四川省应用基础研究计划项目(2008JY0069) 作品数:5 被引量:39 H指数:3 相关作者: 罗薇 刘内生 刘群 杨晓农 裴超信 更多>> 相关机构: 西南民族大学 四川省畜牧科学研究院 四川省动物疫病预防控制中心 更多>> 发文基金: 四川省应用基础研究计划项目 国家自然科技资源平台项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
鸭甲肝病毒鸡胚化弱毒MY株Vp1重组蛋白的免疫保护效果试验 2012年 将鸭甲肝病毒鸡胚化弱毒MY株Vp1基因原核表达工程菌(pET32a+Vp1,BL21(DE3)PlysS)对基因Vp1进行大量表达和纯化,得到鸭甲肝弱毒MY株Vp1重组蛋白作为抗原制备亚单位疫苗,免疫雏鸭,用间接ELISA检测方法对免疫后抗体生成水平进行监测,并通过动物攻毒试验评价免疫保护效果。结果显示:Vp1重组蛋白免疫家兔后血清检测琼扩效价≥1∶64,细胞中和试验效价为1/45;雏鸭免疫后抗体生成水平呈明显上升趋势,对攻毒起到了保护作用。首次揭示了DHAV-1结构蛋白Vp1刺激机体产生抗体使雏鸭获得保护的能力。 路娇 罗薇 刘内生 刘群关键词:鸭肝炎 免疫保护 Ⅰ型鸭肝炎病毒鸡胚致弱毒MY株的培育及实验研究 被引量:3 2010年 将Ⅰ型鸭肝炎分离株XC-1适应鸡胚,培育成1株毒力弱而稳定、免疫原性良好的鸭肝炎鸡胚化MY弱毒株。该毒株毒力为1011.40ELD50/0.1mL,1013.62TCID50/0.1mL;对雏鸭无致病性;在雏鸭体内连续盲传5代未见毒力返强;1日龄雏鸭用8,000 ELD50/0.1mL的MY株致弱毒腿部肌注0.2ml免疫后3d强毒原液0.5mL/只攻击,可产生2/5的保护,第6d-21d产生完全保护,免疫后第3d、5d、6d、7d、9d、14d、21d抗DHVⅠ的中和抗体滴度分别为10-1.38、10-1.55、10-1.64、10-1.65、10-1.68、10-1.8、10-1.89,表明MY是1株理想的鸡胚弱毒疫苗后备株;通过MY株的鸡胚的繁殖规律观察,确定该病毒的最佳收毒时间为接胚后的72h^84h,为疫苗生产条件的建立提供了依据。 罗薇 张金灵 刘内生 裴超信 岳华 杨晓农关键词:免疫原性 鸡源大肠杆菌分离鉴定与药敏试验 被引量:8 2009年 自成都市某养鸡场发生的疑似大肠杆菌病的病死鸡肝脏中无菌采取10份病料,分离鉴定出5株大肠杆菌,经O血清型鉴定,除一株未定型外,共鉴定出4株大肠杆菌的O血清型,分别是O37两株、O84和O100各一株.用18种抗菌药物进行药敏试验,分离菌株耐药性非常严重,以多重耐药为主,最少的耐药10种,最多的耐药17种,其中,对罗美沙星、诺氟沙星、环丙沙星、氨苄西林、阿莫西林、氧氟沙星、恩诺沙星和复方新诺明100%耐药(5/5);对甲氧苄啶、四环素和链霉素80%耐药(4/5);对新霉素、庆大霉素、头孢氨苄、头孢拉定和头孢唑啉60%耐药(3/5);对阿米卡星20%耐药(1/5).结果提示,同一鸡场的发病鸡群存在着多种血清型,耐药谱复杂,且没有一种抗生素对所分离的菌株全部敏感. 魏蕻 朱晓霞 邓一科 杨晓农 罗薇 于学辉关键词:禽致病性大肠杆菌 O血清型 药敏试验 鸭肝炎病毒的研究进展 被引量:27 2011年 鸭肝炎病毒是一种高致死性、高传播性的病毒性传染病病原,临床主要引起急性肝炎,主要侵害3周龄以内的雏鸭,尤以1周龄内的雏鸭为甚,病死率高达100%。20世纪以来,鸭肝炎已成为危害中国养鸭业最为严重的疫病之一,给养鸭业带来了巨大的经济损失。作者对鸭肝炎病毒的发生与分布、病原学、基因组学、诊断与防治等方面进行了综述。 张艳芳 罗薇 刘内生 刘群关键词:鸭肝炎病毒 鸭病毒性肝炎 基因组 Ⅰ型鸭肝炎病毒(MY株)活疫苗毒种的纯粹及生产条件探索 被引量:1 2011年 将Ⅰ型鸭肝炎鸡胚化弱毒MY株进行纯粹检验;以100ELD50 0.2mL/枚(含病毒3.0×10^5个拷贝)剂量经鸡胚尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚,每隔12h观察并采集鸡胚胚体和尿囊液样本,运用自行建立的检测DHV-1的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR方法检测MY株弱毒的鸡胚增殖规律.结果表明,该毒种符合我国的兽用生物制品规程,毒种纯粹;病毒接种后,鸡胚死亡时间主要集中在48-53h;病毒在感染后的12h,24h,36h,48h和53h时段,鸡胚尿囊液中病毒拷贝数为:3.28×10^2、5.28×10^3、7.01×10^3、3.31×10^5和4.42×10^5;鸡胚胚体病毒拷贝数为:8.46×10^3、1.91×10^6、3.41×10^6、1.36×10^7和1.03×10^7;显示,MY株弱毒经鸡胚尿囊腔接种鸡胚,病毒在胚体中的拷贝数在各时间均高于尿囊液中的拷贝数,且在48-53h达到高峰(1.36×10^7-1.03×10^7).因此,用鸡胚繁殖MY株弱毒,应以收获鸡胚胚体为主要毒源,收毒时间以鸡胚尿囊腔接种后48~53h为佳.为运用MY株生产Ⅰ型鸭病毒性肝炎弱毒疫苗奠定了基础. 罗薇 张金灵 夏梦芸 刘内生 裴超信关键词:荧光定量RT-PCR 增殖规律