山西省回国留学人员科研经费资助项目(2011-046)
- 作品数：6 被引量：20H指数：2
- 相关作者：徐菁乔爱秀郗彦凤覃艳红张翠明更多>>
- 相关机构：山西医科大学山西医科大学第二医院山西省肿瘤医院更多>>
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- 长链非编码RNA母系表达基因3对肝内胆管癌RBE细胞耐药性的影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨长链非编码RNA母系表达基因3(MEG3)对肝内胆管癌RBE细胞株耐药性的影响。方法构建MEG3质粒,通过阳离子复合物瞬时转染法,使RBE细胞MEG3过表达,转染48 h后在共聚焦显微镜下观察转染效率;应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测胆管癌RBE细胞株中MEG3的表达情况,同时应用蛋白质印迹法检测转染前后细胞中耐药相关基因ABCG2基因及蛋白表达量的差异;四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定转染质粒48 h后,各个组中加入不同浓度的阿霉素继续培养2 d,测定RBE细胞对阿霉素的药物敏感性。结果吸光共聚焦显微镜下观察质粒可以成功转染RBE细胞;实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法显示,与空白对照组相比,目的质粒组中ABCG2基因及蛋白表达均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),而空载质粒组相比差异无统计学意义(P>0.05);MTT法测得随药物浓度增加,细胞生长抑制率也逐渐升高,而且在浓度0.5 g/L时,目的质粒组细胞对药物敏感性较强,进一步证实MEG3抑制ABCG2基因表达的同时降低了细胞的耐药作用。结论长链非编码RNA MEG3在胆管癌RBE细胞中,可以降低ABCG2基因和蛋白的表达,同时提高了肿瘤细胞对阿霉素的敏感性,对于胆管癌的靶向治疗提供了新的思路和方向。
- 刘妍徐菁乔爱秀覃艳红郗彦凤
- 关键词：肝内胆管细胞癌
- Hedgehog信号通路抑制剂对肝内胆管癌RBE细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:研究Hedgehog(Hh)信号通路特异性抑制剂环杷明(cyclopamine)对人肝内胆管癌细胞株RBE生物学行为的影响。方法:用台盼蓝染色计数法和MTT比色法检测环杷明对RBE细胞增殖的影响;流式细胞术检测凋亡率,Transwell检测环杷明处理前后RBE细胞侵袭能力的变化,Western blot检测环杷明处理前后RBE细胞中Gli1和MMP-9的蛋白表达变化。结果:环杷明对RBE细胞株增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性。环杷明作用细胞24 h、48 h、72 h后,RBE细胞凋亡率逐渐升高,明显高于对照组的凋亡率。Transwell检测对照组穿透细胞数为154.52±13.61,而实验组穿透数为62.00±12.17,侵袭能力明显下降(P<0.01)。Gli1和MMP-9蛋白均在RBE细胞中表达,环杷明下调RBE细胞的Gli1和MMP-9表达。结论:阻断Hh信号通路能抑制RBE细胞的增殖,促进其凋亡,并抑制其侵袭能力。
- 张杨徐菁张翠明张玲乔爱秀
- 混合型肝癌伴干细胞特征（细胆管癌型）26例临床病理学观察被引量：10
- 2016年
- 目的探讨混合型肝癌伴干细胞特征（细胆管癌型）的临床病理特征及其与肝脏祖细胞（HPC）的关系。
方法收集26例混合型肝癌伴干细胞特征（细胆管癌型）病例的临床资料，通过光镜、黏液组织化学染色及免疫组织化学EnVision法分析其临床病理学特征，进一步探讨其与HPC之间的关系。
结果26例混合型肝癌伴干细胞特征（细胆管癌型）患者年龄51～82岁，中位年龄64岁。所有肿瘤标本均包括细胆管癌和肝细胞癌结构，其中细胆管癌比例占大部分，其特征为肿瘤腺体呈狭小的腔隙状或＂鹿角样＂排列，彼此之间吻合，纤维间质丰富；在肿瘤的边缘可见小梁样结构的肝细胞癌，这些癌细胞的异型性较小，嗜酸性胞质丰富。21例（80.8%）具有典型的肝内胆管癌结构，肿瘤细胞排列成明显的腺腔结构，纤维间质丰富，伴有黏液产生。细胆管癌、肝细胞癌样梁索状结构、肝内胆管癌在肿瘤中共存，三种组织结构之间彼此移行过渡。肿瘤周围肝组织均有慢性肝病背景，并可见反应性增生的胆小管。免疫组织化学结果显示细胆管癌区域中胆管上皮/HPC标志物（CK7、CK9、上皮细胞膜抗原、上皮细胞黏附分子、神经细胞黏附分子、CKIT）几乎均为阳性，与反应性增生的胆小管相似；肝细胞癌样肿瘤区域，CK7和CK19均表达上皮细胞膜抗原和上皮细胞黏附分子，其阳性率分别为80.8%（21/26）和88.5%（23/26），甲胎蛋白和Hep Par－1阳性率分别为46.2%（12/26）和53.8%（14/26），神经细胞黏附分子和CKIT的阳性率分别为84.6%（22/26）和88.5%（23/26），表现出中间状态肝细胞的特点。在肝内胆管癌区域，肿瘤细胞CK7、CK19、上皮细胞膜抗原和上皮细胞黏附分子均呈弥漫强阳性，神经细胞黏附分子、CKIT、Hep Par－1和甲胎蛋白均为阴性。
结论混合型肝癌伴干细胞特征（细胆管癌型）
- 徐菁张翠明乔爱秀郗彦凤
- 关键词：胆管肿瘤肝细胞
- 人肝内胆管癌细胞株RBE的基因表达被引量：2
- 2015年
- 目的 通过比较肝内胆管细胞癌RBE细胞株中NCAM＋ c-Kit＋与NCAM-c-Kit-的全基因组表达差异,筛选出与干细胞信号通路相关的差异基因,进一步揭示肝内胆管癌发生、发展的内在分子机制.方法 培养RBE细胞株,用免疫磁珠分选出NCAM＋ c-Kit＋ RBE与NCAM-c-Kit-RBE亚群,采用Agilent人全基因组表达谱芯片对NCAM＋ c-Kit＋ RBE与NCAM-c-Kit-RBE进行检测.通过SAS系统分析,得到两者干细胞信号通路的差异表达基因,进一步采用实时-PCR技术验证芯片结果.结果 芯片筛选出NCAM＋ c-Kit＋ RBE与NCAM-c-Kit-RBE亚群之间的差异基因共7270条[变化倍数（fc）≥2或fc≤0.5].与NCAM-c-Kit-RBE相比,NCAM＋ c-Kit＋ RBE上调基因3572条,下调基因3698条.其中干细胞信号通路相关差异基因共421条（fc≥2或fc≤0.5）,上调基因231条,下调基因190条.结论 高通量芯片能够筛选出NCAM＋ c-Kit＋ RBE与NCAM-c-Kit-RBE大量的差异基因.SAS分析系统能进一步分析与干细胞信号通路相关的差异基因.
- 王婕徐菁贺杰峰李灵敏覃艳红陈秀花贺艳玲
- 关键词：肝内胆管癌基因芯片
- NCAM＋c—Kit＋胆管癌细胞的肝脏祖细胞特性研究被引量：4
- 2013年
- 目的检测肝内胆管癌细胞系RBE中神经细胞黏附分子和干细胞因子受体阳性（NCAM＋c—Kit＋）细胞亚群的肝脏祖细胞特性。方法采用免疫磁珠法筛选NCAM＋c—Kit＋和NCAMc-KitRBE亚群，通过体外培养和体内移植实验检测NCAM＋c-Kit＋RBE细胞是否具有肝脏祖细胞特性（体外增殖、克隆形成及体内成瘤能力）。结果NCAM＋c—Kit＋RBE亚群体外增殖能力高于NCAMc—Kit-亚群（F亚群＝23．56，P〈O．01）。两亚群细胞无血清培养基培养5d后成球率分别为39．1％、7．5％，差异有统计学意义（X2=18．51，P〈O．01）。裸鼠移植瘤实验中，1×104个NCAM＋c—Kit＋细胞接种2周即可成瘤（66．7％），相同条件下NCAM—c—Kit-细胞需要1×106接种3周方可成瘤（16．7％），成瘤率差异有统计学意义（P= 0．04）。结论NCAM＋c—Kit＋RBE细胞具有肝脏祖细胞特性。NCAM联合c—Kit可作为分离、纯化胆管癌干／祖细胞的标志物。
- 贺艳玲徐菁杨丽红李灵敏覃艳红陈秀花徐智芳
- 关键词：胆管肿瘤肿瘤移植
- 肝细胞癌组织中MEG3基因启动子甲基化状态及其临床意义被引量：1
- 2018年
- 目的探讨肝细胞癌组织中MEG3基因启动子的甲基化水平及其临床意义。方法利用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP），检测2014年12月至2016年12月山西省肿瘤医院58例肝细胞癌及20例正常肝脏石蜡包埋组织中MEG3基因启动子的甲基化水平，并分析甲基化状态与患者临床病理特征间的关系。结果肝细胞癌组织中MEG3基因启动子甲基化发生率为55.2%（32/58），高于正常肝脏组织中的25.0%（5/20），两者差异有统计学意义（χ^2=6.72，P=0.02）。不同年龄、性别、甲胎蛋白水平、肿瘤数量和分化程度患者的MEG3基因启动子甲基化发生率比较，差异均无统计学意义（均P〉0.05）；不同肿瘤直径、是否肝硬化、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）是否阳性、不同TNM分期和有无远处转移患者的MEG3基因启动子甲基化发生率比较，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论MEG3基因启动子异常甲基化可能与肝细胞癌的发生相关，且与肿瘤直径、肝硬化、HBsAg、TNM分期和远处转移有关。
- 杨薇郗彦凤高宁徐菁
- 关键词：长链非编码RNA甲基化
