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浙江鼬獾狂犬病毒F01株P和M基因序列测定分析被引量：1: 2009年; 狂犬病毒（rabiesvirus，RABV）广泛存在于多种哺乳动物体内，并在宿主动物之间相互传播。鼬獾又名白面鼬，野生小型貂科动物，杂食性，浙江全境均有分布。近几年浙江省人狂犬病疫情不仅仅局限于通过犬传播，鼬獾咬伤致人狂犬病的情况已有报道。为了解野生动物狂犬病毒街毒流行株的分子特征，笔者对检测获得的鼬獾F01株狂犬病毒的P、M基闽序列进行扩增并测序，将其与中国人、犬毒株以及目前使用的疫苗株进行比较分析，现报道如下。; 雷永良王晓光李浩陈秀英叶碧峰柳付明兰进权梅建华唐青; 关键词：基因序列测定动物体内人狂犬病宿主动物

狂犬病高发地区犬只感染情况调查分析被引量：39: 2008年; 目的分析自然状况下犬只感染狂犬病毒状况及其与人间狂犬病的关系。方法 2005年10月到2006年12月间，在狂犬病疫情最严重的贵州、广西和湖南3省区的狂犬病高、中、低发病地区分别选择1～2个市作为标本采样点，用直接免疫荧光法和RT-PCR两种方法检测标本。结果在3省区的15个市共收集犬脑标本2887份，检测阳性标本66份，感染率为2、3％，不同地区犬感染率与当地人狂犬病发病率不呈线性相关。结论犬只感染狂犬病毒普遍存在，这是我国狂犬病高发区疫情严重的一个重要因素。; 李浩陶晓燕宋淼张强莫兆军周开姣张红戴德芳王定明周金柱唐青梁国栋; 关键词：狂犬病狂犬病

中国狂犬病高发地区狂犬病毒磷蛋白基因特点分析被引量：2: 2008年; 目的调查研究中国狂犬病高发地区狂犬病毒磷蛋白P基因遗传变异情况，分析其结构特点。方法测定广西、贵州、湖南的人、犬脑组织标本狂犬病毒P基因核苷酸序列，进行序列的同源性比较和种系发生分析。结果 P基因核苷酸和推导氨基酸序列同源性分别为82．1％～100％和87．5％～100％；三省区毒株明显区别于其他国家地区分离株；PP主要功能位点未发生影响P基因生物学功能的变异。结论三省区狂犬病毒同属于基因I型，具有共同的进化途径和基因结构特点；病毒分布具有独特的中国地域性特征；中国湖南省个别毒株可能和泰国毒株来源于共同的狂犬病毒。; 王晓光陶晓燕李浩宋淼杜加亮张强莫兆军周开姣张红戴德芳王定明周金柱唐青梁国栋; 关键词：狂犬病病毒磷蛋白类基因

狂犬病毒糖蛋白特点及其在中和抗体评价中的应用被引量：1: 2008年; 狂犬病毒糖蛋白（GP）是一种跨膜糖蛋白，存在于病毒包膜表面，以同源三聚体的形式存在，构成病毒表面突起。它是狂犬病毒5个结构蛋白中，唯一能刺激机体产生中和抗体的抗原，与狂犬病毒的多种生物学特性有关。目前对于狂犬病并无有效的治疗手段，只能采取免疫接种的方法进行预防，而评价疫苗免疫效果的指标为免疫后血液中和抗体水平。; 焦洋张强唐青; 关键词：狂犬病毒糖蛋白中和抗体水平疫苗免疫效果跨膜糖蛋白病毒表面结构蛋白

云南省保山市人间狂犬病调查及病毒分子生物学特征分析被引量：10: 2008年; 目的了解云南省保山市发生2例狂犬病患者的流行病学特点，根据病原分子生物学特征分析可能的传染来源。方法采用狂犬病个案调查表进行流行病学调查，采集狂犬病死者脑组织标本，用直接免疫荧光试验（DFA）检测狂犬病病毒抗原，用RT—PCR法检测狂犬病病毒核酸，测定狂犬病病毒P、M和N基因全序列并根据其同源性比较及系统进化树进行分子流行病学分析。结果2006年7月保山市隆阳区发生1例人间狂犬病，2007年4月腾冲县发生1例狂犬病。2例患者犬伤暴露程度均为Ⅲ度。2例死亡病例均采集到脑组织（编号为CYN0601H和CYN0701H），经DFA和RT—PCR两种实验室方法检测确诊为狂犬病病毒阳性。CYN0601H和CYN0701H与国内外狂犬病病毒的P、M和N基因核苷酸和推导氨基酸序列同源性分析显示，CYN0601H和CYN0701H与泰国分离株的同源性最高。系统进化分析显示，2株病毒标本亲缘关系很近，同属于狂犬病病毒基因1型，且与泰国病毒株有较近的亲缘关系。结论从病原学和病毒分子水平证实云南省保山市2例患者均为狂犬病，保山市狂犬病病毒流行株可能为境外传人，应加强云南省边境地区狂犬病防制工作。; 张海林唐青陶晓燕王晓光张云智杨卫红米竹青王静林章域震冯云郑维斌鲁国勇李胜国; 关键词：狂犬病病毒基因分子流行病学

直接快速免疫组化法在我国狂犬病诊断中的初步应用被引量：5: 2008年; 目的评价诊断狂犬病的新方法一直接快速免疫组化法（Direct Rapid Immunohistochemical Test，DRIT）在我国狂犬病实验室监测工作中的应用推广价值。方法采用美国疾病预防控制中心（CDC）狂犬病室新近建立的检测狂犬病毒抗原的DRIT法与目前常用狂犬病诊断方法直接荧光抗体法（Direct Fluorescent-antibody Assay，DFA）和反转录．聚合酶链式反应（Reverie Transcription Polymerase Chain Reaction，RT-PCR），检测来源于贵州、广西、湖南、安徽、江苏和云南6个省（区）的72份家犬及患者脑组织标本。通过比较3种方法的检测结果，评价DRIT法的敏感性和特异性。同时分析3种方法的实验成本、技术要求等指标，讨论DRIT法的优势所在及适用范围。结果 3种方法对所有标本的检测结果一致，DRIT法具有与DFA法和RT-PCR法同等的敏感性和特异性。与其他两种方法相比，DRIT法具有研究成本低、技术要求也较低的特点，更适于经费有限及技术力量较弱的实验室采用。结论 DRIT法在狂犬病诊断中有良好的应用价值，适于在我国基层CDC的狂犬病实验监测工作中普及推广。; 陶晓燕Michael Niezgoda杜加亮李浩王晓光黄莹焦洋曹蕾唐青梁国栋; 关键词：狂犬病免疫组织化学

狂犬病病毒浙江街毒株糖蛋白基因序列分析: 2010年; 目的测定犴犬病病毒浙江株（鼬獾源和犬源）糖蛋白（GP）基因组全序列，从分子水平比较狂犬病病毒浙江株与其他地区代表性街毒株和疫苗株GP之间的差异。方法乳鼠接种分离狂犬病病毒，RT-PCR反应测定狂犬病病毒浙江株GP基因核苷酸序列，并进行序列和编码蛋白的比较分析。结果测序获得浙江5株鼬獾源狂犬病病毒和9株犬源狂犬病病毒GP基因序列，全长1575个核苷酸，编码524个氨基酸。浙江病毒株与其他地区街毒株、疫苗株核苷酸和氨基酸序列相似性在82．3％～99．9％和85．1％-99．8％之间，种系分析显示浙江株均为基因1型，GP编码蛋白无重组，主要抗原位点未出现较大的变异。结论对GP基因一级结构综合分析表明，在某些区域存在优势抗原表位的可能性较大，可能出现潜在的蛋白质抗原决定簇，浙江株GP基因变异较小，与国内其他地区流行的代表性街毒株相似，但高于其他疫苗株，在基因结构及种系进化关系上存在一定的距离。; 王晓光雷永良陈秀英孟胜利唐青; 关键词：狂犬病病毒糖蛋白基因序列

中国狂犬病毒RdRp基因特点被引量：1: 2008年; 目的测定中国狂犬病毒人用疫苗株aG和减毒株CTN181的RdRp编码（L）基因序列并初步研究其结构和功能特点。方法 RT-PCR法获得若干交叉重叠小片段，序列拼接得到完整RdRp编码基因序列，利用生物学软件进行同源性和种系发生分析，并对RdRp保守功能序列和位点进行预测分析。结果中国狂犬病毒ac和CTNl81株的L蛋白分别由6387和6384个核苷酸编码的2128和2127个氨基酸组成，前者比后者在起始部位多编码一个Met。结构功能分析发现在L蛋白上存在若干可能对RNA合成、mRNA聚腺苷酸化和磷蛋白磷酸化以及甲基转移酶的功能起决定作用序列；种系发生树显示中国疫苗株ac相对独立于WHO推荐使用的其他疫苗株。结论完整L基因结构揭示，对于全面了解中国狂犬病毒分子特征，发现新的功能位点，开发以RdRp为靶标的新型抗病毒药物研究以及弹状病毒科种系发生分析提供了有力的工具。; 杜加亮张强陶晓燕李浩梁国栋唐青; 关键词：狂犬病狂犬病疫苗狂犬病病毒

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国家高技术研究发展计划(SQ2006AA022112882)

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