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上海市教育发展基金会“曙光计划”项目(B2002186)
上海市教育发展基金会“曙光计划”项目(B2002186)
- 作品数:2 被引量:8H指数:2
- 相关作者:陆承平严亚贤孙建和更多>>
- 相关机构:上海交通大学南京农业大学更多>>
- 发文基金:上海市教育发展基金会“曙光计划”项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 大肠杆菌vpr基因突变株的蛋白表达及功能研究被引量:3
- 2006年
- 目的进一步确定vpr基因及相关蛋白的功能。方法在获得vpr同源基因突变株MC1061△vpr的基础上,构建了vpr基因突变株的回复株MC1061-C,并进行了噬菌体裂解试验、细胞壁吸附试验、蛋白表达和印迹试验。结果亲本株MC1061和回复株MC1061-C对VT2噬菌体C43b的裂解敏感,突变株MC1061△vpr抵抗噬菌体C43d的裂解。噬菌体吸附细胞壁试验中,吸附30min后,亲本株和回复株的上清液中分别存在6.4%和5.2%的游离噬菌体,吸附到90min时未有大量的游离噬菌体释放。噬菌体与突变株的细胞壁吸附30min后,上清液中有85.4%的游离噬菌体存在,表明VT2噬菌体能与亲本MC1061和回复株MC1061-C的细胞壁不可逆吸附,但不能与突变株MC1061△vpr的细胞壁发生不可逆吸附。在蛋白表达中,Westernblot显示回复株和亲本株均能转印出特异性90000蛋白主带,而突变株没有。结论vpr基因表达的分子量为90000的Vpr蛋白与VT2噬菌体的裂解敏感性有关,可能是VT2噬菌体的裂解受体。
- 孙建和严亚贤陆承平
- 关键词:敏感性WESTERNBLOT受体
- 大肠杆菌VT2噬菌体的分离与溶源转染被引量:5
- 2004年
- 本试验利用指示菌MC1061,经双层琼脂法纯化和PCR扩增vt2基因,分别从大肠杆菌O157菌株、牛粪、鸡粪和污水中分离获得5株含vt2基因的噬菌体。这些噬菌斑透明,直径为0.5-2mm,对指示菌的感染效价均在109PFU/mL以上,抵抗氯仿和56℃30min的作用。将噬菌体分离株SHφW1感染MC1061后,经PCR鉴定获得一株溶源菌株(MC1061/SHφW1)。溶源株的LB培养滤液对Vero细胞产生了显著的病变效应,而MC1061在同等条件下培养的滤液无细胞病变,表明VT2噬菌体通过溶源将vt2毒力基因水平转移,证实了VT2噬菌体的转染与细菌毒力相关。
- 严亚贤陆承平
- 关键词:大肠杆菌噬菌体细胞病变转染