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古菌蛋白质SSO6904的双体形式的NMR鉴定: 2012年; 古菌蛋白质SSO6904是最近发现的一个全螺旋结构的、具有弱的钙离子结合活性的蛋白质.在蛋白质纯化过程中,通过凝胶过滤层析发现SSO6904具有稳定的单体和双体形式.1 H NMR谱表明2种形式的核心结构类似.2D1 H-15 N HSQC谱表明单体和双体的结构差异主要处在连接螺旋2和3以及5和6的2个Loop链接区域,这2个Loop链接区域是形成双体的关键区域,而其他区域具有相同的结构.通过结构分析推测并搭建了一种结构域交换的SSO6904双体结构模型.这种稳定的双体形式可能是调节SSO6904功能的一种方式.; 姚宏伟冯银刚王金凤; 关键词：蛋白质结构 HSQC 古菌

突变对嗜热古菌蛋白[P62A]Ssh10b主链构象影响的核磁共振研究: 2008年; 嗜热古菌蛋白Ssh10b突变体[P62A]Ssh10b具有良好的热稳定性.[P62A]Ssh10b的结构测定结果显示,其α2螺旋上残基K48和D51之间形成了一对盐键,而且,突变D51将影响蛋白的热稳定性.为了探索D51的突变对蛋白热稳定性的影响,构建了突变体[D51N/P62A]Ssh10b的质粒,并获得了高纯度的15N和13C双标记[D51N/P62A]Ssh10b.通过对异核三共振NMR实验数据的解析,完成了对[D51N/P62A]Ssh10b的主链共振近乎完全的指认.比较突变以及未突变蛋白质的主链1HN和15N化学位移,在[P62A]Ssh10b的结构基础上进行分析发现,D51N突变显著地影响了α2螺旋骨架构象,并进一步影响到古菌Lβ2α2loop区域、β4的N端区域、Lβ3β4loop的C端区域以及β3与Lβ3β4loop的交界区域.结果表明,由于D51N突变破坏了α2螺旋上K48和D51之间的盐键,影响了[D51N/P62A]Ssh10b的α2螺旋构象,并影响到蛋白的其它相关部位的局部构象,说明[P62A]Ssh10b的高热稳定性可能与其溶液构象密切相关.为进一步运用NMR研究[D51N/P62A]Ssh10b分子结构特性与耐热机制间的关系奠定了基础.; 罗权方显扬邓志威王金凤; 关键词：核磁共振

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国家自然科学基金(30270301)