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上海市医学领军人才项目(LJ06011)

作品数：13 被引量：28H指数：4
相关作者：熊思东徐薇蒋正刚徐林储以微更多>>
相关机构：复旦大学上海医学院上海医学院更多>>
发文基金：上海市医学领军人才项目国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 13篇中文期刊文章

领域

  • 12篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 9篇细胞
  • 5篇病毒
  • 4篇免疫
  • 4篇柯萨奇
  • 3篇小鼠
  • 3篇T细胞
  • 2篇蛋白
  • 2篇增殖
  • 2篇乳腺
  • 2篇乳腺癌
  • 2篇乳腺癌模型
  • 2篇腺癌
  • 2篇巨噬细胞
  • 2篇柯萨奇B3病...
  • 2篇柯萨奇病毒
  • 2篇柯萨奇病毒B...
  • 2篇荷瘤
  • 2篇CCR6
  • 1篇滴鼻免疫
  • 1篇递呈

机构

  • 13篇复旦大学上海...
  • 1篇上海医学院

作者

  • 13篇熊思东
  • 12篇徐薇
  • 6篇蒋正刚
  • 5篇徐林
  • 4篇储以微
  • 4篇李康
  • 3篇郭强
  • 2篇段志坚
  • 2篇王缨
  • 2篇李宝华
  • 2篇高波
  • 2篇岳艳
  • 1篇叶慧燕
  • 1篇邵先安
  • 1篇胡鹏
  • 1篇张瑞华
  • 1篇关庆东
  • 1篇张凤
  • 1篇胡林昆
  • 1篇郑秀娟

传媒

  • 3篇复旦学报（医...
  • 3篇现代免疫学
  • 3篇微生物与感染
  • 2篇中国免疫学杂...
  • 1篇中国癌症杂志
  • 1篇中国肿瘤生物...

年份

  • 3篇2010
  • 3篇2009
  • 5篇2008
  • 2篇2007
共 13 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
Legumain在荷瘤与正常小鼠脾细胞中的差异性表达
2008年
背景与目的:已知新发现的半胱氨酸蛋白酶legumain可能参与肿瘤的发生发展。本研究检测了le-gumain在荷瘤组织及荷瘤与正常小鼠免疫细胞如脾脏T、B和巨噬细胞中的差异表达,为研究legumain在抗肿瘤免疫中的作用提供基础数据。方法:取正常和4T1荷瘤的雌性BALB/c小鼠的肿瘤组织或脾细胞,分离巨噬细胞和T、B淋巴细胞,检测legumain的基因表达水平。结果:在荷瘤小鼠的肿瘤组织和淋巴器官均检测到高表达的legu-main,而且随着肿瘤进展,其表达水平相应提高;legumain除高表达于巨噬细胞外,脾脏中的淋巴细胞,特别是T淋巴细胞,与正常小鼠相比其legumain的表达水平显著升高。结论:荷瘤小鼠的肿瘤组织及其脾脏巨噬细胞和T细胞中高表达legumain,并且与肿瘤的发生发展呈正相关。
郭强李康徐薇储以微熊思东
关键词：LEGUMAINT细胞B细胞
人TRIM22基因真核表达质粒的构建和表达及TRIM22对Jurkat T细胞增殖的影响被引量：4
2008年
研究TRIM22对Jurkat T增殖的影响,探讨TRIM22分子的生物学效应。分离人外周血单个核细胞,获得其细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增人TRIM22基因,经Nhe I和Hind III双酶切后插入pcDNA3.1/myc-His(-)真核表达载体,并对其进行酶切和测序鉴定。将构建好的真核表达质粒pcDNA/TRIM22转染Jurkat T细胞,用Western blot方法鉴定TRIM22蛋白表达情况,用CCK-8试剂检测TRIM22对T细胞增殖的影响,用双荧光素酶报告基因方法检测TRIM22对IL-2基因启动子的转录活性,用半定量RT-PCR方法检测TRIM22对IL-2 mRNA表达水平的影响。结果:成功构建了C端带有myc标记的真核表达质粒pcDNA/TRIM22,质粒转染Jurkat T细胞后能够表达TRIM22蛋白,细胞增殖检测结果显示TRIM22能够降低Jurkat T细胞的增殖达30%左右,报告基因检测结果显示TRIM22能够抑制IL-2启动子活性达20%至50%,过表达TRIM22降低IL-2 mRNA表达水平,这些结果为进一步深入研究TRIM22的生物学特性奠定了基础。
段志坚高波徐薇周倩熊思东
关键词：真核表达细胞增殖IL-2
CVB3感染对星形胶质细胞表达agrin的影响及意义
2007年
目的检测柯萨奇B3病毒(coxsackievirus group B type3,CVB3)感染体外培养的星形胶质细胞后集聚蛋白(agrin)的表达变化及其意义。方法采用免疫细胞化学的方法鉴定培养的星形胶质细胞,在显微镜下观察CVB3感染后的细胞形态,并用RT-PCR方法扩增CVB3RNA的正负链以确证感染成功,用RT-PCR检测CVB3感染细胞后agrin的动态表达变化。用脂质体将agrin反义质粒pcDNA3-As-AG转染到星形胶质细胞,并用RT-PCR检测转染的细胞中agrin的表达。3H-TdR掺入法测定CVB3不同感染时间点的星形胶质细胞裂解液和经agrin反义质粒pcDNA-As-AG转染细胞后的细胞裂解液对T细胞增殖的影响。结果(1)CVB3感染星形胶质细胞后agrin的表达水平下调。(2)病毒感染后随着agrin表达量的降低,星形胶质细胞裂解液对T细胞的活化增殖作用也降低。未转染和空质粒转染的细胞裂解液对T细胞的活化增殖有促进作用,而用反义核酸技术下调星形胶质细胞agrin表达后,星形胶质细胞裂解液对T细胞增殖的促进作用也随之下降,进一步证实agrin表达水平的下调可影响T细胞的活化和增殖。结论CVB3感染星形胶质细胞后agrin表达水平下调,降低对T细胞活化增殖的能力,这可能是CVB3病毒性脑炎中,病毒逃逸机体免疫清除的一种机制。
李宝华蒋正刚徐林李康熊思东
关键词：柯萨奇B3病毒星形胶质细胞
淋巴细胞趋化因子增强柯萨奇病毒DNA疫苗黏膜免疫及预防小鼠心肌炎的作用被引量：1
2010年
本研究在已建立的柯萨奇病毒B3型(CVB3)黏膜疫苗chitosan-pVP1基础上,引入C家族趋化因子,即淋巴细胞趋化因子(LTN),以期诱导更强的黏膜免疫应答,获得更有效的免疫保护作用。将pLTN与pVP1各50μg混合后,与chitosan形成共聚复合物,隔周滴鼻免疫小鼠,共4次;末次免疫后2周,检测血清IgG、粪便IgA及肠系膜淋巴结细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性。同时,以3LD50/0.1mlCVB3腹腔感染小鼠,7d后检测血清肌酸激酶(CK)活性及心肌病理学改变。结果显示,与对照组相比,chi-(pVP1+pLTN)可显著提高CVB3特异性血清IgG水平、粪便IgA水平以及增强肠系膜淋巴结特异性CTL应答。病毒攻击后,chi-(pVP1+pLTN)组心肌炎发病率仅为16.7%,显著低于chi-(pVP1+pcDNA3.1)组的33.3%。心肌组织病理显示,chi-(pVP1+pLTN)组心外膜下仅有轻微炎症,而chi-(pVP1+pcDNA3.1)组除心外膜下有较多淋巴细胞聚集外,心肌内尚有少量炎症浸润和坏死灶。结果提示,LTN与VP1质粒经chitosan共包装后进行滴鼻免疫,可增强CVB3特异性黏膜免疫应答,更有效地预防病毒性心肌炎的发生。
岳艳胡林昆徐薇熊思东
关键词：黏膜疫苗淋巴细胞趋化因子滴鼻免疫
肝素抑制T细胞活化及机制研究被引量：2
2009年
目的:长期临床实践及动物实验研究发现肝素具有一定抗炎作用,本文旨在阐明其机制是否与抑制T细胞活化过程,以及影响T细胞与抗原递呈细胞间的免疫突触的形成有关。方法:本研究通过氚掺入法检测肝素对T细胞活化增殖的影响,包括丝裂原ConA,超抗原SEA作为刺激剂,此外还有特异性抗原肽;加入外源性IL-2检测肝素抑制T细胞活化与IL-2作用的关系。流式细胞术检测T细胞活化表面标志CD62L的变化;肝素干预下T细胞与抗原递呈细胞间的相互作用,以及T细胞肌动蛋白的聚集情况。结果:在肝素干预下,ConA活化T细胞增殖明显降低并体现出剂量依赖关系,另外SEA、混合淋巴细胞反应以及特异性抗原肽刺激T细胞的增殖也不同程度受到肝素的抑制,外源性IL-2不能挽救被抑制的T细胞。流式细胞检测结果提示肝素干预组T细胞上CD62L表达明显高于对照组。肝素不影响T细胞与抗原递呈细胞之间的作用,也不影响T细胞骨架重排,即免疫突触的形成。结论:肝素抑制T细胞活化及增殖,可能是其抗炎机制的一部分,但并非通过影响T细胞与抗原递呈细胞之间的作用或T细胞活化过程中骨架重排及突触形成。
张凤张瑞华徐薇储以微邵先安熊思东
关键词：肝素T细胞抗原递呈细胞肌动蛋白
4T1荷瘤小鼠肿瘤相关巨噬细胞(TAM)的表型及吞噬功能的研究被引量：4
2009年
目的:研究小鼠乳腺癌实验动物模型中,荷瘤晚期肿瘤相关巨噬细胞的表型和功能,并探讨其与M2型巨噬细胞的关系。方法:从4T1荷瘤4周的雌性BALB/c小鼠中获取肿瘤相关巨噬细胞,用RT-PCR方法检测其巨噬细胞相关分子CCL3、CCL22、iNOS和Arg I的表达水平,用FACS检测巨噬细胞中CD16/32+和CD206+细胞所占比例,并通过酵母菌吞噬试验评估其功能。结果:肿瘤相关巨噬细胞与荷瘤小鼠的脾脏巨噬细胞相比,表达较高水平的CCL22和CD206,并且对酵母菌的吞噬能力显著下降。结论:4T1荷瘤4周小鼠肿瘤相关巨噬细胞在表型和功能上倾向于替代性活化的巨噬细胞。
郭强李康徐林蒋正刚徐薇储以微熊思东
关键词：肿瘤相关巨噬细胞
CD40L在M2型巨噬细胞类型转换中的作用被引量：3
2008年
目的检测不同CD40L表达水平的脾细胞对巨噬细胞表型和功能的影响,探讨通过调控CD40L的表达改变巨噬细胞的类型。方法贴壁分离正常BALB/c小鼠的腹腔巨噬细胞。将腹腔巨噬细胞或经IL-4刺激的腹腔巨噬细胞,分别与体外培养2d后获得的CD40Llow脾细胞和Ionomycin与PMA诱导的CD40Lhigh脾细胞共孵育,24h后检测M1和M2型巨噬细胞相关基因的表达,并以硝酸还原酶法检测NO分泌水平。结果与CD40Llow脾细胞共孵育的巨噬细胞CCL22、Fizz1和Ym1表达水平较高,但只分泌较低水平的NO,而与CD40Lhigh脾细胞共孵育的巨噬细胞表达较高水平的CCL3并分泌高水平的NO,而且CD40Lhigh脾细胞可使M2型巨噬细胞表型相关基因明显下调。结论CD40Lhigh脾细胞使巨噬细胞倾向于M1型极化,并且能使M2型巨噬细胞向M1型转换。
郭强李康徐薇关庆东储以微熊思东
关键词：巨噬细胞M2型巨噬细胞CD40L一氧化氮
抗病毒固有免疫分子TRIM22 C端SPRY结构域对其转录、翻译及亚细胞定位的影响被引量：4
2010年
本文旨在探讨TRIM22 C端SRPY结构域对其转录、翻译及亚细胞定位的影响。以野生型TRIM22真核表达质粒为模板,扩增出C端SPRY结构域缺失的TRIM22基因片段,并将其克隆入真核表达质粒pcDNA3.1。将野生型和突变型TRIM22真核表达载体分别转染高分化人肝癌细胞株HepG2。通过反转录-聚合酶链反应检测其mRNA表达水平,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测其蛋白表达水平,并通过间接免疫荧光法检测其亚细胞内定位。结果成功构建了C端SPRY结构域缺失的TRIM22真核表达质粒。转染HepG2细胞后,TRIM22 SPRY结构域缺失突变体在转录和翻译水平上均与野生型TRIM22无明显差异,但TRIM22 SPRY结构域缺失突变体完全丧失了核定位能力,这为进一步研究SPRY结构域在TRIM22抗病毒过程中所发挥的作用及机制提供了有益的启示。
高波段志坚徐薇熊思东
关键词：突变亚细胞定位
小鼠骨髓瘤细胞分泌的免疫球蛋白对其自身增殖作用的体外研究
2008年
为了研究小鼠骨髓瘤细胞系P3X63Ag8所分泌的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)对其自身增殖的影响,首先用ELISA方法检测P3X63Ag8细胞培养上清中的Ig含量;而后以不同浓度的P3X63Ag8细胞培养上清作用于P3X63Ag8细胞,通过3H-TdR掺入和MTT比色法检测细胞增殖水平,并比较P3X63Ag8细胞与其他肿瘤细胞对该培养上清的反应性;最后以抗小鼠IgG抗体中和P3X63Ag8细胞分泌的Ig,观察其对细胞增殖的影响。结果显示,P3X63Ag8细胞分泌小鼠IgG;不同浓度的P3X63Ag8细胞培养上清均可促进细胞增殖,并具有一定的剂量依赖性;与P3X63Ag8细胞不同,小鼠乳腺癌细胞系4T1的增殖不受P3X63Ag8细胞培养上清的影响;以抗小鼠IgG抗体中和P3X63Ag8细胞分泌的Ig,可部分抑制P3X63Ag8细胞增殖。该结果表明,小鼠骨髓瘤细胞分泌的Ig可能具有促进骨髓瘤细胞增殖的能力,这为我们更加深入理解多发性骨髓瘤的发病机制提供了一定的实验依据。
胡鹏郑秀娟徐薇王缨熊思东
关键词：骨髓瘤免疫球蛋白
CD4^+CD25^+CCR6^+调节性T细胞在小鼠乳腺癌模型中对CD8^+T细胞的抑制作用被引量：2
2009年
目的:观察CD4+CD25+CCR6+调节性T细胞(简称CCR6+Tregs)体内对CD8+T细胞功能的抑制作用,并探讨其与肿瘤免疫逃逸的关系。方法:建立4T1乳腺癌细胞荷瘤裸鼠模型,FACS分选CCR6+Tregs,检测其Foxp3的表达;FACS分选4T1特异性CD8+T细胞,CFSE标记后分别与CCR6+Tregs或CCR6-Tregs共同过继转输入4T1荷瘤裸鼠体内,观察荷瘤裸鼠肿瘤生长情况和小鼠存活时间;FACS检测肿瘤组织中CD8+T细胞的增殖、细胞因子IFN-γ的产生和颗粒酶B的表达情况。结果:CCR6+Tregs和CCR6-Tregs均高表达Foxp3;CCR6+Tregs和CD8+T细胞共转输组4T1荷瘤裸鼠肿瘤的生长明显快于CCR6-Tregs共转输组和CD8+T细胞单转输组,同时该组荷瘤裸鼠生存时间也明显缩短(P<0.05);CCR6+Tregs和CD8+T细胞共转输组CD8+T细胞的增殖、IFN-γ的产生和颗粒酶B的表达均明显低于CCR6-Tregs共转输组和CD8+T细胞单转输组(P<0.05)。结论:CCR6+Tregs在体内可以有效抑制CD8+T细胞的功能,其在肿瘤免疫逃逸和肿瘤发生、发展中发挥重要作用。
徐林徐薇蒋正刚熊思东
关键词：调节性T细胞CCR6过继转输
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