河南省自然科学基金(092300410200)
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- stathmin的筛选及其对小鼠睾丸精原细胞的作用研究
- 2009年
- 目的:筛选并鉴定小鼠精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)自增殖相关的蛋白因子,并深入探讨其对SSCs自增殖及分化的影响。方法:通过建立有效的动物模型,运用双向电泳、质谱分析等蛋白组学的方法,筛选并鉴定与小鼠SSCs自增殖可能相关的蛋白因子;克隆所筛选蛋白的基因,使其与绿色荧光蛋白的基因融合,构建载体pEGFP-stathmin。转染体外培养的小鼠精原细胞及睾丸支持细胞,使其在该细胞中过表达。分别培养1、3和5d后,以MTT法对细胞进行计数;通过原位杂交,对所筛选蛋白的基因在精原细胞中的表达进行分析。结果:成功筛选了4种与SSCs自增殖可能相关的蛋白,stathmin即是其中一种。在转染融合基因后培养的第2、4、6天时,stathmin转染组精原细胞数显著高于空载体转染组以及正常对照组(P<0.05);原位杂交结果显示,stathmin主要表达在精原细胞中,而在精母细胞中有弱表达。结论:stathmin对小鼠精原细胞增殖具有促进作用,该影响极有可能作用于精原细胞向精母细胞的分化阶段。
- 张世卿李恩中李德雪张世庆李明杰陈燕芳
- 关键词：STATHMIN睾丸精原细胞精母细胞转染
