广东省科技计划工业攻关项目(2004B50301007)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：江丽芳方丹云周经姣黄骥斌韩艳平更多>>
- 相关机构：中山大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 登革病毒流行株的分离鉴定及其毒力位点变异研究被引量：6
- 2006年
- 目的：从登革热患者血清中分离登革病毒，鉴定流行株的血清型及其毒力。对其中两分离株E基因进行序列测定，分析其可能的毒力位点变异。方法：采集临床诊断为登革热患者急性期血清91份，接种于C6／36细胞分离病毒，应用间接免疫荧光法鉴定及分型。并通过乳鼠脑内接种和空斑试验，测定分离株的毒力。扩增2株分离株E基因，克隆到pGEM-T载体进行序列测定，分析变异位点。结果：在91份血清中经2-3次传代分离出8株病毒，鉴定为登革1型病毒。在E蛋白影响毒力的3个区段中，两分离株有3处存在变异。结论：推测此次广州地区流行登革热可能由DEN1型病毒感染引起，流行株的毒力较弱。毒力减弱可能和其基因位点变异有关。
- 方丹云周经姣黄骥斌韩艳平江丽芳
- 关键词：登革病毒免疫荧光毒力
- 登革1型病毒广州分离株全长E基因序列测定与分析被引量：1
- 2007年
- 目的对两株登革1型病毒广州分离株(DV1-GZ01/03、DV1-GZ02/03)E基因进行序列测定及分析,了解此次分离的登革病毒流行株的可能来源及其生物学特性。方法应用RT-PCR扩增两分离株E基因,克隆到pGEM-T载体进行序列测定,应用计算机软件与国内外参考株及流行株进行同源性分析,绘制系统进化树。并作毒株感染细胞及乳鼠毒力试验。结果两分离株全长E基因为1 485 bp,与登革1型Austria/83株的同源性最高,核苷酸同源性均达96.6%,氨基酸同源性分别达97.4%、97.8%;与登革1型GD23/95株次之。构建的系统进化树将19株登革1型病毒分为3个基因群。两分离株与Austria/83、GD23/95同属于基因型Ⅳ型,在同一进化分支内。两分离株颅内接种乳鼠均发病,但发病时间较晚。结论DV1-GZ01/03、DV1GZ02/03属于基因型Ⅳ型,与广东1995年流行株关系密切。乳鼠的神经毒性较弱可能与其基因变异有关。
- 周经姣方丹云晏辉钧黄骥斌江丽芳
- 关键词：登革病毒E基因系统进化树毒力
- 广州4株登革1型病毒E基因的全序列测定和分子进化分析被引量：3
- 2008年
- 目的通过对广州市不同年份分离的4株登革1型病毒（DEN-1）蛋白E基因进行全序列测定及分子进化分析，了解各流行株之间的遗传差异及进化关系，追踪其可能的传染来源。方法应用RT-PCR技术分别扩增各株病毒的蛋白E基因，克隆到pGEM-TEasy载体，转化DH5α宿主菌，经PCR和酶切鉴定后进行序列测定。测序结果与国内外流行株进行同源性比较和毒力位点分析，并绘制基因系统发生树。结果4株DEN-1病毒E基因序列长度均为1485bp，编码495个氨基酸，核苷酸序列同源性为91％～98％，推导的氨基酸序列同源性为96．0％～99．2％。广州1995年流行的DEN-1和2002、2004、2006年流行株的毒力位点氨基酸存在差异。结论通过对登革1型病毒E基因的进化分析，GZ01／95、GZ01／02和GZ01／04这3株同属于基因型Ⅳ，而GZ17／06属于基因型Ⅰ。1995年广州地区流行的DEN-1可能来源于印度尼西亚，而2002和2004年的流行可能与澳大利亚流行株有关。2006年广州又出现的DEN-1可能与泰国2002年的流行株输入有关。
- 刘晓丽周俊梅梁瑜陶剑平方丹云周经姣江丽芳
- 关键词：登革病毒E基因分子进化
