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白细胞介素-10基因转染肝星状细胞对细胞凋亡及信号转导和转录活化因子-1表达的影响: 2014年; 目的观察腺病毒介导的白细胞介素-10（IL-10）基因（Ad—IL-10）转染肝星状细胞（HSC）对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的细胞凋亡及信号转导和转录活化因子-1（STAT-1）表达的影响。方法以293细胞包装构建重组腺病毒载体系统Ad5-hiL10-IRES-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）。将体外培养的人HSC分为5组：空白对照组、空载组、TNF-α（10μg／L）组、空载组＋TNF-α（10μg/L）组、Ad—IL—10＋TNF—α（10μg／L）组。流式细胞仪检测HSC细胞的凋亡比例；Westernblot检测HSC细胞STAT-1及其磷酸化蛋白水平。结果成功构建Ad5-hlL-10-IRES-EGFP；流式细胞仪检测显示TNF—α诱导使HSC凋亡率显著增加，Ad—IL-10干预可使HSC凋亡率下降（P〈0．05）；其凋亡率分别为：空白组0．010±0．001，TNF—α组0．230±0．090，空载组0．210±0．080，IL-10组0．070±0．030。Western blot检测显示，TNF-α诱导后STAT-1磷酸化蛋白水平显著增加，而Ad-IL-10干预可使两者水平下降（P〈0．01）；各组STAT—P／STAT-1吸光度值分别为：空白组0．028±0．006，空载组0．025±0．007，TNF—α组0．261±0．085，空载对照组0．254±0．065，IL-10组0．029±0．009。结论IL—10能抑制TNF—α诱导HSC细胞发生凋亡，其信号途径与STAT-1有关。; 张莉娟黄月红陈治新陈运新郑伟达王小众; 关键词：白细胞介素-10 肿瘤坏死因子-Α 肝星状细胞

腺病毒介导的IL-10基因转染肝星状细胞对TNFα诱导其细胞凋亡及caspase-3表达的影响: 2013年; 目的研究腺病毒介导的IL-10基因(Ad-IL-10)转染肝星状细胞(HSC)对TNFα诱导的细胞凋亡及caspase-3表达的影响,探讨IL-10在HSC凋亡中的作用。方法体外以293细胞包装构建重组腺病毒载体系统Ad5-hIL10-IRES-EGFP。将体外培养的人HSC分为5组:空白对照组、空载组、TNFα(10 ng/mL)组、空载组+TNFα(10 ng/mL)组、Ad-IL-10+TNFα(10 ng/mL)组。荧光显微镜观察IL-10表达量;RT-PCR法测定IL-10 mRNA表达水平;TUNEL法测定HSC细胞的凋亡率;Western blot测定HSC细胞IL-10、caspase-3蛋白水平。结果成功构建Ad5-hIL10-IRES-EGFP;RT-PCR和Western blot检测显示Ad-IL-10转染3 d后HSC表达IL-10 mRNA和蛋白含量均增加,且随MOI增大而表达增强;TUNEL染色显示,TNFα诱导使HSC凋亡率显著增加,Ad-IL-10干预可使HSC凋亡率下降;Western blot检测显示,TNFα诱导后caspase-3蛋白水平显著增加,而Ad-IL-10干预可使caspase-3蛋白水平下降。结论 IL-10能抑制TNFα诱导HSC细胞发生凋亡,其信号途径涉及caspase-3。; 张莉娟黄月红陈治新王小众; 关键词：IL-10 TNFΑ CASPASE-3

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福建省自然科学基金(2010J01165)

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