教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-07-0439)
- 作品数：10 被引量：77H指数：6
- 相关作者：李英侯喜林高素燕单晓政刘同坤更多>>
- 相关机构：南京农业大学中华人民共和国农业部上海市农业科学院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 不结球白菜SRAP体系优化与品种聚类分析被引量：15
- 2009年
- 通过单因素试验确定了Mg2+、dNTP、TaqDNA聚合酶和引物4种因素在不结球白菜SRAP反应体系中的适宜浓度范围,并在此基础上利用正交试验设计对不结球白菜SRAP反应体系进行优化,确立了适合不结球白菜的SRAP反应体系,即25μl反应体系中,含Mg2+2 mmol/L、dNTP 0.2 mmol/L、TaqDNA聚合酶1.5 U、引物0.36μmol/L、1×PCR Buffer、模板DNA 30 ng。运用优化的体系,利用30个引物组合对17个不结球白菜品种进行遗传多样性的SRAP标记分析,20个多态性的引物组合共检测到90个多态性位点。应用聚类分析(UPGMA)结果显示,园艺性状相似的品种在较近的遗传距离聚类,表明SRAP可有效用于不结球白菜品种资源鉴定与聚类分析。
- 单晓政侯喜林李英吴海涛王枫李梅
- 关键词：不结球白菜SRAP聚类分析
- 不结球白菜热激蛋白BcHSP81-4基因原核表达及生物信息学被引量：1
- 2011年
- 从不结球白菜Pol_CMS胞质不育系SSH差减文库中得到1条热激蛋白基因的EST序列,通过对该基因的NCBI网上BLAST比对发现,与热激蛋白的同源性最高,与拟南芥HSP81-4(AT5G56000)同源性高达96%,命名为BcHSP81-4。将BcHSP81-4基因片段连接到原核表达载体PGEX-4T-3,转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导重组蛋白的表达。经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳,产生了预期大小的重组蛋白,进一步证明了该基因属于热激蛋白90家族。并采用生物信息学方法,利用多种在线软件对不结球白菜热激蛋白BcHSP81-4的理化性质、亲水性、跨膜区、亚细胞定位及蛋白质结构进行预测和分析。理化性质分析结果显示,该蛋白质含699个氨基酸,分子量为80 050,理论等电点pI值为4.95。TMpred跨膜分析结果显示,它含有1个显著的跨膜螺旋区,这个区域与ProtScale预测的疏水区基本对应。用TargetP server和WOLFPSORTserver程序预测该蛋白质为细胞质蛋白质,二级结构以α-螺旋和随机卷曲为主。
- 刘同坤李英王枫孙菲菲张蜀宁侯喜林
- 关键词：不结球白菜原核表达生物信息学
- 不结球白菜S位点受体激酶基因片段的克隆与表达分析被引量：1
- 2011年
- 以不结球白菜自交不亲和系03的基因组DNA和柱头cDNA为模板,利用引物SRKF/SRKR扩增获得长度为964 bp和646 bp的SRK基因片段。序列比较分析表明,克隆的基因片段属于SRK基因的激酶域,该序列包含4个外显子和3个内含子,编码215个氨基酸,与芜菁、甘蓝、芥蓝等SRK基因有90%以上的相似性。荧光定量PCR分析结果表明:自交不亲和系03和自交亲和系105不同组织中SRK基因的表达水平存在显著的差异,SRK基因主要在自交不亲和系的柱头中高度表达,自交亲和系中该基因的表达主要分布于叶片、花蕾和柱头组织中。
- 张爱芬王立侯喜林刘同坤李英
- 关键词：不结球白菜荧光定量PCR基因表达分析
- 不结球白菜雌蕊蛋白质双向电泳技术体系的建立被引量：8
- 2012年
- 以不结球白菜品种‘矮脚黄’的雌蕊为材料,从蛋白质提取、IEF程序、IPG胶条pH范围和染色方法等方面进行比较,利用Tris-HCl提取方法,使用pH 4～7 IPG胶条和改进的等电聚焦程序,改良银染方法,建立了适用于不结球白菜雌蕊蛋白质的双向电泳技术体系,并使用该体系对开花前2 d的花蕾雌蕊和开花2 d后的雌蕊蛋白质进行比较分析,获得187个差异蛋白点。
- 王立张硕侯喜林李英
- 关键词：不结球白菜雌蕊蛋白质双向电泳
- 不结球白菜离体培养与植株再生体系研究被引量：21
- 2008年
- 以4个不结球白菜品种为试材，对外植体、苗龄、激素的组配、培养基中琼脂和AgNO3浓度等再生因素进行了筛选优化，并探讨了抗坏血酸（AsA）对不结球白菜不定芽分化的影响。结果显示：以4～7d苗龄的带柄子叶为外植体诱导不定芽效果较好；MN培养基中4mg／L 6-BA与0．5mg／L NAA的搭配有利于不定芽形成；琼脂的浓度变化对不定芽分化影响较大，以9g／L琼脂为宜；培养基中添加5～7．5mg／L的AgNO3、0．1～0．5mmol／L的AsA可显著提高不定芽的发生频率和质量。通过不定芽继代培养、生根培养和驯化移栽建立了能够获得较高再生频率的不结球白菜离体再生体系。
- 高红亮李英宋玉萍高素燕王建军
- 关键词：不结球白菜不定芽离体培养
- 预处理对不结球白菜游离小孢子胚胎发生的影响被引量：13
- 2008年
- 研究了低温预处理、热激处理和高糖浓度处理对不结球白菜游离小孢子胚胎发生的影响。结果显示：对供体花蕾进行1～3d的低温预处理能显著提高出胚率，超过5d则明显降低，并且不同基因型对低温预处理的反应不同；热激处理对小孢子胚胎发生起关键作用，不同基因型所要求的最佳热激温度和时间不同；以17％的高糖浓度培养基对游离小孢子进行1～4d预处理能显著提高出胚率，随处理时间的延长效果降低，但在1～4d范围内胚诱导率均高于对照。
- 高素燕李英单晓政侯喜林
- 关键词：预处理不结球白菜小孢子胚胎发生
- 白菜S位点糖蛋白基因的克隆与表达分析被引量：1
- 2009年
- 以白菜[Brassica campestris L.ssp.chinensis(L.)Makino]自交不亲和系为材料,采用RT-PCR技术,用特异引物对SLG基因进行克隆,获得SLG基因cDNA序列长度为1324bp,命名为BcSLG。序列分析表明:所获得的白菜BcSLG基因cDNA序列包含一完整的编码框,编码432个氨基酸,含有12个保守的半胱氨酸残基和7个N-糖基化位点。序列比对和系统进化分析表明:BcSLG与其它植物的SLG基因氨基酸序列具有较高的同源性,与大白菜和甘蓝亲缘关系最近。荧光定量PCR分析表明:BcSLG基因在自交不亲和系的柱头中表达量最高,其次是花蕾,叶片中表达最低,在自交亲和系的柱头、花蕾和叶片中相对表达较低。
- 张爱芬李英刘同坤史公军侯喜林
- 关键词：白菜荧光定量PCR基因表达分析
- 不结球白菜分子遗传图谱的构建及分析被引量：8
- 2009年
- 以不结球白菜常州乌塌菜和二青杂交产生的181株F2代分离材料为作图群体,利用ISSR、RAPD、SSR、SRAP等分子标记来构建不结球白菜分子遗传连锁图谱.结果表明,构建的连锁图谱包含11个连锁群,由139个标记组成,其中包括4个ISSR标记、19个RAPD标记、22个SSR标记和94个SRAP标记.其中偏分离标记37个,占26.6%;每条连锁群上的标记数在4～33个之间,连锁群长度在61～164cM的范围,覆盖基因组950cM,总平均图距6.8cM.
- 单晓政李英高素燕马成英刘同坤朱玉英侯喜林
- 关键词：不结球白菜分子遗传图谱ISSRRAPDSSRSRAP
- 不结球白菜小孢子胚植株再生及倍性研究被引量：13
- 2009年
- 以不结球白菜子叶型小孢子胚为外植体,研究冷处理、活性炭及AgNO3对小孢子植株再生的影响,并对再生植株染色体倍性进行鉴定.结果表明:对小孢子胚进行5d的4℃冷处理培养能提高其胚芽诱导率和胚芽数;培养基中添加1.0g/L的活性炭对提高小孢子胚芽诱导率没有明显效果,但能有效减轻胚芽的玻璃化;添加5.0或7.0mg/L的AgNO3对小孢子胚芽诱导有显著效果.染色体倍性鉴定结果表明:不结球白菜小孢子植株的染色体自然加倍率较高,在50%～100%之间;不同基因型不结球白菜小孢子植株的倍性变异具有多样性;在部分基因型中嵌合体占较高比例,最高达到42.86%.
- 高素燕侯喜林李英单晓政马成英
- 关键词：不结球白菜小孢子胚植株再生倍性
- 二氧化碳处理对不结球白菜采后品质及过氧化氢清除系统的影响被引量：1
- 2011年
- 不结球白菜采后贮藏过程中品质易发生变化。贮藏过程中采用二氧化碳气体(CO2)处理可以延缓采后不结球白菜的衰老进程,减少重要营养物质维生素C(Vc)、可溶性蛋白和叶绿素的损失;CO2处理可抑制过氧化氢清除酶系统中的过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化氢酶(APX)和过氧化物酶(POD)活力的升高。50%和100%的CO2处理都可延缓采后不结球白菜贮藏过程中品质的下降,而前者的处理效果要优于后者。在室温下(25℃)CO2处理对品质的保持效果较明显,4℃下CO2处理的效果并不明显;在CO2处理的条件下,不同温度处理对品质的改变也不明显,因此不结球白菜采后短期保存可单独采取CO2处理或低温贮藏的方法。
- 张硕王立侯喜林任君王雪花李英
- 关键词：不结球白菜采后保鲜二氧化碳衰老过氧化氢
