国家自然科学基金(30400606)
- 作品数：6 被引量：47H指数：2
- 相关作者：何伟樊粤光王海彬徐传毅刘少军更多>>
- 相关机构：广州中医药大学第一附属医院中国科学院广州生物医药与健康研究院厦门大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 骨形态发生蛋白基因真核表达质粒的构建及其在中国仓鼠卵巢细胞中的表达被引量：1
- 2006年
- 【目的】克隆人骨形态发生蛋白(BMP4)基因,构建真核表达质粒,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达,为进一步研究以BMP4进行骨修复的基因治疗奠定基础。【方法】采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,从人的松质骨中扩增BMP4的环形脱氧核糖核酸(cDNA),插入pGEM-Teasy载体,测序证实后,将其亚克隆至质粒PCDNA3.1B(-)中构建BMP4真核表达载体;采用脂质体将重组质粒转染CHO细胞,经G418筛选获得抗性细胞克隆,以RT-PCR和免疫组织化学方法鉴定转染细胞中BMP4基因的表达。【结果】经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒,RT-PCR和免疫组化方法证明转基因CHO细胞克隆中存在人BMP4基因。【结论】成功获得了人BMP4的全长基因,且序列与已知序列高度一致。
- 王海彬刘少军樊粤光何伟刘武徐传毅姜自伟曾意荣
- 关键词：骨形态发生蛋白基因疗法骨疾病
- 骨科相关中药对雌激素受体的激活作用
- 2006年
- 目的构建含有雌激素受体配体结合域的哺乳动物细胞杂交基因报告系统,研究骨科相关中药对雌激素受体(ER)活性的影响。方法PCR扩增雌激素受体配体结合域,将配体结合域克隆到真核表达质粒pCMV-BD构建细胞杂交基因报告系统,研究骨科相关中药与雌激素受体的关系;MTT法检测中药对细胞活力的影响。结果成功构建含有雌激素受体配体结合域的哺乳动物细胞杂交基因报告系统,部分中药可以显著提高细胞活性,并对雌激素受体具有激活作用。结论中药治疗骨质疏松可能通过雌激素受体发挥疗效,细胞杂交基因报告系统可以用来研究中药的作用机理。
- 王海彬王军舰黄辉刘琳刘少军徐传毅何伟樊粤光黄志伟
- 关键词：中药雌激素受体HELA细胞配体结合域
- 利用细胞杂交技术检测强骨胶囊对雌激素受体的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨强骨胶囊对雌激素受体(ER)活性的影响。方法:将含有ERs配体结合域(LBD)的质粒pCMV-BD和pFR-Luci报告基因及内标质粒pFRTlaczeo共转染到Hela细胞中,检测强骨胶囊与雌激素受体的关系;MTT法检测强骨胶囊对细胞活力的影响。结果:低剂量(12.5ng/ml)的强骨胶囊对两种ER均无明显效果,但是高剂量(125ng/ml和1.25μg/ml)可以显著地激活ERs,并可以显著提高细胞活性。结论:强骨胶囊治疗骨质疏松的疗效可能与激活ERs的作用有关。
- 王海彬王军舰徐传毅刘少军何伟樊粤光黄辉
- 关键词：强骨胶囊雌激素受体HELA细胞配体结合域
- 中药治疗大鼠去卵巢骨质疏松症的蛋白质组学分析被引量：10
- 2006年
- 目的:用蛋白质组学的方法对绝经后骨质疏松症和中药作用机理进行研究,有利于临床防治该疾病。方法:建立去卵巢大鼠骨质疏松症模型,设立中药治疗组及假手术对照组,6周后骨质疏松症模型成功,行骨形态学检查,提取骨组织蛋白质样品,双向电泳分离,得到各组骨组织总蛋白质分子解剖图谱,用图像分析软件,分析各组间差异蛋白质点,MADITOF/MS质谱分析,结合蛋白质生物信息库(Matrix science Ltd database),对各蛋白质初步鉴定。结论:鉴定了3个差异蛋白,分别为P1硫氧还蛋白过氧化酶1(Thioredoxin peroxidase 1),P2为阻凝蛋白轻链肽2(Myosin light polypeptide 2),P3为泛素化酶E2-17KD(ubiquitin-conjugating enzyme E2-17kD)。初步认为这三种蛋白质在绝经后骨质疏松症的发病及中药治疗过程中发挥着重要调控作用。
- 王海彬刘建仁樊粤光熊莉华谢裕华何伟彭宣宪王三英
- 关键词：蛋白质组学骨质疏松症双向电泳中药
- 黄芪注射液对雌激素受体的激活作用研究被引量：32
- 2006年
- 目的构建含有雌激素受体配体结合域的哺乳动物细胞杂交基因报告系统,研究黄芪注射液对雌激素受体(ER)活性的影响。方法PCR扩增雌激素受体配体结合域,将配体结合域克隆到真核表达质粒pCMV-BD构建细胞杂交基因报告系统,研究黄芪注射液与雌激素受体的关系;MTT法检测黄芪注射液对细胞活力的影响。结果成功构建含有雌激素受体配体结合域的哺乳动物细胞杂交基因报告系统,黄芪注射液不能提高细胞活性,但对雌激素受体具有激活作用。结论黄芪注射液可能通过雌激素受体发挥疗效,细胞杂交基因报告系统是研究中药作用机理的手段之一。
- 王海彬王军舰黄辉刘琳刘少军徐传毅何伟樊粤光黄志伟
- 关键词：黄芪注射液雌激素受体HELA细胞配体结合域
- 通络生骨胶囊对雌激素受体的激活作用被引量：2
- 2006年
- 目的:构建含有雌激素受体配体结合域的哺乳动物细胞杂交基因报告系统,研究通络生骨胶囊对雌激素受体(ER)活性的影响。方法:PCR扩增雌激素受体配体结合域,将配体结合域克隆到真核表达质粒pCMVBD构建细胞杂交基因报告系统,研究通络生骨胶囊与雌激素受体的关系;MTT法检测通络生骨胶囊对细胞活力的影响。结果:成功构建含有雌激素受体配体结合域的哺乳动物细胞杂交基因报告系统,通络生骨胶囊可以显著提高细胞活性,并对雌激素受体具有激活作用。结论:通络生骨胶囊可能通过雌激素受体发挥疗效,细胞杂交基因报告系统可以用来研究中药的作用机理。
- 王海彬王军舰黄辉刘琳刘少军徐传毅何伟樊粤光黄志伟
- 关键词：通络生骨胶囊雌激素受体HELA细胞
