国家自然科学基金(81000889)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
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- 丙型肝炎病毒核心蛋白通过活化stat3通路促进肝癌细胞上皮间质转化的研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨丙型肝炎病毒核心蛋白(HCVc)对肝癌细胞信号转导子和转录激活子3(stat3)通路及上皮间质转化(EMT)的影响。方法将含HCVc基因序列的重组质粒p EGFP-N3-HCVc转染人肝癌细胞Hep G2,Real-Time PCR和Western blotting检测HCVc、总stat3、磷酸化stat3(p-stat3)及EMT指标蛋白E-cadherin、Vimentin、Snail的表达,划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况。结果划痕实验及Transwell实验结果显示,过表达HCVc可增强Hep G2细胞的迁移和侵袭能力;stat3通路抑制剂AG490处理可抑制Hep G2细胞的侵袭能力。RT-PCR和Western blotting结果显示,过表达HCVc后,Hep G2细胞中p-stat3、Vimentin及Snail在表达升高,E-cadherin表达下降;AG490处理可下调p-stat3、Vimentin及Snail表达,增强E-cadherin表达。结论 HCVc可活化stat3通路促进肝癌细胞上皮间质转化,增强肝癌细胞的迁移和侵袭能力。
- 周嘉嘉陈汝福邓小耿高文超郑上游程帝周泉波张杰
- 关键词：病毒核心蛋白质类肝炎丙型STAT3上皮间质转化
- 沉默NANOG基因表达对侧群表型肝癌干细胞化疗耐药的影响
- 2018年
- 目的观察沉默NANOG基因对侧群表型肝癌干细胞化疗耐药的影响,初步探讨提高肝癌化疗效果的新方法。方法基于侧群(SP)细胞分选法,采用流式细胞术从肝癌细胞Hep3B中分选SP细胞和非侧群(NSP)细胞,通过特异性靶向NANOG基因的si RNA沉默SP细胞中NANOG基因表达,MTT法检测SP细胞对化疗药物阿霉素(DOX)的敏感性,实时荧光定量PCR(real-time PCR)和免疫印迹(Western blotting)检测NANOG和耐药相关基因ABCB1的表达。结果 (1)肝癌细胞Hep3B中分选的SP细胞比例为(13.3±1.8)%。(2)MTT法结果显示DOX处理后SP细胞存活率为(65.3±5.4)%,NSP细胞存活率为(41.2±4.7)%;SP细胞对DOX的耐药性高于NSP细胞(P<0.05)。(3)NANOG和ABCB1 m RNA在SP细胞中的表达水平分别是NSP细胞的4.5、4.0倍;NANOG和ABCB1蛋白在SP细胞中表达水平分别是NSP细胞的4.2、3.6倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)RNAi沉默NANOG表达后,si NANOG组SP细胞NANOG、ABCB1的m RNA和蛋白表达水平均较Mock组和si NC组明显下降(P<0.05),SP细胞对阿霉素DOX的耐药性显著降低(P<0.05)。结论 NANOG基因在维持SP表型肝癌干细胞耐药性起重要作用,沉默NANOG表达后SP细胞耐药性受到抑制,可能与ABCB1表达下调有关。
- 周嘉嘉程帝陈汝福邓小耿邓君阁叶会霖韦禄胜张斌
- 关键词：肿瘤干细胞NANOGABCB1
- RNAi抑制NANOG表达对肝癌细胞HepG2中MDR1表达及阿霉素敏感性的影响被引量：3
- 2014年
- 目的探讨抑制NANOG表达对肝癌细胞HepG2中多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)表达及阿霉素敏感性的影响。方法将靶向NANOG基因的特异性siRNA转染肝癌细胞HepG2,Real-time PCR和Western blot检测siRNA沉默NANOG基因后NANOG、MDR1 mRNA和蛋白的表达,平板克隆形成实验检测沉默NANOG基因后对细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测沉默NANOG基因后对细胞周期的影响,CCK-8法检测沉默NANOG基因后HepG2细胞对阿霉素的敏感性情况。结果靶向NANOG基因特异性siRNA转染肝癌细胞HepG2后,能有效抑制NANOG mRNA和蛋白表达,与Mock组比值分别为(0.32±0.05)和(0.38±0.08);与Mock组比较,沉默NANOG基因后,细胞克隆形成率下降[(8.51±3.63)%vs(17.13±2.24)%,P<0.05],进入G0/G1期的细胞比例增多[(75.33±8.21)%vs(57.81±5.05)%,P<0.05],HepG2细胞对阿霉素的敏感性增强(P<0.05),HepG2细胞内MDR1 mRNA和蛋白表达下降,与Mock组比值分别为(0.35±0.06)和(0.41±0.08)。结论抑制NANOG表达可引起肝癌细胞HepG2中MDR1的表达下调并增强细胞对阿霉素的敏感性。
- 周嘉嘉陈汝福邓小耿周雨周泉波张杰伍耀豪曾乐祥邱荣林
- 关键词：肝癌NANOG阿霉素多药耐药基因1
