国家自然科学基金(39370270)
- 作品数:9 被引量:118H指数:5
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- 川芎有效成分对猪冠脉平滑肌细胞钙激活钾通道的影响
- 目的川芎嗪(Ligustrine,Lig)、川芎素(Sodium Ferulic,SF)是中药川芎的有效成分。器官水平证明二者可降低冠脉阻力,增加冠脉血流,改善心肌血供等。钙激活钾通道(calcium-activated...
- 闫福曼曾晓荣杨艳刘智飞贺军周文李妙龄裴杰
- 关键词:膜片钳技术钙激活钾通道
- 文献传递
- 原代培养猪冠状动脉平滑肌的电压依赖和钙激活钾通道(英文)被引量:1
- 2001年
- 目的 :研究原代培养的猪冠状动脉平滑肌电压依赖性和钙激活外向钾通道的特性。方法 :离子通道电流采用膜片钳技术进行记录。结果 :在内面向外式膜片构型 ,当膜内外K+ 浓度梯度类似生理状态时 ,该通道单位电导值约为 10 0pS ,而当膜内外K+ 浓度为对称的 140mM浓度时 ,该通道单位电导值约为 2 70pS。其平均电流显示该通道具时间和电压依赖性激活特性 ,而无任何时间和电压依赖性失活特性。另外 ,通道的开放时间常数和开放概率随除极及胞内Ca2 + 的增加而显著增加。通过用EGTA降低胞浆内Ca2 + 浓度 ,可使外向电流抑制。动力学分析显示通道激活时存在一种开放状态和至少两种关闭状态。四乙胺 (TEA)可在胞外侧阻断该电流 ,但高达 15mM的 4-氨基吡啶 (4-AP)在胞内外都对通道无影响。在全细胞构型 ,对细胞膜进行除极可引出宏观外向电流。随着细胞的除极 ,该电流的激活时间常数逐渐缩短 ,并显示快速激活动力学特性。结论 :在原代培养的猪冠状动脉平滑肌上存在有电压依赖和Ca2 + 激活的K+ 选择性离子通道。该类通道具有非常高的单位电导值 ,除极时快速开放 ,对胞内Ca2 + 高度敏感 。
- 曾晓荣Yutaka NakayaIsao Inoue
- 关键词:血管平滑肌膜片钳钙激活性钾通道失活原代培养
- 酶分离猪冠脉平滑肌细胞钙激活钾通道全细胞记录电学特性研究被引量:14
- 2003年
- 目的 :观察急性酶分离猪冠脉平滑肌全细胞钙激活K+ 电流 (IKCa)特性及摸索可行的记录方法。方法 :采用常规膜片钳全细胞记录技术。结果 :分离的猪冠脉平滑肌细胞 (来自 15只猪的 4 7个细胞 ,膜电容 32 .3±8.8pF)上的主要K+ 电流为IKCa,此电流具电压依赖性和胞内游离Ca2 + 依赖性。IKCa选择性阻断剂Charybdotoxin(ChTX ,12 5~ 2 5 0× 10 - 9mol.L- 1 )可使外向电流降低 6 8± 8% (n =5 )。 10~ 2 0× 10 - 3mol.L- 1 TEA可阻断 74± 5 % (n =7)的外向电流。结论 :猪冠脉平滑肌细胞全细胞K+ 电流主要成分为IKCa,它与其它组织细胞报道的情况类似而又有独自的特点。我们的数据为猪冠脉平滑肌全细胞K+ 电流特性的认识提供了第一手资料 。
- 杨艳曾晓荣刘智飞周文李妙龄胡平裴杰
- 关键词:钙激活钾电流蝎毒
- 大鼠血清对猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的作用被引量:1
- 2005年
- 目的研究大鼠血清对猪冠状动脉平滑肌细胞(SMC)钙激活钾通道(KCa)的作用,为血清药理学方法与膜片钳技术结合应用于相关离子通道机制研究奠定基础。方法用EGTA处理血清中的Ca2+、Mg2+等离子,用膜片钳单通道技术研究处理后的血清对SMC上的KCa的影响。结果处理后的血清浓度依赖性的不可逆性的阻断SMC上的KCa。在细胞贴附式膜片(cell-attached patch)下,血清10、50、100、150μl·ml-1,使通道开放概率从0.0285±0.0102分别降低到0.0205±0.0046(n=7,P>0.05)、0.0145±0.0007(n=7,P<0.05)、0.0045±0.0002(n=7,P<0.01)、0(n=7,P<0.01)。在内面向外式膜片(inside-out patch)下,血清10、50、100、150μl·ml-1,使通道开放概率从0.3821±0.0491分别降低到0.1298±0.0331(n=7,P<0.05)、0.0405±0.0048(n=7,P<0.05)、0.0117±0.0011(n=7,P<0.01)、0.0008±0.0005(n=7,P<0.01)。随着血清浓度的增加,通道活动逐步减少至完全抑制,这种作用冲洗后不可逆。结论血清对猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道有一定阻断作用。
- 程俊杨艳曾晓荣刘智飞蔡芳周文李妙龄裴杰
- 关键词:血清膜片钳技术钙激活钾通道
- 丹参酮ⅡA磺酸钠对原代培养猪冠脉平滑肌ATP敏感钾通道、钙激活钾通道的影响被引量:5
- 2000年
- 目的 :探讨丹参酮ⅡA磺酸钠 (DS 2 0 1)对原代培养猪冠脉平滑肌上ATP敏感的的钾通道 (KATP)、钙激活钾通道 (KCa)的作用。方法 :采用膜片钳单通道电流记录技术进行定量研究。结果 :KATP(33 15pS)可被 30 μmol/L优降糖特异性阻断 ,而KCa(2 46 .5 3pS)则表现出明显的钙离子依赖性和TEA阻断作用等特点。内面向外式膜片下 ,浴液中加入DS 2 0 1可激活KATP及Ca。膜电位为 +5 0mV时 ,5、10、15 μmol/LDS 2 0 1分别使KATP开放概率 (NPo)从0 0 0 4± 0 0 0 1增加到 0 44 9± 0 0 0 4(n =5 ,P <0 0 1)、0 6 0 2± 0 0 32 (n =5 ,P <0 0 1)、0 90 4± 0 10 5 (n =5 ,P <0 0 1) ,2 0 μmol/LDS 2 0 1使KCa的NPo从 0 0 0 0增加到 0 0 11± 0 0 0 2 (n =3,P <0 0 1)。结论 :DS 2 0 1对KATP和KCa均有直接激活作用。
- 张洁曾晓荣杨艳刘智飞郭勇贺军周文
- 关键词:ATP敏感钾通道钙激活钾通道
- 丹参酮ⅡA磺酸钠对原代培养猪冠脉平滑肌钙激活钾通道的影响(英文)被引量:22
- 2000年
- 目的 :研究丹参酮ⅡA磺酸钠 (DS 2 0 1)对培养猪冠脉平滑肌细胞上钙激活性钾通道的作用。方法 :采用膜片钳单通道记录技术 ,观察给药前后通道特性变化。结果 :证实 :①猪冠脉平滑肌钙激活钾通道的单通道电导值高 ,为 2 91 74± 17 6 3pS。对膜电位变化及胞内钙离子浓度变化敏感。能被 5~ 2 0mmol/LTEA所阻断。②在细胞贴附式膜片方式下 ,5~ 30 μmol/L的DS 2 0 1对通道均无明显作用 ;而在内面向外式膜片方式下 ,5~ 2 0 μmol/L的DS 2 0 1对通道表现出明显的激活效应。结论 :DS 2 0
- 张洁曾晓荣杨艳刘智飞
- 关键词:钙激活钾通道冠脉平滑肌细胞
- 丹参酮ⅡA磺酸钠和丹参素对猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的激活机制被引量:47
- 2005年
- 目的研究丹参酮ⅡA磺酸钠(DS-201)和丹参素(DS-182)的冠状动脉舒张作用除了已知的机制外,是否还与钙激活钾通道(KCa)有关。方法猪冠脉平滑肌细胞贴附式和内面向外式膜片钳单通道电流记录技术。结果DS-201和DS-182均可激活冠脉平滑肌细胞KCa,但DS-201在内面向外膜片方式下激活KCa;而DS-182在细胞贴附膜片方式下激活KCa。结论DS-201和DS-182激活KCa的作用机制不同。DS-201能直接激活KCa,而DS-182则可能需要一系列胞内过程。这种差异可能与二者的结构和溶解性质不同有关。
- 张洁曾晓荣杨艳刘智飞
- 关键词:丹参素钾通道冠状血管膜片钳技术
- 川芎嗪对猪冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道的作用被引量:29
- 2006年
- 本工作旨在研究川芎嗪对猪冠状动脉平滑肌细胞钾通道的作用,为阐明其扩张冠状动脉血管的机制提供实验依据。采用膜片钳细胞贴附式和内面向外式记录方式观察川芎嗪对猪冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(large-conductance Ca2+- activated potassium channels,BKCa channels)的作用,分别用蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)抑制剂H-89和蛋白激酶G (protein kinase G,PKG)抑制剂KT-5823处理细胞,再观察川芎嗪对BKCa通道作用的变化。结果表明在研究的0.73-8.07 mmol/L浓度范围,川芎嗪可以剂量依赖性地激活BKCa通道,使通道的开放概率从(0.01±0.003)增加到(0.03±0.01)-(.21± 0.18)(P<0.01,n=10),使通道平均关闭时间从(732.33±90.67)ms降低到(359.67±41.30)-(2.96±0.52)ms(P<0.01, n=10)。川芎嗪的这种激活作用在浴液游离钙离子浓度接近0 mmol/L时也存在。PKA的特异性抑制剂H-89(3 μmol/L)和 PKG的特异性抑制剂KT-5823(1 μmol/L)对川芎嗪激活BKCa通道的作用无影响。以上结果提示:川芎嗪能直接激活冠状动脉平滑肌BKCa通道,这种作用可能是川芎嗪扩张冠状动脉血管的一种重要机制。
- 杨艳艳杨艳曾晓荣刘智飞蔡芳李妙龄周文裴杰
- 关键词:川芎嗪大电导钙激活钾通道猪冠状动脉平滑肌细胞膜片钳技术
- 猪冠状动脉平滑肌细胞急性酶分离及在离子通道研究中的应用被引量:6
- 2001年
- 目的 :建立一种猪冠状动脉平滑肌细胞急性酶分离法并在分离的细胞上研究其离子通道特性。方法 :采用木瓜蛋白酶 ,胶原酶和透明质酸酶分离猪冠状动脉平滑肌细胞 ,用膜片钳单通道记录法记录通道电流。结果 :该方法分离过程简单 ,所获细胞数量多 ,形态正常 ,在这些细胞上容易记录到正常的KCa电流。结论 :应用本方法易得到单个活性正常的 。
- 李妙龄杨艳曾晓荣刘智飞裴杰
- 关键词:冠状动脉平滑肌离子通道
- 镁对心血管系统调控作用的研究进展
- 2001年
- 贺军曾晓荣
- 关键词:镁心血管系统心肌电活动