国家自然科学基金(81000700) 作品数:14 被引量:40 H指数:3 相关作者: 周炳荣 骆丹 郭娴菲 蔡宝祥 毛薇 更多>> 相关机构: 江苏省人民医院 宁波市医疗中心李惠利医院 吴江市第一人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 电子电信 生物学 更多>>
外用脂肪干细胞培养上清液对二氧化碳点阵激光焕肤术后伤口愈合的影响 被引量:11 2013年 目的探讨局部外用脂肪干细胞培养上清液在二氧化碳点阵激光焕肤术后伤口愈合过程中的作用。方法 9名受试者的双侧前臂内侧分别接受二氧化碳点阵激光治疗。随机选择受试者一侧前臂激光治疗处外敷脂肪干细胞培养上清液,另一侧则外敷DMEM细胞培养基。分别在上述处理后第1,4,7,14,21天检测受试部位经皮水分丢失、皮肤颜色及皮肤弹性。结果经过局部外用脂肪干细胞培养上清液一侧的红斑指数、黑色素指数和经皮水分丢失均显著低于对照侧。而皮肤弹性与对照侧差异无统计学意义。结论局部应用脂肪干细胞培养上清液是促进二氧化碳点阵激光焕肤术后伤口愈合和减少不良影响的一种有效方法。 周炳荣 许阳 徐妍 王影 朱丰 Felicia Permatasari 吴迪 尹志强 骆丹关键词:伤口愈合 调节性T细胞在特应性皮炎中的作用 2013年 调节性T细胞是一类具有免疫调节作用的T细胞亚群,主要通过细胞间直接接触和间接接触发挥免疫抑制作用,参与机体自身免疫耐受的形成。特应性皮炎是一种常见的慢性复发性炎症性皮肤病,发病机制复杂。对特应性皮炎发病机制的研究主要集中在Th2细胞,最近的研究发现,调节性T细胞在特应性皮炎中发挥了重要作用。研究调节性T细胞在特应性皮炎患者从儿童到成人期的变化,可以更好地探讨其在疾病发病过程中的作用并提示新的治疗方法。 马立文 周炳荣 骆丹关键词:皮炎 特应性 T淋巴细胞 调节性 中波紫外线诱导小鼠皮肤光损伤中miRNA146a表达的研究 被引量:3 2011年 目的 探讨中波紫外线(UVB)诱导光损伤小鼠皮肤中miRNA146a表达的变化.方法 以C57/BL6小鼠为研究对象,分时间组和剂量组,剂量组分别以30、60、90、180、270 mJ/cm2 UVB照射小鼠背部皮肤,24 h后取材;时间组以180 mJ/cm2 UVB照射小鼠背部皮肤后,取1、12、24、48 h为检测时点.采用实时荧光定量PCR检测miRNA146a的表达水平,同时利用在线数据库targetscan等预测靶基因,并用Gostat软件对其进行功能分析.免疫组化技术检测可能与其功能相关的信号转导通路的关键蛋白STAT3,初步探讨其功能.结果 UVB照射后,空白组,30、60、90、180、270 mJ/cm2剂量组miRNA146a的表达水平分别为0.01158±0.00098、0.01083±0.00104、0.00872±0.00031、0.00851±0.00033、0.00810±0.00057、0.00770±0.00031,与UVB的辐射剂量呈负相关(r=-0.83,P〈0.05);而在时间组中,UVB照射1、12、24、48 h后miRNA146a的表达水平分别为0.00730±0.00036、0.00805±0.00035、0.00810±0.00057、0.00837±0.00039,与对照组相比均有下调(P〈0.05).Gostat分析显示,miRNA146a主要与细胞生长分化以及多种信号转导途径相关.免疫组化结果提示,在高剂量UVB辐射时,磷酸化STAT3表达更为强烈.结论 miRNA146a可能在UVB诱导的光损伤机制中具有关键作用,主要体现与炎症负调控有关,可能通过JAK-STAT3信号转导途径起作用. 华丽娟 李巍 周炳荣 骆丹关键词:微RNAS STAT3转录因子 UVB suppresses PTEN expression by upregulating miR-141 in HaCaT cells 被引量:2 2011年 MicroRNAs (miRNAs) are 21 to 24 nucleotide, non-coding RNA molecules that post-transcriptionally regulate the expression of target genes. Ultraviolet B (UVB) radiation has been shown to inhibit phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10 (PTEN) expression in HaCaT cells through an unknown mechanism. In this study, we investigated whether miR-141 can regulate UVB exposure-mediated inhibition of PTEN expression. Real-time RT-PCR, annexin V/fluorescein isothiocyanate staining, Western blotting and anti-miRNA oligonucleotide transfection were employed in this study. We found that upregulation of miR-141 expression after UVB irradiation was inversely correlated with PTEN expression levels in HaCaT cells. Furthermore, miR-141 expression increased apoptosis, while anti-miR-141 partly restored PTEN expression and reversed the pro-apoptosis effect of UVB. UVB suppresses the expression of PTEN by upregulating miR-141 in HaCaT cells. Therefore, miR-141 is a potential gene therapy target for UVB-induced photodamage. Wei Li Wu Di Lijuan Hua Bingrong Zhou ze Guo Dan Luo关键词:PTEN UVB APOPTOSIS 中波紫外线诱导小鼠皮肤光损伤中miRNA141表达的研究 2013年 目的探讨中波紫外线(UVB)诱导光损伤小鼠皮肤中miRNAl41表达的变化。方法以C57/BL6小鼠为研究对象,实验分空白组及30、60、90、180、270mJ/cmzUVB剂量组,单次照射小鼠背部去毛皮肤,24h后取照射部位皮肤,采用实时定量PCR检测各组miRNAl41的表达水平,同时利用在线数据库TargetScan等预测靶基因,并用Gostat软件对其进行功能类聚分析,通过石蜡切片HE染色观察各组小鼠皮肤的病理学变化,并结合免疫组化技术检测人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)蛋白的表达水平。利用SPSS13.0软件进行统计学分析,组间差异比较采用方差分析。结果UVB照射后,空白组、30、60、90、180、270mJ/cm^2UVB各组miRNAl41的相对表达量分别为2.1354±0.4289、2.4333±0.2517、2.9328±0.3126、3.4125±0.3606、4.5667±0.4014、6.7428±0.5158,miRNAl41的表达水平与UVB照射剂量呈正相关(r=0.992,P〈0.01)。Gostat分析显示,miRNAl41下游调控的靶点基因主要与信号转导、转录调节等相关。免疫组化结果提示,随着UVB照射剂量的增高,PTEN蛋白的表达水平逐渐下降。结论miRNAl41可能在UVB诱导的光损伤机制中发挥作用,且可能与炎症反应有关,PTEN在急性光损伤的炎症反应中可能。 李巍 华丽娟 周炳荣 骆丹关键词:微RNAS 紫外线 PTEN磷酸水解酶 丹参酮ⅡA磺酸钠抗金黄地鼠皮脂腺增生的研究 2011年 目的探讨丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)外用对动物模型皮脂腺增生的影响。方法选用成年雄性金黄地鼠侧腹皮脂腺斑作为动物模型,采用自身对照法,分别予丹参酮ⅡA磺酸钠、生理氯化钠溶液外涂一侧皮脂腺斑,一天3次,随机分用药0、10、20、30d4个时间组。在各时间点用游标卡尺测定两侧皮脂腺斑的面积。HE染色法观察皮脂腺斑组织结构的变化,取组织切片用免疫组化方法检测皮脂腺细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,TUNEL法检测皮脂腺细胞的凋亡情况。结果用药前,两侧皮脂腺斑大小比较差异无统计学意义(P〉0.05),皮脂腺结构完整,排列紧密,皮脂腺细胞的增殖与凋亡比较差异均无统计学意义(P〉0.05)。随着用药时间的延长,与生理氯化钠溶液对照侧比较,STS侧金黄地鼠皮脂腺斑的面积缩小(P〈0.05);皮脂腺数目减少,体积变小,排列疏松,用药至30d时,皮脂腺呈明显萎缩状态;皮脂腺细胞PCNA表达明显下调(P〈0.01),用药至10d、20d时更为明显(P〈0.01);皮脂腺细胞凋亡亦增加(P〈0.01),用药至20d时凋亡显著(P〈0.01),且皮脂腺中央部细胞的凋亡较周围更为明显。结论丹参酮ⅡA磺酸钠能缩小金地鼠皮脂腺斑的面积,改变皮脂腺斑的显微结构,可抑制皮脂腺增生。 黄秋红 周炳荣 郭娴菲 骆丹关键词:丹参酮 皮脂腺 增生 寻常 双氢睾酮对HaCaT细胞SREBP-1c表达的影响 被引量:2 2012年 目的探讨双氢睾酮(DHT)在HaCaT细胞固醇调控元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)表达中的作用。方法体外培养HaCaT细胞,分为4组,对照组不加任何刺激因素,DHT组分别加入3种不同浓度的DHT,LY294002十DHT组在加入50txmol/LP13K抑制剂(LY294002)预处理40min后加入100nmol/LDHT,PD98059+DHT组即在加入50Ixmol/LMEK抑制剂(PD98059)预处理40rain后加入100nmol/LDHT。用实时定量PCR和Western印迹法检测DHT对HaCaT细胞SREBP-1cmRNA和蛋白表达的影响。Western印迹法检测DHT作用于HaCaT细胞后蛋白激酶B(AKT)、胞外信号调控激酶(ERK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、c—Jun氨基末端激酶(JNK)的磷酸化情况。结果DHT可呈浓度依赖性上调HaCaT细胞SREBP-1cmRNA和蛋白的表达,并诱导AKT、ERK的磷酸化,但对p38、JNK的磷酸化无明显激活作用。LY294002预处理后HaCaT细胞SREBP-1cmRNA的表达较单纯DHT组明显降低(t=9.406,P〈0.05);SREBP-1蛋白水平降为0.7113±0.0313,与单纯DHT组2.2577±0.0601比较,差异有统计学意义(t=39.498,P〈0.05)。而PD98059预处理后,SREBP-1emRNA和蛋白的表达与单纯DHT组比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论DHT可诱导HaCaT细胞SREBP-1cmRNA和蛋白的表达。 黄秋红 周炳荣 王丹 郭娴菲 骆丹关键词:双氢睾酮 HACAT细胞 信号转导 沉默miRNA-23a对UVB诱导成纤维细胞慢性光损伤的影响 被引量:1 2014年 目的 探讨沉默miRNA-23a对UVB照射所致成纤维细胞慢性光损伤的影响。 方法 将成纤维细胞分为空白对照组、UVB光损伤组、miRNA-23a 沉默组、UVB光损伤 + miRNA-23a沉默组。SA-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)化学染色测定老化程度,流式细胞仪检测细胞周期,实时PCR法检测p53、p16、p21 mRNA的表达,免疫印迹法检测p53、p16、p21的蛋白表达量。 结果 UVB光损伤组与UVB光损伤 + miRNA-23a沉默组的SA-β-Gal细胞蓝染阳性率分别为(94.60 ± 2.58)%、(48.18 ± 3.70)%,两组间差异有统计学意义(P 〈 0.05)。G1期阻滞率分别为(85.06 ± 1.52)%、(57.48 ± 2.01)%,两组间差异有统计学意义(P 〈 0.05)。UVB光损伤 + miRNA-23a沉默组的p53、p16、p21 mRNA及蛋白表达量与UVB光损伤组相比,差异均有统计学意义(P 〈 0.05)。 结论 沉默miRNA-23a对UVB诱导成纤维细胞衰老有抑制作用,而miRNA-23a对下游衰老相关信号分子的抑制可能是其机制之一。 张家安 周炳荣 胡燕燕 吴维 尹慧彬 张倩 郭娴菲 骆丹关键词:成纤维细胞 微RNAS 细胞衰老 基于多芳环多吡啶配体的单功能铂配合物DNA结合研究 2015年 目的验证配体2,4,6-三[二(2-吡啶甲基)-氨甲基苯基]-1,3,5-三嗪(L4)配合物的DNA结合能力。方法合成一个多芳环多吡啶配体2,4,6-三[二(2-吡啶甲基)-氨甲基苯基]-1,3,5-三嗪(L4)。配体(L4)与Pt(DMSO)2Cl2反应得到配合物4,表征配合物,通过紫外、荧光和凝胶电泳的方法研究了配合物4的DNA结合能力。结果紫外和荧光实验表明该配合物均可与DNA嵌入结合,结合常数分别为2.1×104M-1、2.78×107M-1。凝胶电泳实验表明配合物可使DNA超螺旋形式完全解旋,有效扰乱DNA的二级结构。结论配体2,4,6-三[二(2-吡啶甲基)-氨甲基苯基]-1,3,5-三嗪(L4)配合物与DNA具有较强的结合能力,可以缓慢结合形成DNA的加合物,并且能够有效扰乱DNA构象。 陈司汉 周炳荣关键词:DNA结合 中波紫外线诱导的提前衰老成纤维细胞上清液对人真皮成纤维细胞增殖、老化及自噬的影响 被引量:3 2015年 目的观察中波紫外线诱导的提前衰老的成纤维细胞条件培养液对人真皮成纤维细胞增殖、老化及自噬的影响。方法取健康青少年男子环切术后包皮进行人真皮成纤维细胞的分离培养。将中波紫外线诱导的提前衰老的成纤维细胞条件培养液培养成纤维细胞设为实验组,并设立对照组即正常成纤维细胞条件培养液培养成纤维细胞。处理20d后,用CCK8法检测细胞增殖活性,EDU(5-乙炔基-2,脱氧尿嘧啶核苷)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,β半乳糖苷酶染色计算衰老细胞百分比,吖啶橙染色检测细胞自噬,Western印迹法及间接免疫荧光检测自噬相关蛋白LC3-B的表达水平。数据采用GraphpadPrism5软件分析,两组间比较采用成组t检验。结果实验组成纤维细胞增殖活力(0.831±0.017)明显低于对照组(0.973±0.017),但EDU染色及流式细胞仪检测结果均显示,实验组s期细胞百分比明显高于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。β半乳糖苷酶染色显示,实验组成纤维细胞阳性率(25.710%±0.304%)高于对照组(5.257%±1.023%),差异有统计学意义(t=19.170,P〈0.05)。吖啶橙染色结果显示,实验组成纤维细胞红色荧光量(14.287±2.269)低于对照组(29.614±2.650)。Western印迹及间接免疫荧光结果均显示,实验组成纤维细胞LC3-B表达量明显高于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论中波紫外线诱导的提前衰老成纤维细胞的条件培养液可降低成纤维细胞的自噬及增殖,并加速其老化。 王申 周炳荣 骆丹 张家安 刘娟 张丽超 易飞 吴红巾 栗丹 胡燕燕关键词:紫外线 成纤维细胞 细胞衰老 自噬 细胞增殖