荧光实验检测慢病毒感染后细胞中NDRG2的过表达。Westernblot检测CyclinD1、p21的表达变化，通过细胞生长实验、平板克隆实验检测NDRG2对786一O细胞增殖能力的影响。流式细胞仪检测感染前后细胞的凋亡。结果786一O细胞经慢病毒感染后NDRG2蛋白表达水平明显增加。Westernblot实验显示慢病毒感染后细胞中CyclinD1表达明显降低；而p21表达明显增加。噻唑蓝（MTT）比色（抑制率12h为3．96％，24h为4．78％，36h为9．32％，48h为20．27％，60h为22．85％，72h为30．86％）显示NDRG2对786—0细胞的生长有明显抑制作用。平板克隆实验（3组分别为67．1％、65．5％和41．7％）显示lenti—NDRG2组786—0细胞的克隆形成能力明显降低。流式细胞术显示lenti-NDRG2组细胞凋亡率为（17．20±1．44）％，明显高于对照组[（6．30±0．46）％，t=12．49，P〈0．01]和lenti—mCherry组[（6．00±0．31）％，t=13．17，P〈0．01]。结论通过慢病毒载体使786-O细胞表达NDRG2基因，可以明显抑制细胞的增殖，并可降低CyelinD1表达，同时增加p2l的表达。
- 高磊张景张瑞袁建林武国军王禾
- 关键词：肾癌细胞周期
- 引火烧身还是借刀杀人?——抗酸机制对肿瘤命运的转变
- 2015年
- 肿瘤细胞在高代谢过程中产生了大量酸性产物,对细胞正常代谢过程产生重大影响。但是,肿瘤细胞的生长不但不受其抑制,而且还能利用抗酸机制增强其侵袭和转移能力。谷氨酰胺作为潜在的抗酸物质逐渐受到关注,深入研究其抗酸机制将为临床治疗恶性肿瘤提供新的靶点。
- 周龙志黄启科马一虎林楷丰李燕
- 关键词：谷氨酰胺
