国家高技术研究发展计划(2012AA020204) 作品数:12 被引量:61 H指数:5 相关作者: 徐骁 郑树森 刘银坤 张舒 王全会 更多>> 相关机构: 中华医学会 中国医师协会 军事医学科学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 更多>>
多重反应监测(MRM):靶标蛋白质定量的新方法 被引量:7 2014年 多重反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)是针对靶标分子的一种质谱分析技术.该技术采用三重四级杆质谱仪,检测靶标分子的母离子和子离子的质谱响应信号,从而获取较灵敏和高重现性的定性和定量信息,近年来在蛋白质组学领域得到了广泛应用.与全谱性的蛋白质组学分析不同,MRM注重有限目标的蛋白质定量测定,因此,它在蛋白质分析检测领域中的应用极有发展潜力.在临床检验中,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)是蛋白质定量分析的常规技术,但是ELISA在多重蛋白质生物标志物的测定方面具有一定限制.随着蛋白质组学的深入进行,MRM的定量分析优势可否应用于临床检测已提至日程,世界范围内多个研究团队一直致力于推动这一领域的发展,也取得了令人瞩目的成就.本文简单介绍了MRM技术的原理、优势及发展前景等,同时,对其在蛋白质组学研究及临床应用中的潜力进行了讨论. 侯桂雪 王全会 刘斯奇关键词:酶联免疫吸附测定 改良的蛋白质电泳考马斯亮蓝染色方法研究 被引量:10 2014年 旨在建立简便、经济、灵敏以及质谱兼容的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳染色法,在胶体考染(Blue Silver)配方(0.12%的考马斯亮蓝G-250,10%的磷酸,10%的硫酸铵,和20%的甲醇)的基础上,通过优化凝胶固定时间与染色液中各物质用量,得到改良的染色液配方(0.1%的考马斯亮蓝G-250或R-250,5%的磷酸,5%的硫酸铵,10%的甲醇)及简便的操作步骤。试验对比结果显示,改良方法一与胶体考染相比仍保持了较高的染色灵敏度以及较好的质谱兼容性,且有机试剂使用量更少,染色深度与蛋白质量的线性关系也更好。 饶维桥 肖伟敏 张继远 饶媛 訾金关键词:考马斯亮蓝 灵敏度 不同转移潜能人肝癌细胞系中GP73糖基化修饰水平比较 2014年 利用抗体亲和层析纯化不同转移潜能人肝癌细胞系中的高尔基体蛋白73(GP73),比较不同转移潜能人肝癌细胞系中GP73糖基化修饰水平,为GP73成为肝癌标志物提供依据。纯化的GP73通过质谱鉴定后,分别进行蛋白印迹(western blot)和凝集素印迹(lectin blot)分析,比较其在不同转移潜能肝癌细胞系的糖基化修饰水平。实验发现,GP73含有伴刀豆凝集素(ConA)、橙黄网胞盘菌凝集素(AAL)、小扁豆凝集素(LCA)和红腰果E型凝集素(PHA-E)识别的糖型,且单位GP73的LCA、PHA-E识别的岩藻糖和平分型糖型含量在肝癌细胞Huh7、MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3中有升高趋势。研究表明,单位GP73岩藻糖和平分型聚糖结构随肝癌细胞的转移潜能升高而增多。 张舒 江凯 茅晓意 刘银坤关键词:糖基化 人肝癌细胞系 GP73 凝集素 聚糖 肝活素酶联免疫吸附分析方法的建立及应用 被引量:2 2015年 目的 建立肝活素(Hepassocin)酶联免疫吸附分析方法(ELISA)。方法 使用两株抗体,一株包被微孔板,另外一株用HRP标记。显色系统使用TMB显色。结果 测定范围在20~1000ng/mL,最低检测限在10ng/mL,回收率在93.9%~103.1%之间,批内和批间变异为9.7%和7.8%,正常参考值为〈20ng/mL。结论 用1000份临床样本考核本试剂盒,与参比试剂盒有很好的临床符合性,与参比试剂盒具有同等的临床使用价值。 赵京超 葛长辉 于淼 李长燕 李华柏 孙立凤 杨晓明关键词:酶联免疫吸附分析 中国肝移植受者代谢病管理专家共识(2015版) 被引量:4 2015年 肝移植受者是罹患代谢病的高危人群。肝移植术后代谢病的发生与免疫抑制刑、心血管疾病、肾病、感染等关系密切,在很大程度上影响受者的长期生存。本共识旨在为中国肝移植受者术后代谢病的防治提供建议,以期改善受者的长期生存。代谢病以肥胖症、糖尿病、高血压病、高脂血症为典型特征。代谢病的防治应以改变饮食习惯和生活方式为基础,调整免疫抑制方案,并适当使用药物治疗。建议在保证移植肝功能的前提下将可能导致代谢病的免疫抑制剂减量。含霉酚酸酯的无激素及钙调神经磷酸酶抑制刑最小化方案对减少肝移植术后代谢病的发生有益。 无关键词:肝移植 代谢病 高血压病 免疫抑制剂 中国肝移植受者代谢病管理专家共识(2015版) 被引量:5 2015年 肝移植受者是罹患代谢病的高危人群。肝移植术后代谢病的发生与免疫抑制剂、心血管疾病、肾病、感染等关系密切,在很大程度上影响受者的长期生存。中国医师协会器官移植医师分会、中华医学会外科学分会器官移植学组、中华医学会器官移植学分会肝移植学组组织专家制订了《中国肝移植受者代谢病管理专家共识(2015版)》,旨在为中国肝移植受者术后代谢病的防治提供建议,以期改善受者的长期生存。代谢病以肥胖症、糖尿病、高血压病、高脂血症为典型特征。代谢病的防治应以改变饮食习惯和生活方式为基础,调整免疫抑制方案,并适当使用药物治疗。建议在保证移植肝功能的前提下将相关可能导致代谓十病的免疫抑制剂减量,含霉酚酸酯的无激素及钙凋神经磷酸酶抑制剂最小化方案对减少肝移植术后代谢病的发生有益。 无关键词:肝移植 代谢病 高血压病 免疫抑制剂 肝病发生发展与肝癌转移复发的蛋白质分子标志物的临床应用研究 2015年 本课题研究的总体任务是系统研究肝病发生发展及肝癌转移复发过程中的蛋白质组表达变化,发现、验证和向临床转化一批蛋白质/多肽分子标志物;并开展基于不同分子分型的肝癌新型分子靶向治疗的应用基础研究。主要任务包括:建立肝炎、肝硬化、肝癌及复发转移的肝病全程特征性样本库;筛选验证肝病发生发展相关蛋白质/多肽分子标志物;拓展肝癌肝移植杭州标准,建立肝癌肝移植受者选择与评估的分子标准;开展基于肿瘤生物学特征的肝癌分子分型研究和分子靶向治疗应用基础研究;完成具有临床应用潜力的肝病发生发展和肝癌复发转移相关的蛋白检测/诊断试剂盒的临床前评价及申报。关键词:分子标志物 蛋白质组 肝癌 肝病 复发 生发 中国心脏死亡捐献器官评估与应用专家共识(2014版) 被引量:10 2015年 自2010年原卫生部启动人体器官捐献工作以来,经过各界努力,目前人体器官捐献尤其是心脏死亡器官捐献( donation after cardiac death, DCD),在全国范围内已得到广泛开展。亟待制订相关专家共识来指导全国DCD器官的质量评估,推动其在临床上更规范、有效、安全地应用。中华医学会器官移植学分会、中华医学会外科学分会移植学组及中国医师协会器官移植医师分会组织专家制订了《中国心脏死亡捐献器官评估与应用专家共识(2014版)》,重点阐述了中国DCD与心脏死亡诊断标准、器官获取、DCD器官在肝移植和肾移植中的评估和应用以及移植受者围术期的特殊干预。关键词:心脏死亡 器官捐献 器官移植 肝移植 肾移植 中国肝移植受者代谢病管理专家共识(2015版) 被引量:4 2015年 肝移植受者是罹患代谢病的高危人群。肝移植术后代谢病的发生与免疫抑制剂、心血管疾病、肾病、感染等关系密切,在很大程度上影响受者的长期存活。中国医师协会器官移植医师分会、中华医学会外科学分会器官移植学组、中华医学会器官移植学分会肝移植学组组织专家制定了《中国肝移植受者代谢病管理专家共识(2015版)》,旨在为中国肝移植受者术后代谢病的防治提供建议,以期改善受者的长期生存。代谢病以肥胖症、糖尿病、高血压病、高脂血症为典型特征。代谢病的防治应以改变饮食习惯和生活方式为基础,调整免疫抑制方案,并适当使用药物治疗。建议在保证移植肝功能的前提下将相关可能导致代谢病的免疫抑制剂减量,含霉酚酸酯的无激素及钙调神经磷酸酶抑制剂最小化方案对减少肝移植术后代谢病的发生有益。 郑树森 徐骁 沈恬 汪恺 庄莉 王卓轶 高峰关键词:肝移植 代谢病 高血压病 免疫抑制剂 常见拷贝数变异与疾病的关联研究 被引量:2 2016年 基因组多态性主要包括单核苷酸变异(single nucleotide variation,SNV)、易位、插入以及拷贝数变异(copy number variation,CNV)等形式,其中CNV是结构变异的一种形式。人们按照CNV在人群中的发生频率将其分为常见CNV和罕见CNV。常见CNV已经逐渐成为疾病关联研究新的遗传标记。多项研究已经证明CNV与疾病的发生风险密切相关,例如神经发育类疾病、病毒感染疾病、慢性炎症性疾病和肿瘤等。随着高分辨率基因组分型芯片技术和全基因组测序技术的发展,人类基因组的CNV图谱逐渐被完善和细化。对于CNV的深入研究不仅有助于对人类基因组结构变异和遗传进化的进一步理解,还将使人们对个体间的遗传差异以及影响疾病的遗传因素产生新的认识。同时科技的进步也促使了CNV研究方法的多样化以及CNV相关疾病研究种类的多样化。本文就CNV的特点、作用机制、检测方法以及常见CNV与人类疾病发生的关联研究进行综述。 杨菲 曹鹏博 周钢桥关键词:疾病