广东省自然科学基金(010600)
- 作品数:7 被引量:15H指数:3
- 相关作者:陈政良李文君谭艳张丽芸李雷更多>>
- 相关机构:中国人民解放军第一军医大学南方医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- C1q、C1r和C1s的快速分离
- 2002年
- 建立了一种同时快速分离纯化C1q及酶原形式C1r和C1s的方法。用IgG Sepharose 4B亲和层析将C1q与C1r2 s2 分离 ,接着用DEAE Sephacel离子交换层析将C1r和C1s分离 ,用C1qMcAb Sepharose 4B亲和层析将C1q进一步纯化。在分离Clr和C1s的整个过程中加入蛋白水解抑制剂PMSF和NPGB ,并控制温度在 4℃、pH 6 1、无二价阳离子的条件下 ,得到高度纯化的C1q、C1r和C1s。
- 李文君陈政良张丽芸
- 关键词:C1Q离子交换层析补体
- 天然免疫识别的机制与途径被引量:5
- 2002年
- 天然免疫系统的诱导性防御机制是由一系列模式识别受体对病原体的识别所启动的。这类受体识别一或几大组病原体所共有的分子模式 ,不但可发现入侵病原体的存在 ,而且能够识别其类型 ,并通过一系列信号途径控制各种免疫反应基因的表达而清除病原体。而天然免疫的抗肿瘤及部分抗病毒反应是一种对自身抗原的识别 ,所激发的信号途径发挥了免疫监视和防御功能。
- 李雷
- 关键词:模式识别受体病原体信号传导机制
- 从噬菌体随机环七肽库筛选可模拟C1qR的C1q结合肽
- 2004年
- 为获得能结合C1q并模拟C1q受体 (C1qR )配体结合位点的短肽 ,以C1q为钓饵蛋白筛选噬菌体环七肽库 ,采用C1q结合ELISA、U937细胞配体结合抑制试验、多聚IgG (AIgG )竞争抑制试验鉴定阳性克隆 ,再进行单链DNA测序和分析。结果经 3轮筛选后 ,随机挑选 2 3个噬菌体克隆进行ELISA鉴定 ,10个克隆与C1q有较强的结合 ;利用U937细胞配体结合抑制试验 ,得到了 7个阳性克隆 ;从其展示肽DNA测序结果推导氨基酸序列 ,获得 7个短肽序列 :QTPFQLW、NPFNWTS、SPFXLTS、FLTWLDP、FSTFLYP、GPMWWSY和NPFXLIL。
- 李文君张丽芸陈政良
- 关键词:噬菌体展示肽库
- C1q结合线性十二肽的改建及其活性鉴定
- 2006年
- 目的改建以C1q为钓饵蛋白筛选随机肽库所获线性十二肽HWDPFSLSAYFP(a肽)以增强其生物学活性。方法在a肽序列两端加上噬菌体展示短肽上的支架氨基酸残基,得到线性肽GGG HWDPFSLSAYFP SHS(a1肽);在a1肽内部构建环化结构,得到环肽GGGC HWDPFSLSAYFP CSHS(a2肽);采用U937细胞配体结合抑制试验、多聚IgG(AIgG)竞争抑制试验和CH50抑制试验鉴定其生物学活性。结果a1肽较a肽抑制活性明显提高,对C1q介导的溶血以及C1q与U937细胞表面受体、AIgG的结合均有抑制作用,而a2肽的活性不明显,对C1q的结合活性和溶血活性无影响。结论获得一个更具稳定结构和生物学活性的C1q结合短肽,它能更有效地抑制C1q与免疫复合物结合,从而阻断补体经典途径的激活。
- 胡静谭艳陈政良
- C1q结合十二肽的筛选与初步鉴定被引量:5
- 2004年
- 目的 从噬菌体十二肽库中筛选结合C1q的短肽并进行初步鉴定。方法 以C1q为钓饵蛋白筛选噬菌体十二肽库 ,利用ELISA、U937细胞配体结合抑制试验、多聚IgG(AIgG)竞争抑制试验鉴定阳性克隆 ,再进行单链DNA测序和分析。结果 经 3轮筛选后 ,随机挑选 2 5个噬菌体克隆做ELISA鉴定 ,14个克隆显示与C1q有较强的结合。经过U937细胞配体结合抑制试验和AIgG竞争抑制试验鉴定后 ,将此 14个阳性克隆测序 ,从其展示肽DNA测序结果推导氨基酸序列 ,获得 9条氨基酸序列 :HWDPFSLSAYFP、WTPVRTNPFLLH、NGHLFSLSAYFP、RTQRNSPFFLCP、SPAFHPEHMGRG、SRAFHPFYRGRA、WYEGPFTLQTWP、LTQHNSPFFLLP和TSNPFFLWYPQP。结论 获得结合C1q的一些抑制性短肽 。
- 李文君谭艳陈政良
- 关键词:免疫复合物噬菌体展示肽库
- C1q结合十二肽的活性研究被引量:4
- 2004年
- 目的 研究 5个C1q结合十二肽及其牛血清白蛋白 (BSA)偶联物对C1q的结合活性和溶血活性的影响。方法 人工合成十二肽 ,将其与BSA偶联 ,分别用U937细胞配体结合抑制试验、多聚IgG(AIgG)竞争抑制试验、CH5 0抑制试验测试其生物学活性。结果 游离的线性肽对C1q的结合活性和溶血活性几乎无影响 ,而偶联肽对C1q与U937细胞表面受体、AIgG的结合以及C1q介导的溶血均有抑制作用。结论 本实验获得 5个C1q受体模拟肽 ,它们能抑制C1q与免疫复合物结合 ,从而阻断补体经典途径的激活 。
- 谭艳陈政良
- 关键词:C1Q合成肽
- C1q受体研究进展被引量:3
- 2002年
- 补体分子C1q具有调节各种细胞反应的能力。近年 ,随着C1q功能研究的深入 ,发现许多细胞内或者细胞表面存在结合C1q的蛋白或者受体 ,如C1qRp、gC1qbp、C1qRo2 - 、钙网素 CRT cC1qR 胶凝素受体、CR1。其中某些蛋白除结合C1q外还结合其它配体。
- 李文君陈政良
- 关键词:结合蛋白