浙江省重大科技专项基金(2012C12004-3)
- 作品数：6 被引量：26H指数：3
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- 采用乳杆菌发酵提高黄帝椒加工品质
- 2014年
- 通过对乳杆菌发酵黄帝椒酱的亚硝酸盐、抗氧化活性、有机酸和氨基酸的分析发现：与自然腌制样品相比，经乳杆菌发酵的黄帝椒酱中亚硝酸盐基本被消除，抗氧化活性提高了54％-82％，总多酚和还原型谷胱甘肽（GSH）的含量分别提高了51％和59％以上；风味物质乳酸含量提高了2倍，多种氨基酸含量均有所提高，其中功能性物质y-氨基丁酸含量提高了54％以上。研究结果表明，乳杆菌发酵不仅丰富了黄帝椒酱的风味，而且增强了其营养保健功能。
- 刘世源宗红陆信曜诸葛斌方慧英孙进楼笑笑冯倩
- 关键词：乳杆菌亚硝酸盐抗氧化活性有机酸氨基酸
- 一种米曲霉蛋白酶的酶学性质及其在酪蛋白磷酸肽制备中的应用被引量：5
- 2015年
- 【目的】分离纯化米曲霉蛋白酶的主要组分,分析其酶学特性,并应用于酪蛋白磷酸肽(Casein phosphopeptides,CPPs)的制备。【方法】采用硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析和Butyl-sepharose HP疏水层析对米曲霉蛋白酶进行分离纯化,SDS-PAGE检测分子量与纯度,MALDI-TOF-MS检测酶切位点。【结果】得到一种蛋白酶组分(命名为PE),分子量大小为58 k D左右。该酶最适反应条件为55°C,p H 8.0,酶活被Fe3+抑制,被Mn2+激活。以酪蛋白为底物时,Km=0.36 g/L,最大反应速率Vm=18.18 mg/(L·min)。蛋白酶PE对牛胰岛素B链上-Leu-Cys-、-Val-Glu-、-Tyr-Leu-和-Arg-Gly-组成的肽键有较高的切割能力,酶切位点较多。利用其水解酪蛋白,通过钡-乙醇沉淀法得到CPPs,产率为15.87%,摩尔氮磷比r(N/P)为6.17,得到的CPPs可以使钙沉淀推迟35 min。【结论】利用米曲霉蛋白酶水解酪蛋白产生CPPs,为其在功能性食品加工方面的应用提供有利的参考。
- 冯颖杰宗红诸葛斌方慧英陆信曜孙进冯倩丁凤姣
- 关键词：米曲霉蛋白酶分离纯化酶学性质酶切位点酪蛋白磷酸肽
- 米曲霉蛋白酶的分离纯化及酶学性质研究被引量：17
- 2014年
- 【目的】获得米曲霉蛋白酶主要成分及其酶学性质。【方法】利用硫酸铵盐析,DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析、Phenyl-Sepharose HP疏水层析和Superdex-G75/200凝胶层析对米曲霉所产蛋白酶系进行分离纯化,SDS-PAGE检测蛋白酶纯度和分子量,采用高效液相凝胶色谱分析两种蛋白酶酶解产物。【结果】从米曲霉所产蛋白酶系中分离纯化获得两种蛋白酶组分P1和P2,分子质量分别约为37 kD和45 kD。以酪蛋白为底物时,P1的Km=8.36 g/L,Vm=12.95μg/(mL·min),最适反应条件为pH 8.0、45°C;P2的Km=4.11 g/L,Vm=4.86μg/(mL·min),最适反应条件为pH 7.0、45°C。两种蛋白酶均对酪蛋白水解活性最高,而对牛血清蛋白的水解活性很低。P1和P2分别酶解大豆分离蛋白后水解产物中肽分子质量分布呈现出一定的差异。【结论】两种蛋白酶的酶学性质存在差异;两者对疏水氨基酸构成的肽键具有选择性,但其作用基团存在特异性。这些研究结果将为米曲霉所产蛋白酶在食品上的应用提供指导。
- 马俊阳诸葛斌方慧英宗红孙进龚星慧诸葛健楼笑笑冯倩
- 关键词：米曲霉蛋白酶分离纯化酶学性质
- 海南黄帝椒酶促褐变控制的研究被引量：1
- 2013年
- 本文采用丙酮法提取了海南黄帝椒中的多酚氧化酶(PPO),并对其酶学特性进行了研究。海南黄帝椒PPO的米氏常数K m为117.38mmol/L,最大反应速率V max为416.67U/min,最适温度为40℃,最适pH为6.0。不同抑制剂对PPO活力的影响表明,较低浓度的柠檬酸、L-抗坏血酸、半胱氨酸盐酸盐对黄帝椒PPO活力具有一定的的抑制作用,而EDTA抑制效果较差;在单因素实验的基础上,通过正交实验设计对黄帝椒酶促褐变的抑制剂配方进行了优化,结果表明当添加L-抗坏血酸0.35%、半胱氨酸盐酸盐0.02%和柠檬酸0.2%时,黄帝椒的褐变度最小。此研究结果为海南黄帝椒产品的深度开发提供了基础。
- 宗红诸葛斌方慧英孙进龚星慧冯倩楼笑笑诸葛健
- 关键词：多酚氧化酶酶促褐变抑制剂
- 一种米曲霉蛋白酶的分离纯化及酶解特性研究被引量：3
- 2015年
- 对米曲霉固态发酵所产蛋白酶分离纯化,采用硫酸铵盐析、DEAE-FF层析、Butyl-HP层析和Superdux 7510/300GL凝胶层析得到一种电泳纯的蛋白酶,SDS-PAGE显示分子量大小为27 ku左右。以酪蛋白为底物时,该蛋白酶Km=1.23 g·L-1,Vm=27.03μg·m L-1·min-1,最适反应条件为50℃,p H9.0。该蛋白酶对酪蛋白水解活性最高,而对牛血清蛋白的水解活性很低;对牛胰岛素B链上-Phe-Val-,-Cys-Gly-,-Glu-Ala-和-Arg-Gly-组成的肽键有较强的切割能力,酶切位点较多,对疏水性氨基酸具有较高的选择性,为米曲霉所产蛋白酶在食品上的应用提供有力的参考。
- 宗红冯颖杰陆信曜诸葛斌方慧英孙进冯倩楼笑笑程英雀
- 关键词：米曲霉蛋白酶分离纯化酶切位点
- 鸡精调味料加工过程中微生物检测及安全控制被引量：2
- 2015年
- 为提高鸡精调味品卫生质量,根据生产工艺特点分别对鸡精生产原辅料、加工流程及主要加工设备进行了微生物检测。食用玉米淀粉和葱姜混合物是鸡精生产原辅料中的主要微生物来源,水分含量是直接影响玉米淀粉微生物污染的主要因素,当水分含量>10%时,100 g玉米淀粉大肠菌群>70 MPN;葱姜混合物经30%质量分数的食用盐处理后可控制微生物的数量。鸡精生产工序过程中的搅拌后、造粒前后及流化干燥前微生物污染严重,其中搅拌后菌落总数最高,为1.2×104CFU/g,造粒前大肠菌群最高,为167 MPN/100g,搅拌和造粒是鸡精生产过程中的关键控制环节。另外,造粒机筛网及侧槽的菌落总数达到908 CFU/cm2,高于食品车间卫生标准,表明造粒岗位是鸡精生产的一个关键控制点。
- 宗红陆信曜诸葛斌方慧英孙进冯倩诸葛健张慢慢
- 关键词：微生物检测菌落总数安全控制
