广东省科技计划工业攻关项目(2009B020301003) 作品数:4 被引量:6 H指数:2 相关作者: 李玲 吕旻 周文灵 胡小祥 吴璇 更多>> 相关机构: 华南师范大学 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
重组毕赤酵母体系生成PlUGT1蛋白适宜条件研究 被引量:2 2011年 通过单因素试验研究pH和温度对重组毕赤酵母GS115/pPIZαA-P lUGT1生长以及甲醇体积分数、pH和温度对诱导表达P lUGT1蛋白的影响.结果表明,pH6.5和30℃是培养重组毕赤酵母GS115/pPIZαA-P lUGT1最佳的生长条件,重组毕赤酵母GS115/pPIZαA-P lUGT1诱导表达蛋白的适宜条件为甲醇体积分数0.5%、30℃和pH5.0,该条件下培养72 h,培养液中的蛋白质量浓度为0.721 mg/mL. 胡小祥 吕旻 周文灵 李玲关键词:重组毕赤酵母 葛根糖基转移酶蛋白肽段序列的分离与鉴定 被引量:3 2011年 目的:分离鉴定葛根糖基转移酶蛋白肽段序列。方法:从野葛根部提取糖基转移酶,分离后对符合糖基转移酶分子量大小的5条蛋白条带进行酶解,经过高效液相色谱分离纯化后,电喷离子化质谱测定获得蛋白。结果:共获得440蛋白,发现有明确功能的蛋白有325个;具有催化活性的蛋白质有247个。根据报道的糖基转移酶分子量和等电点分布的特点,筛选出6个可能为糖基转移酶的蛋白。结论:初步推测葛根糖基转移酶的蛋白肽段序列,为其在葛根素生物合成中的作用研究奠定基础。 刘吉升 吴璇 吕旻 苏良辰 周文灵 李玲关键词:野葛 糖基转移酶 生物信息学 野葛葡糖基转移酶PlUGTs的同源建模及其活性位点分析 被引量:2 2013年 本文对PIUGTs进行同源建模,并分析其与底物结合的构象及活性位点。通过SWISS-MODEL在线对PlUGTs进行模板预测和选择,运用Swiss-PdbViewer软件显示和优化,利用ACDLABS绘制糖基供体小分子(酶结合底物),最后通过AutoDock_ADT进行分子对接,并分析PlUGTs酶与不同底物结合的整体构象及分析活性位点。研究结果表明PlUGT1、PlUGT2及PlUGT3均能得到较好的三级构象,并且PlUGT1、PlUGT2与三种底物均可进行较好对接,H18,R278,N359为PlUGT1与三种对接构象活性中心所共有的氨基残基;而G16,H17,V19,T148,N370,E374,E390为PlUGT2与三种对接构象活性中心所共有的氨基残基,但PlUGT3未能得到较好的对接构象。由此推测PlUGT1和PlUGT2均能合成葛根素,而PlUGT3不能催化葛根素的合成。 郑敏婧 李晓云 李玲关键词:同源建模 分子对接 野葛糖基转移酶PIUGT2蛋白原核表达及其适宜条件探讨 被引量:1 2012年 通过单因素试验分别研究温度和IPTG浓度对重组大肠杆菌BL21(DE3)/pProEXHTa-PIUGT2诱导表达野葛糖基转移酶PlUGT2蛋白量的影响。利用150 ml LB液体培养基培养重组大肠杆菌BL21(DE3),并优化发酵条件。结果表明,在温度20℃和IPTG浓度为0.75 mmol/L条件下,PIUGT2蛋白表达量最高。 李健湄 吕旻 胡小祥 李玲关键词:原核表达 温度