国家自然科学基金(31070861)
- 作品数:5 被引量:20H指数:3
- 相关作者:徐燕金成哲王黎明唐成魏波更多>>
- 相关机构:南京医科大学东南大学南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 自体骨髓间质干细胞外基质支架在体外软骨组织工程中的应用被引量:4
- 2013年
- 目的探讨利用自体骨髓间质干细胞外基质(autologous bone marrow mesenchymal stemcell-derived extracellular matrix,aBMSC-dECM)支架体外制备组织工程软骨的可行性。方法取2周龄新西兰大白兔5只,分离、培养骨髓间质干细胞,原代培养4周,收集其分泌的细胞外基质,制备aBMSC-dECM支架。对支架行扫描电镜和HE染色观察。分离培养自体软骨细胞,植人支架内,48h后对细胞一支架复合物行Live-Dead染色。分别于种植后1、2、4和6周对细胞一支架复合物(组织工程软骨)进行大体观察、体积测量、HE染色、Safranin-0染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色、Real-TimePCR检测和抗压强度测试。
- 唐成徐燕王黎明苗登顺裴璇魏波杜小涛金成哲
- 关键词:间质干细胞软骨体外研究
- BMSCs来源细胞外基质支架对微骨折骨髓刺激术后血凝块体外软骨化分化的作用研究被引量:9
- 2013年
- 目的探讨BMSCs来源细胞外基质(extracellular matrix,ECM)支架结合微骨折骨髓刺激术后血凝块在体外软骨化分化的可行性及有效性。方法选用5~6月龄新西兰大白兔40只,随机取20只兔骨髓分离、培养BMSCs并行多向分化鉴定;利用冻干技术制备BMSCs来源的ECM支架,通过扫描电镜观察其微结构。于兔股骨滑车处作直径6 mm软骨缺损,垂直缺损面作5个直径1 mm、深3 mm的微骨折孔洞。将未穿刺的20只动物随机分为2组(n=10):A组取微骨折术后渗出的血凝块直接体外培养;B组在A组基础上用TGF-β3诱导其成软骨分化。将抽取骨髓的20只动物随机分为2组(n=10):C组用制备的ECM支架植入软骨缺损处,待ECM支架与渗出的骨髓血充分融合后取出体外直接培养;D组在C组基础上给于TGF-β3诱导其成软骨分化。体外培养1、2、4、8周时分别行大体、组织学、免疫组织化学及生化成分分析观察,检测其分化效果。结果分离、培养的细胞经多向分化鉴定,呈成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞的表型特征。扫描电镜观察示ECM支架呈三维多孔状结构。在培养过程中,A组组织块逐渐降解消失;C组组织块逐渐形成质地柔软的疏松样结构;B、D组组织块逐渐形成表面平滑的新生软骨样组织。体外培养4、8周,C、D组组织块面积均大于B组,差异有统计学意义(P<0.05);D组大于C组,差异亦有统计学意义(P<0.05)。A、C组HE、番红O及免疫组织化学染色示组织内仅有少量细胞分布,未见糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)及Ⅱ型胶原的积累;B、D组可见组织内出现许多软骨陷窝样结构,且GAG及Ⅱ型胶原分布逐渐增多。生化成分分析示,培养过程中,B、D组GAG及总胶原含量逐渐增加,其中D组增加更明显,培养至4、8周,D组与B组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BMSCs来源的ECM支架结合微骨折骨髓刺激术后血凝块在体外给予TGF-β3诱导培养时具有良好的软�
- 魏波金成哲徐燕唐成胡文浩王黎明
- 关键词:BMSCS细胞外基质血凝块
- 新型BMSC外基质支架的制备及性状研究被引量:1
- 2014年
- 目的利用BMSC细胞外基质(extracellular matrix,ECM)制备新型可塑形生物支架材料,探讨其应用于关节软骨组织工程的可行性。方法取新西兰幼兔骨髓分离培养获得第2或3代BMSC,高密度培养后收集ECM,采用冷冻干燥技术制备ECM三维多孔状支架。采用组织学、免疫组织化学、扫描电镜、孔隙率、吸水率及生物力学测定等方法对材料进行物理化学性能观察。取第3代成年新西兰兔膝关节软骨细胞,以5.0×10^4个/ml分别与达尔伯克改良伊格尔培养液(Dulbecco’s modified Eagle’s medium,DMEM)(对照组)及体积分数50%(实验Ⅰ组)、体积分数100%(实验Ⅱ组)的材料浸提液进行培养,于培养后1,3,5,7d采用MTT法测定吸光度(A)值并分析其对细胞的毒性。结果制备的ECM支架呈白色、银白色、象牙色的三维多孔状。HE染色及扫描电镜示支架呈交联的多孔状结构,支架内孔洞相互连通,孔径为100—400μm,孔隙率为(91.50±2.84)%,吸水率为(2014±224)%,压缩强度为(6.8±1.5)kPa;MTT检测软骨细胞在各组均生长良好,A值随时间延长而增大,同组各时相点比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论BMSC来源的ECM支架是一种新型三维多孔状支架,无须进行脱细胞处理,且安全无毒,具备合适的孔径和孔隙率,细胞相容性良好,是软骨组织工程良好的支架载体之一。
- 徐燕金成哲唐成魏波裴璇许光跃桂鉴超王黎明
- 关键词:间质干细胞生物相容性材料软骨组织工程
- 空心钉三角放射状内固定治疗股骨颈头下型骨折被引量:7
- 2014年
- 目的探讨空心钉三角放射状内固定在股骨颈头下型骨折治疗中应用的疗效。方法回顾性分析自2008-03—2012-03采用闭合复位空心钉三角放射状内固定治疗的18例股骨颈头下型骨折的临床资料。在C型臂X线机透视下证实复位满意后采用钛金属空心钉三角放射状内固定,螺钉头部接近于股骨头皮质下。结果 18例均获随访1~5年,平均3年。15例术后5~8个月获得骨性愈合,2例在8~10个月骨性愈合,1例在骨折愈合后1年又出现股骨头缺血坏死。末次随访时疗效按髋关节功能Harris评分评定:优11例,良5例,可1例,差1例,优良率88.9%。结论闭合复位空心钉三角放射状内固定治疗股骨颈头下型骨折具有牢固的稳定支撑、松动塌陷少、骨折愈合率高等优点。
- 姚京东徐燕金成哲蒋逸秋潘竹
- 关键词:股骨颈头下型骨折空心钉内固定
- 核素显像在骨与关节炎症疾病诊断中的机制及其临床应用
- 2011年
- 骨与关节炎性疾病对每位骨科医师都极具挑战,患者也必须承受巨大的痛苦和高昂的医疗费用。目前临床上有多种影像技术可用于骨与关节炎症疾病诊断,如CT、MRI和超声显像均可获得局部较为精确的解剖结构信息,但因为病灶处于炎症早期而缺乏显著的形态学改变,故很难发现某些早期炎症病灶;核素显像结果则主要受脏器或组织的血供情况、局部细胞数目、代谢活性和排泄引流等诸多因素影响,因而被认为是一种功能性影像技术,虽不能直接显示炎症的存在。
- 唐成王黎明
- 关键词:多骨疽核素显像标记化合物椎间盘炎炎症病变