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农药氟虫腈作用下斑马鱼miR-155对UHRF1的调控作用被引量：2: 2013年; 农药氟虫腈对生物体具有慢性神经毒性,对生态环境具潜在的危险性。通过实验分析不同浓度氟虫腈等农药处理后,miRNA和相关靶基因在核酸和蛋白水平的表达,有助于明确miR-155和相关靶基因在外源化学物质毒理学效应中的作用与关系。本研究以dre-miR-155为研究对象,通过生物信息学分析,对其靶标进行预测,结合互补"种子"序列、结合的自由能以及各数据库中的排位等因素,选取所预测靶基因UHRF1进行研究,并利用荧光定量PCR、Western blot从基因和蛋白水平研究miR-155对基因UHRF1的调控作用。结果表明,在氟虫腈的作用下miR-155表达上调,UHRF1表达下调;UHRF1蛋白表达量随miR-155表达的增加而减少,miR-155可能对UHRF1的表达有负调控作用。miR-155对UHRF1的调控作用的研究对毒理学、生物医学等领域具有重要意义。; 张杰张凯李鹿丰郭江峰; 关键词：氟虫腈 MIR-155 斑马鱼毒理学生物医学

miRNA-155对氟虫腈作用下斑马鱼ZF4细胞存活的影响: 2015年; microRNA（miRNA）是一类长约20～24nt的非编码单链小分子RNA．环境毒理学研究表明，当生物暴露于环境化学物质时，会引起相关miRNA表达发生变化，进而调节基因的表达．农药氟虫腈是一种苯基吡唑类杀虫剂，能影响斑马鱼中miR-155的正常表达，但尚未见异位表达的miR．155对斑马鱼细胞影响的研究．本研究明确了异位表达的miR-155对氟虫腈作用下斑马鱼胚胎细胞ZF4存活的影响．结果显示，氟虫腈处理ZF4细胞72h的，IC_50值为39．05p,mol／L，瞬时转染miR-155mimic，显著降低了ZF4细胞氟虫腈暴露的存活率．同时real-time PCR结果显示，其潜在靶基因cyb561d2表达显著降低；而转染miR-155 inhibitor，抑制细胞内源性的miR-155则可显著增强ZF4细胞抵抗氟虫腈细胞毒性的能力，同时cyb561d2表达则显著增高．以上结果表明，miR-155参与氟虫腈毒理学效应，其表达量的高低可以影响氟虫腈作用下ZF4细胞的存活率，而其可能的途径之一是通过潜在靶基因cyb561以的表达调控来实现．因此，miR-155可作为氟虫腈环境毒性的潜在的生物标志物，有望成为致癌环境化学物质对生物体作用机制研究的新途径．; 李鹿丰黄涵年周永勇张凯郭江峰; 关键词：细胞存活率氟虫腈

三唑磷对斑马鱼miR-99及其预测靶标ckmt2的表达的影响被引量：2: 2013年; 在农药三唑磷作用下,miRNA的表达发生改变;并通过与靶基因的配对,从而调控基因的表达。本文采用荧光定量PCR和Western blot等方法对miR-99及其潜在靶基因ckmt2的表达变化进行了研究。结果表明,三唑磷处理后miR-99表达是对照的0.062倍,助剂处理是对照的0.414倍,表达下调;三唑磷处理后ckmt2基因是其对照的0.91倍,助剂处理是其对照的0.89倍,在mRNA水平变化不显著。三唑磷及助剂处理后,斑马鱼的总蛋白含量减少,CKMT2蛋白含量增加,采用独立样本检验方法分析结果表明,处理前后的CKMT2蛋白质含量差异显著。综上所述,在三唑磷作用下,斑马鱼miR-99对潜在靶标基因ckmt2的表达可能存在抑制作用,miR-99表达的降低致使对ckmt2表达抑制的作用减弱,从而提高ckmt2的表达。; 赵铁军丁佳女郭芳利马琴琴丁先锋郭江峰; 关键词：MICRORNA 三唑磷斑马鱼靶基因

MicroRNA在环境毒理学中的研究进展被引量：4: 2013年; MicroRNA（miRNA）是一类长为20～24nt的非编码单链小分子RNA，主要存在于真核生物中，具有组织特异性、无开放阅读框等特点，在转录或翻译水平调控基因表达，参与细胞增殖、分化、凋亡，并与炎症、肿瘤等疾病发生、发展密切相关。环境毒理学研究表明，当生物暴露于环境化学物质时，会引起相关miRNA表达发生变化，进而导致其靶基因表达发生改变。因此，有必要明确环境化学物质、miRNA和相关靶基因三者问的作用关系。在环境毒理学研究和环境监测中，miRNA可作为识别环境中化学物质基因毒性和致癌性的生物标记物，并可用于预测环境化学物质对生物体的毒性。; 黄涵年郭江峰; 关键词：MICRORNA 环境毒理学毒性生物标记物

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浙江省自然科学基金(LY12B07012)