国家自然科学基金(30760917) 作品数:11 被引量:84 H指数:6 相关作者: 朱家红 张治礼 张全琪 蔡元保 畅文军 更多>> 相关机构: 中国热带农业科学院 海南省农业科学院 海南大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 海南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
乙烯利刺激橡胶树增产及其分子生物学基础 被引量:11 2010年 本文介绍近年来乙烯利刺激橡胶树增产的分子生物学研究进展,讨论乙烯利刺激橡胶树胶乳增产的可能原因,并对这一领域今后研究的发展趋势进行了展望。 朱家红 张全琪 张治礼关键词:橡胶树 乙烯利 蔗糖 巴西橡胶树HbMT2植物表达载体的构建及遗传转化烟草 2013年 将巴西橡胶树金属硫蛋白基因HbMT2插入到植物表达载体pCAMBIA1304,得到HbMT2基因的植物表达载体pCAMBIA1304-HbMT2。通过电击法将该载体导入根癌农杆菌菌株中并转化烟草。将获得的具有潮霉素(Hyg)抗性的再生植株进行PCR鉴定,结果表明目的基因已经整合到烟草基因组中。抗逆性分析试验显示,转基因烟草对H2O2处理和紫外线照射耐受性显著提高;重金属离子胁迫下,转基因烟草叶绿素含量、过氧化物酶和过氧化氢酶活性明显高于对照。 吴瑞 朱家红 梁黔云关键词:巴西橡胶树 金属硫蛋白 巴西橡胶树LIM结构域基因克隆与生物信息学分析 被引量:5 2010年 根据乙烯利刺激巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)胶乳差异表达cDNA文库的EST序列信息,利用RACE技术从胶乳中成功克隆了1个含有LIM结构域的未知功能新基因HbLIM的全长cDNA。生物信息学分析表明,该基因全长cDNA由1016bp的碱基组成,拥有1个570bp的开放阅读框编码189个氨基酸残基;推测氨基酸序列富含Lys,Ser,Ala和Leu,含有2个LIM结构域和2个N-豆蔻酰化位置。序列相似性分析表明,HbLIM编码的氨基酸序列与蓖麻、杨毛、葡萄相应的LIM基因的相似性高达98%,95%和92%。这些研究结果为深入探讨LIM结构域蛋白在巴西橡胶树乳管发育及乳管代谢中的功能奠定了基础。 吴瑞 朱家红 张全琪 张治礼关键词:巴西橡胶树 基因克隆 生物信息学 植物GRAS蛋白结构和功能研究进展 被引量:8 2013年 GRAS蛋白是一类植物特有的蛋白家族,是许多重要生长发育过程中的关键调控蛋白,如赤霉素信号转导、光信号转导、根的发育、根瘤和菌根形成以及分生组织形成等。从蛋白分子结构、分类及生理功能等方面综述了植物GRAS蛋白的最新研究进展,并对未来的研究方向进行了讨论。 畅文军 刘习文 张治礼关键词:GRAS 分子结构 生理功能 信号转导 巴西橡胶树K^+通道蛋白HbKCO1的原核表达 2009年 K+通道蛋白在维持细胞离子平衡等生命活动中发挥重要的作用。利用真核或原核表达系统高效表达K+通道蛋白是深入研究其生化特征及生理功能的基础和前提。该研究在成功克隆巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)K+通道蛋白基因cDNA全长的基础上,将HbKCO1 cDNA编码区插入pET-28a构建原核表达载体pET-28a(+)-HbKCO1,并分别转化大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS和BL21(DE3)菌株。经过条件优化,转化的大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS菌株经1mM IPTG诱导3h能够高效表达HbKCO1重组蛋白,但同等条件下转化的BL21(DE3)菌株仅能微量表达。HbKCO1重组蛋白原核表达具有菌株依赖性。 蔡元保 朱家红 张全琪 张治礼关键词:巴西橡胶树 植物bHLH转录因子的结构特点及其生物学功能 被引量:27 2011年 bHLH(basic/helix-loop-helix)转录因子在真核生物的生长发育过程中起着重要的调控作用,它们组成了转录因子中的一个大家族。bHLH转录因子不仅普遍参与了植物的生长发育,包括毛状体的发生、光形态建成和光信号转导,而且在植物响应逆境胁迫和次生代谢方面也具有重要作用。对植物bHLH转录因子的结构特点及其生物学功能进行综述。 张全琪 朱家红 倪燕妹 张治礼关键词:转录因子 BHLH 巴西橡胶树HbbHLH1启动子的克隆与序列分析 被引量:6 2009年 bHLH转录因子在高等植物生长发育、激素应答和次生代谢调节中具有重要的功能。根据巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)HbbHLH1基因设计了2个特异性反向引物,利用Genome Walking方法从巴西橡胶树叶片基因组DNA中克隆获得了HbbHLH1基因起始密码子上游819bp的调控片段。序列分析表明,该片段除了含有一个典型的真核生物核心启动子区域(-60~-10bp)外,还含有多个TATA-box、CAAT-box等启动子元件以及多种与激素和胁迫诱导相关的顺式调控元件,其中在-290bp和-309bp位点分别有一个应答Me-JA信号反应的调控元件,但没有发现典型的乙烯响应元件。这暗示了HbbHLH1转录因子可能在橡胶树乳管分化和胶乳生物合成中具有调控作用。 张全琪 朱家红 蔡元保 张治礼关键词:巴西橡胶树 顺式调控元件 茉莉酸 乙烯 番茄钙依赖性蛋白激酶基因LeCPK2在热(光)胁迫中的功能鉴定 被引量:10 2011年 钙依赖性蛋白激酶(calcium-dependent protein kinases,CDPKs or CPKs)作为一类钙感知蛋白在植物的生长发育和胁迫应答中起着重要的作用。LeCPK2(GenBank accession No.:GQ205414)是我们从番茄中分离的第3个CDPK基因,前期研究表明LeCPK2可能在植物热胁迫应答中发挥作用。为了进一步研究其在热胁迫中的功能,我们通过电子克隆的方法分离了LeCPK2的启动子序列,并通过LeCPK2过表达烟草分析其在高温胁迫中的潜在的功能。生物信息学分析显示,LeCPK2启动子中包含5个热响应元件,和前期试验结果一致。野生型植株在受到热胁迫后,对光更为敏感,强光照下植株叶片发生萎蔫,而强光本身不会对未受热胁迫的健康植株造成伤害。LeCPK2转基因植株热、光胁迫后不会出现受害表型。以上研究表明,LeCPK2在植物的热胁迫应答中发挥重要作用,能够有效保护植株免受高温胁迫的损害,是一个优秀的耐热(光)基因。本研究将为揭示番茄LeCPK2遗传功能及对其开发利用奠定基础。 畅文军 付桂 陈鑫 朱家红 张治礼关键词:热胁迫 强光 巴西橡胶树HbWRKY1基因的克隆及转化烟草的初步研究 被引量:3 2012年 利用RACE结合RT-PCR技术,从巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)总RNA中扩增得到长度为1234 bp的WRKY基因cDNA全长编码序列。通过氨基酸同源性比对,该序列推导的氨基酸序列与蓖麻、白杨的WRKY同源性分别为79%和73%,表明分离的cDNA序列为橡胶树WRKY基因,命名为HbWRKY1。通过构建pCAMBIA1304-HbWRKY1植物表达载体,经农杆菌GV3101介导,将HbWRKY1基因导入烟草(Nicotiana tabacum)中,对所获得的潮霉素抗性烟草株系进行PCR鉴定。结果表明,HbWRKY1基因已整合到65株转基因植株中。干旱胁迫试验表明,HbWRKY1的过量表达可以明显提高转基因烟草对干旱胁迫的耐受能力。这说明WRKY基因与橡胶树抗旱能力之间存在一定的关系。 张全琪 倪燕妹 朱家红 黄志关键词:巴西橡胶树 基因克隆 烟草 耐旱性 巴西橡胶树液泡ATP酶F亚基基因克隆及表达 被引量:8 2009年 根据筛选文库时获得的EST序列信息,利用RACE技术分离了一个巴西橡胶树ATP酶F亚基基因,命名为HbVHA-F.结果显示,该基因cDNA全长658bp,含有完整的阅读框架,编码130个氨基酸.序列比对及结构预测分析表明,HbVHA-F编码的氨基酸序列与杨树、水稻、黄麻、小麦和香蕉中相应基因氨基酸序列的一致性分别达到88.46%、86.15%、84.62%、83.85%和74.62%,与杨树一致性最高,并与其他高等植物聚为一类.半定量RT-PCR分析显示,割胶(机械伤害)和乙烯利能够诱导HbVHA-F基因的表达.HbVHA-F基因可能通过转录表达调节参与了乙烯利刺激橡胶树增产的分子调控. 朱家红 张全琪 蔡元保 张治礼关键词:巴西橡胶树 V-ATPASE 乙烯利