国家自然科学基金(20876027)
- 作品数:9 被引量:61H指数:6
- 相关作者:张树彪赵轶男王冰崔韶晖杨宝灵更多>>
- 相关机构:大连民族学院辽宁师范大学大连理工大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”辽宁省科技厅博士启动基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学环境科学与工程理学更多>>
- 阳离子脂质体转染Hela细胞的实验被引量:14
- 2009年
- 背景:基因载体是基因治疗中重要的影响因素,阳离子脂质体细胞毒性低,转染效率高,是一种很有前景的基因转染载体。目的:评价两种阳离子脂质体介导基因转染宫颈癌细胞的转染效果,优化它们对宫颈癌细胞的转染条件。设计、时间及地点:以Hela细胞为观察对象,分组设计。实验于2008-03/06在大连民族学院生命科学学院国家民委-教育部重点实验室完成。材料:质粒pGFP-N2购自Clontech公司,Hela细胞由大连民族学院的实验室保存。方法:首先采用DNA延滞实验考察阳离子脂质体与DNA的结合能力,然后用进行细胞转染实验研究脂质体的转染效率,最后通过四甲基偶氮唑盐法考察脂质体对细胞的毒性。主要观察指标:采用DNA延滞实验观察阳离子脂质体Lipofectamine2000和DOTAP与DNA的结合能力,以报告基因(绿色荧光蛋白基因pGFP-N2),分析阳离子脂质体Lipofectamine2000和DOTAP转染Hela细胞转染效率和细胞毒性。结果:Lipofectamine2000和DOTAP与DNA均有很强的结合力;以绿色荧光蛋白基因为报告基因,Lipofectamine2000转染率较高;当Lipofectamine2000与DNA质量比为3∶1时,转染效率最高,约72%,是DOTAP转染细胞最高活性的2.5倍;在最佳转染剂量时,2种试剂的细胞存活率均在75%以上,Lipofectamine2000的毒性相对较小。结论:对Hela细胞而言,Lipofectamine2000较DOTAP具有更高的转染效率和较低的细胞毒性。
- 段艳王冰崔韶辉赵不凋姜云霞杨颖姜慧明张树彪
- 关键词:LIPOFECTAMINE转染细胞毒性HELA阳离子脂质体
- Novel gemini cationic lipids with carbamate groups for gene delivery
- Among non-viral vectors, cationic liposomes- and cationic polymer-based vectors are the most heavily-investiga...
- ZHAO YinanZHOU QuanZHANG Shubiao
- 关键词:GEMINI
- 文献传递
- 阳离子脂质体介导基因转染肿瘤细胞被引量:9
- 2013年
- 使用基因转运载体运载肿瘤细胞进行转染是基因治疗的关键环节之一。Lipofectamine 2000和DOTAP作为商品转染试剂,具有较高的转染效率。为了进一步发掘其作为基因转运载体的应用潜力,该文研究了Lipofectamine 2000和DOTAP的粒径、Zeta电位及形态,并分别与绿色荧光蛋白基因(pGFP-N2)、荧光素酶基因(pGL3)结合,形成脂质体/DNA复合物,通过载入人喉癌细胞(Hep-2)和人肺癌细胞(NCI-H460),考察了其转染效率和细胞毒性。结果表明,脂质体Lipofectamine 2000与DOTAP都能有效压缩DNA,形成复合物。Lipofectamine 2000与DOTAP相比,转染效率高,与DNA最佳转染比例范围为2:1~4:1。毒性实验显示,在N/P大于3/1时,Lipofectamine2000与DOTAP对癌细胞具有一定的细胞毒性。细胞种类对脂质体的转染效率有很大影响,Lipofectamine 2000对Hep-2细胞的转染效率比NCI-H460高。
- 赵轶男张树彪崔韶晖张传敏张淑芬
- 关键词:阳离子脂质体脂质体DNA复合物细胞毒性
- RNA Interference Mediated by a Peptide Cationic Liposome
- Peptide cationic lipids have drawn great attention as gene delivery systems because of their good biocompatibi...
- Yuhong ZhenWenqi HanYinan ZhaoYameng JiangYanyan ZhuShubiao Zhang
- 阳离子端基肽类脂基因载体的合成
- 阳离子脂质体作为一种重要的非病毒基因载体,具有一定细胞毒性的缺点,在基因转运方面具有广阔的应用前景。选用脂质体DOTAP和Lipofectamine 2000为基因载体,考察其粒径、Zeta电位及形态,并与荧光素酶基因(...
- 赵轶男崔韶晖陈会英张传敏张树彪
- 关键词:阳离子脂质体细胞毒性
- 两种阳离子脂质体介导基因转染的比较研究被引量:8
- 2009年
- 基因治疗作为一种革命性的治疗手段,对免疫缺陷病、肿瘤等多种疾病的疗效已得到验证。而基因治疗若要大规模进入临床治疗,还需进行很多基础性的研究。其中高效、稳定、无毒、具有靶向性的基因导入载体的研究是基因治疗基础研究进一步深入的关键。基因导入载体主要分为病毒型和非病毒型两种。目前大量应用的病毒类载体的缺陷是免疫原性高、容量小、制备困难、成本较高,而非病毒类基因载体可以克服这些缺点,作为非病毒类基因载体中重要的一种——阳离子脂质体因其操作简便,转染的安全性、高效性和通用性而得到广泛应用。
- 支德福王冰崔韶辉杨宝灵赵不凋赵轶男姜云霞于世钧张树彪
- 关键词:基因载体阳离子脂质体LIPOFECTAMINEDOTAP转染
- 阳离子类脂CPA12的细胞毒性研究
- 今年来,随着时代的进展和科学的进步,对于基因治疗的研究已经有了巨大成果。作为最有效的基因载体之一,阳离子脂质体的研究倍受人们的关注。但目前所合成的大部分阳离子脂质体,其本身对于细胞存在毒性,从而影响了阳离子脂质体的临床使...
- 关迪张传敏崔韶晖陈会英张树彪
- 关键词:CASPASE细胞凋亡阳离子脂质体
- 多肽型阳离子脂质体的研究进展被引量:6
- 2010年
- 多肽型阳离子脂质体作为一种重要的非病毒基因载体,克服了其他阳离子脂质体转染效率低、具有一定细胞毒性的缺点,在基因转运方面具有广阔的应用前景。在近年来多肽型阳离子脂质体研究的基础上,论述了多肽型阳离子脂质体在类脂的结构设计、脂质体制备及其在基因转运方面应用的研究现状,展望了多肽型阳离子脂质体的发展方向。
- 赵轶男张树彪崔韶晖王胜男孙杨
- 关键词:多肽阳离子脂质体非病毒载体
- 胆固醇嵌入式阳离子脂质体运载基因研究被引量:7
- 2014年
- 阳离子脂质体是一种有临床应用潜力的抗肿瘤药物递药系统,助类脂能起到稳定双层膜和降低阳性成分毒性的作用,同时提供阳性类脂的细胞渗透功能。为了进一步发掘助类脂的应用潜力,该文采用胆固醇(cholesterol)作为助类脂制备阳离子脂质体,测定了脂质体的粒径及Zeta电位,脂质体的平均粒径为100-140 nm,Zeta电位为45-60 mV。脂质体分别与绿色荧光蛋白基因(pGFP-N2)、荧光素酶基因(pGL3)结合,形成脂质体/DNA复合物,通过载入人喉癌细胞(Hep-2),考察了其转染效率和细胞毒性。结果表明,阳离子类脂与胆固醇以1:1、1:2和1:4摩尔比例混合制备脂质体均能高效转染Hep-2细胞。毒性实验显示,阳离子类脂单独存在时对癌细胞具有一定的细胞毒性,随着胆固醇的加入,脂质体对细胞的毒性明显减小,与商品试剂DOTAP和Lipofectamine 2000相当。
- 赵轶男张树彪崔韶晖张淑芬
- 关键词:阳离子脂质体胆固醇细胞毒性
- 表面活性剂对斜生栅藻的生态毒性研究被引量:5
- 2011年
- 以斜生栅藻(Scenedesmus obliquus)为受试生物,采用藻类急性毒标准方法研究十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、十二烷基苯磺酸钠(LAS)和辛基苯基聚氧乙烯醚(TX-100)3种较常用的表面活性剂对藻类的生态毒性。通过斜生栅藻的密度及过氧化物酶活性的测定对其作用机制进行探讨。结果表明,在EC_(50)附近,表面活性剂浓度越大其毒性越强,不同离子型表面活性剂对斜生栅藻毒性从大到小为阳离子(CTAB)、阴离子(LAS)、非离子(TX-100)。表面活性剂毒性作用机制主要是被吸附在藻细胞的磷脂双分子膜结构表面,从而引起膜结构的破坏和功能的丧失,进而导致细胞死亡。
- 申琼王冰杨宝灵王塔娜杨阳姜长阳张树彪
- 关键词:斜生栅藻毒性机理CTABLASTX-100