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吡咯喹啉醌产生菌的筛选及其培养基优化被引量：4: 2014年; 吡咯喹啉醌(PQQ)是具有重要生理功能的氧化还原酶辅酶,从化工污水中筛选到一株蛋白分泌量低的PQQ生产菌株FJNU-6。经形态学观察、生理生化测定和16S r DNA序列分析,甲基营养菌FJNU-6鉴定为脱氮生丝微菌(Hyphomicrobium denitrificans)。采用部分析因和中心组合实验方法对培养基进行优化,优化的培养基(g/L)为:甲醇12,(NH4)2SO41.68,KH2PO43.01,Na2HPO49.89,Mg SO4·7H2O 1.1,微量元素液和维生素液添加量分别为0.9 m L/L和1.1 m L/L,培养温度为30℃,最佳发酵培养时间为88 h。H.denitrificans FJNU-6在此优化条件下培养液中蛋白含量只有32.17 mg/L,而PQQ产量可达121.43 mg/L,比优化前提高了2.95倍。因此,H.denitrificans FJNU-6是一株具有工业化生产PQQ前景的新资源。; 杨诗颖陈佳柯崇榕黄建忠; 关键词：甲基营养菌吡咯喹啉醌发酵优化

裂殖壶菌菌株FJU-512油脂提取的细胞破壁工艺被引量：3: 2016年; 裂殖壶菌(Schizochytrium)是目前用于商业化生产二十二碳六烯酸(DHA)的高产菌种之一,由于DHA属于胞内油脂,因此对其进行充分破壁是工业化提取DHA的关键工序.研究了酸热法、碱热法、超声波法以及酶法对裂殖壶菌细胞破壁的影响,考察了不同破壁方法提取得到的总油脂及DHA产量,结果表明酶法是最优破壁方法.继而探讨不同单一酶破壁的总油脂产量,并将破壁效果最好的碱性蛋白酶和其他酶进行比较,确定最佳用酶为碱性蛋白酶.为进一步完善酶法破碎裂殖壶菌细胞的效果以提高总油脂产量,对碱性蛋白酶酶解的温度、pH、时间以及酶用量等条件进行优化.正交试验结果表明,碱性蛋白酶最佳酶解条件为酶用量2.0%,温度55℃,pH 10.0,酶解时间2.0h.在此优化条件下,裂殖壶菌菌株FJU-512的每克菌体细胞总油脂产量达到0.458 6g.; 何文胜王灿杨诗颖; 关键词：裂殖壶菌油脂

卷枝毛霉△6-脂肪酸脱饱和酶基因的敲除及功能研究: 2017年; γ-亚麻酸(γ-Linolenic acid,GLA)是人体所必需且具有多种生理功能的一种重要多不饱和脂肪酸。研究表明,卷枝毛霉等GLA生产菌株中△6-脂肪酸脱饱和酶(△6-Fatty acid desaturase,FAD6)是合成γ-亚麻酸的关键和限速酶,然而GLA是否惟一通过△6-脂肪酸脱饱和酶途径合成则目前还没有报道。作者以卷枝毛霉Mucor circinelloides EIM10 sp.为研究对象,以其FAD6基因的5'端启动子和3'端终止子为同源臂,潮霉素B抗性基因为筛选标记,构建了M.circinelloides EIM10 sp.△6-脂肪酸脱饱和酶FAD6的敲除载体p UMCD6-Hm B,转化进入制备好的原生质体中成功地敲除了FAD6基因,发现FAD6基因缺陷菌株GLA质量浓度比野生型对照菌株降低了50%以上,但GLA并没有完全消失,说明卷枝毛霉生物体内还有其他代谢途径可以将碳源转化为GLA。; 何文胜陈清霞邹丽梅曹晓祁峰; 关键词：Γ-亚麻酸基因敲除

裂殖壶菌产DHA发酵培养基的优化被引量：7: 2015年; 从成本控制和发酵罐扩大培养监测控制方面考虑,优化了裂殖壶菌(Schizochytrium sp.FJU-512)产DHA发酵培养基。利用单因素实验和正交实验优化了发酵培养基碳氮源组分,均匀设计实验优化了无机盐组分。最佳产DHA发酵配方为葡萄糖120g/L,酵母浸膏5g/L,谷氨酸钠20g/L,硫酸铵0.25g/L,海水晶25g/L,KH2PO44.0g/L,Mg SO4·7H2O0.5g/L,Ca CO35.0g/L,Na2SO43.0g/L,Fe SO4·7H2O 20mg/L,维生素B10.005g/L,维生素B120.005g/L。优化后,裂殖壶菌DHA产量到达13.83g/L,提高了22%,且培养基成本降低40%左右。; 王灿张伟张明亮黄建忠; 关键词：裂殖壶菌碳氮源正交实验发酵培养基 DHA

裂殖壶菌可溶性蛋白的提取及双向电泳方法的建立被引量：1: 2012年; 裂殖壶菌Schizochytrium是目前用于商业化生产DHA的高产菌株之一。研究比对了多种裂殖壶菌可溶性蛋白的提取方法及纯化方式,并对IPG胶条的pH范围、胶条长度等双向电泳条件进行了优化。结果表明,裂殖壶菌可溶性蛋白的制备采用玻璃珠破碎结合TCA/丙酮沉淀的方法,并采用长度为24 cm,pH 3～10的IPG胶条进行等电聚焦效果最佳。并利用此电泳体系初步分析了37℃高温培养对裂殖壶菌可溶性蛋白表达的影响。; 高媛媛刘静黄建忠; 关键词：裂殖壶菌可溶性蛋白温度

分段控制溶氧提高裂殖壶菌生产DHA效率: 2018年; 为提高裂殖壶菌发酵生产DHA的水平,研究发酵溶氧水平对菌体生长,油脂含量及组成和DHA积累的影响,在摇瓶水平上,通过控制装液量和转速的相对定性的方法研究相对溶氧对裂殖壶菌发酵培养的影响,在此基础上,发酵罐中利用搅拌和通气控制溶氧对裂殖壶菌代谢进行调控。结果表明,在摇瓶发酵中,装液量为50 m L/250 m L时裂殖壶菌油脂含量、DHA产量及生物量均为较佳水准,分别为15. 77,7. 70,39. 50 g/L。当溶氧水平太高或者太低的时候,对DHA的积累都会产生不利影响。转速为200 r/min时裂殖壶菌油脂含量、DHA产量及生物量为最高,分别为15. 68,7. 49,38. 66 g/L。在发酵罐发酵水平上考察相对低溶氧和相对高溶氧对裂殖壶菌发酵的影响,发现随着搅拌转速的提高,油脂积累量、DHA产量和菌体生物量均得到很大提高,但过高的转速(600 r/min)剪切力较大,不利于细胞积累。通过实验发现过高或过低的溶氧水平对DHA的积累会产生不利的影响,这与摇瓶培养裂殖壶菌所得结果相符,而分段控氧策略利于菌体生长和油脂积累,下一步将继续优化分段调控策略,对裂殖壶菌的工业化发酵生产DHA奠定理论与实践基础。; 张明亮王进发祁峰江贤章黄建忠李力; 关键词：裂殖壶菌溶氧油脂含量

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福建省自然科学基金(2011H6007)