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陕西省科技统筹创新工程计划项目(2011KTCL03-14)

作品数:2 被引量:11H指数:1
相关作者:刘妮苏宝山李宗芳杨军康安静更多>>
相关机构:西安交通大学医学院第二附属医院更多>>
发文基金:陕西省科技统筹创新工程计划项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇HBEAG
  • 1篇乙肝
  • 1篇乙肝E抗原
  • 1篇乙型
  • 1篇乙型肝炎
  • 1篇乙型肝炎病毒
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇真核表达载体
  • 1篇中国仓鼠卵巢...
  • 1篇抗原
  • 1篇抗原表位
  • 1篇抗原表位预测
  • 1篇核表达
  • 1篇肝炎
  • 1篇肝炎病毒
  • 1篇PCDNA3
  • 1篇表位
  • 1篇表位预测
  • 1篇病毒

机构

  • 2篇西安交通大学...

作者

  • 2篇康安静
  • 2篇杨军
  • 2篇李宗芳
  • 2篇苏宝山
  • 2篇刘妮
  • 1篇王军宁
  • 1篇赵世平
  • 1篇张婷
  • 1篇强磊
  • 1篇靳耀锋
  • 1篇卫阳

传媒

  • 1篇临床肝胆病杂...
  • 1篇南方医科大学...

年份

  • 1篇2013
  • 1篇2012
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
HBeAg真核表达载体的构建及其在中国仓鼠卵巢细胞中的表达
2012年
目的克隆HBeAg基因,构建重组HBeAg真核表达载体,并在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中进行表达。方法采用PCR法从HBeAg阳性乙型肝炎患者血清HBV DNA中扩增HBeAg基因,克隆入pcDNA3.1(+)真核表达载体中,构建重组pcDNA-HBeAg真核表达载体,经PCR、双酶切、测序鉴定后,将其转染入CHO细胞,G418筛选,用PCR、免疫斑点、Western Blot、免疫细胞化学方法检测HBeAg在CHO细胞中的表达。结果成功克隆到HBeAg基因,并构建了重组pcDNA-HBeAg真核表达载体;基因测序证实克隆的HBeAg基因中共有12个位点发生单碱基置换突变(C1819G,A2007T,C2046T,C2061G,G2106A,C2109A,C2146T,T2172C,C2203T,A2235G,G2253A,C2298T),1个位点发生缺失突变(2346 del T);成熟HBeAg蛋白中149位缬氨酸(valine,V)突变为苯丙氨酸(phenylalanine,F)(V149F),在HBeAg蛋白羧基端融合有一段长11个氨基酸的多肽(RLESRGPVZTR)。PCR、免疫斑点、Western Blot和免疫细胞化学方法证实重组pcDNA-HBeAg真核表达载体可在CHO细胞中表达分泌型HBeAg蛋白。结论重组HBeAg真核表达载体的构建和表达为HBeAg的临床诊断和深入研究提供了条件。
杨军刘妮卫阳靳耀锋王军宁康安静苏宝山李宗芳
关键词:PCDNA3
HBeAg的B细胞线性表位预测及鉴定被引量:11
2013年
目的预测并鉴定乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)的B细胞线性表位,为乙型肝炎的诊断和治疗提供新的依据。方法采用生物信息学分析技术,利用NCBI数据库和免疫表位数据库提供的相应软件预测HBeAg的B细胞线性表位,采用人工合成法合成相应表位肽并分别将与血蓝蛋白(KLH)偶联,作为免疫原,免疫大白兔制备抗HBeAg抗原表位抗体,ELISA法鉴定抗体的特异性。结果发现了1MDIDPYKEFG10、37LYREALESPEHCSP50、74SNLEDPAS81、127RTPPAYRPPNAPIL140等4条新的HBeAg蛋白B细胞线性表位肽,其与KLH的偶联物作为免疫原免疫大白兔,获得特异性高效价抗体,抗体滴度大于1∶512000,ELISA实验证实上述抗体均可与HBeAg发生特异性免疫反应。结论采用生物信息学技术成功确认了4个HBeAg蛋白B细胞线性表位肽,为深入研究HBeAg的功能和作用以及乙型肝炎的治疗提供了新依据。
杨军刘妮张婷赵世平强磊苏宝山康安静李宗芳
关键词:乙型肝炎病毒抗原表位预测
共1页<1>
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