国家自然科学基金(31000853)
- 作品数：7 被引量：44H指数：4
- 相关作者：尹姣曹雅忠李克斌席景会田雷雷更多>>
- 相关机构：中国农业科学院植物保护研究所吉林大学沧州市农林科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 酵母双杂交技术在互作组学中的研究进展
- 本文介绍了研究蛋白质与蛋白质相互作用的筛选技术。解析了互作组学在系统生物学中的重要性。重点介绍了酵母双杂交技术及其衍生技术的原理,并提出了其具有的局限性。同时,对酵母双杂交技术进行了展望。
- 王冰尹姣李克斌曹雅忠
- 关键词：酵母双杂交技术
- 同源建模和分子对接方法的应用与发展
- 蛋白质所具有的功能在很大程度上取决于其空间结构,其中同源模建和分子对接是研究蛋白质空间结构的重要工具。同源模建法根据蛋白序列的相似性构建模拟蛋白的结构,是目前最成熟的预测蛋白结构的一种方法,而分子对接是研究分子间(如配体...
- 庄绪静曹雅忠李克斌尹姣
- 关键词：同源建模分子对接蛋白结构
- 文献传递
- 基于COⅠ基因对三种大黑鳃金龟分类地位的研究被引量：5
- 2013年
- 本试验将江南大黑鳃金龟Holotrichia gebleri Faldermann分别与东北大黑鳃金龟Holotrichia diomphalia Bates、华北大黑鳃金龟Holotrichia oblita Faldermann进行了杂交试验,得到了F1代成虫,自交得到了F2代,表明F1代的雌雄虫具有正常的生殖力,3种金龟子之间不存在生殖隔离。对这3种大黑鳃金龟的COⅠ基因进行了扩增与测序并构建了系统进化树,结果显示:江南大黑、华北大黑和东北大黑3种鳃金龟的遗传距离相近,分类地差别不显著,与外类群的暗黑鳃金龟Holotrichia parallela Motschulsky在遗传距离和分类地位上差异显著。以上结果表明,江南大黑鳃金龟、东北大黑鳃金龟和华北大黑鳃金龟应为同一个物种的不同地理类群。
- 刘春琴田雷雷李克斌王庆雷席景会冯晓洁席国成尹姣曹雅忠
- 关键词：大黑鳃金龟杂交COI基因
- 利用两种不同引物扩增金龟子COⅠ序列片段的研究与对比被引量：4
- 2013年
- 利用两类不同的引物,即通用引物(L1490,H2198)与特异引物(Pat,Jerry)分别对4种常见金龟子线粒体细胞色素C氧化酶I(COⅠ)基因片段序列进行扩增和测序,获得长度为689 bp与775 bp的序列。对测序结果进行遗传距离分析,并构建了4种金龟子系统进化树。结果表明,特异引物扩增序列的遗传距离在种内稳定性与种间的差异性都明显优于通用引物扩增序列,利用特异引物扩增序列所构建的系统进化树最符合实际情况,因此利用特异引物扩增序列更能够准确的对金龟子进行分类。
- 田雷雷席景会李克斌孙昊雨尹姣曹雅忠
- 关键词：金龟子COI基因特异引物通用引物
- 昆虫化学感受蛋白研究进展
- 昆虫化学感受蛋白(chemosensory protein,CSPs)广泛存在于昆虫各种化学感受器的淋巴液中,是昆虫在长期衍化过程中所形成的一类分子量较小的、酸性的、可溶性蛋白。这类蛋白具有高度保守的区域结构,相对分子量...
- 关丽李克斌席景会尹姣曹雅忠
- 关键词：昆虫化学感受蛋白
- 文献传递
- Cry8Ga1蛋白对华北大黑鳃金龟幼虫主要酶活性的影响被引量：3
- 2013年
- 华北大黑鳃金龟[Holotrichia oblita(Faldermann)]是一种危害严重的地下害虫,Cry8Ga1蛋白对其幼虫具有明显杀虫活性。本文比较了华北大黑鳃金龟幼虫取食Cry8Ga1蛋白后6种酶活性的变化,发现取食高浓度(5×LC50,50.767μg/g土)Cry8Ga1蛋白幼虫的总蛋白酶、类胰凝乳蛋白酶、乙酰胆碱酯酶(AChE)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)以及氨肽酶(APN)的活性较对照均有不同程度的升高,在大多数处理时段差异显著(P<0.05),其中高浓度处理组的GST酶活性在12h后升高倍数最大,是同时段对照的23.37倍;而取食低浓度(0.5×LC50,5.076 7μg/g土)Cry8Ga1蛋白时,乙酰胆碱酯酶和氨肽酶活性无明显差异(P≥0.05)。类胰蛋白酶在整个试验中活性变化与对照相比仅有个别处理时段存在差异,由此推断,类胰蛋白酶不是华北大黑鳃金龟幼虫对Cry8Ga1蛋白的主要活化酶。
- 谭树乾尹姣李克斌束长龙刘春琴曹雅忠仵均祥
- 关键词：大黑鳃金龟BT酶活性
- 华北大黑鳃金龟对20种植物源挥发物的电生理和行为反应被引量：24
- 2011年
- [目的]发掘能影响华北大黑鳃金龟行为反应的植物挥发性物质,以利用化学生态学技术调控华北大黑鳃金龟的行为,达到绿色防控的目的。[方法]采用触角电位(EAG)及Y型嗅觉仪行为测定技术,对20种植物挥发物进行筛选。[结果]在10μg/μL浓度刺激下,顺-2-己烯醇、反-2-己烯醇、乙酸顺-3-己烯酯、辛醛和苯乙醇能引起华北大黑鳃金龟触角较强的电位反应,总体趋势雌虫反应大于雄虫。行为测试中,反-2-己烯醇、芳樟醇、乙酸顺-3-己烯酯、1-己醇、邻氨基苯甲酸甲酯吸引能力都显著高于对照正己烷,但辛醛和苯乙醇对华北大黑鳃金龟的吸引作用低于对照正己烷,并呈极显著差异(p<0.01)。[结论]华北大黑鳃金龟对本文所选的部分植物源挥发物对有显著的电生理和行为反应,该结果可为开发对其的田间引诱剂或驱避剂提供一定的理论依据。
- 邓思思尹姣曹雅忠罗宗秀王伟李克斌
- 关键词：华北大黑鳃金龟植物挥发物EAG反应
- 酵母双杂交筛选华北大黑鳃金龟触角均一化cDNA文库被引量：2
- 2013年
- 昆虫错综复杂的嗅觉系统在昆虫寻找寄主、交配、产卵以及逃避行为中起到了至关重要的作用。因此,对昆虫嗅觉感受机理的研究将有助于揭开昆虫感受和识别环境中的气味物质并引起相关行为反应的秘密。为了更多地了解华北大黑鳃金龟Holotrichia oblita Faldermann嗅觉相关蛋白互作机制,本实验利用DUALhunter Starter Kits酵母双杂交筛选试剂盒,构建了华北大黑鳃金龟气味结合蛋白OBP2诱饵载体,筛选了华北大黑鳃金龟触角酵母双杂交系统均一化的cDNA文库。通过β-半乳糖苷酶活性检测以及GenBank中Blast比对分析,以OBP2为诱饵鉴定出6个阳性互作物。我们推测其中的一种较强的阳性互作物凝固酶原可能是华北大黑鳃金龟在嗅觉识别过程中的相关蛋白。
- 王冰尹姣李克斌曹雅忠
- 关键词：华北大黑鳃金龟气味结合蛋白酵母双杂交文库筛选
- 华北大黑鳃金龟气味受体OrCo基因的克隆及序列分析被引量：4
- 2012年
- 嗅觉受体OrCo(olfactory receptor coreceptor)在不同昆虫体内高度保守,克隆华北大黑鳃金龟[Holotrichiaoblita(Falderman)]OrCo基因可以为进一步探索受体在气味识别过程中所起的作用和功能提供基础。本研究利用RT-PCR和RACE方法,克隆获得华北大黑鳃金龟OrCo受体基因cDNA全长序列。将该基因命名为Hobl/Or-Co。序列分析结果显示,Hobl/OrCo全长共1 598bp,开放阅读框全长1 434bp,编码477个氨基酸,序列中有7个跨膜区和高度保守的C端区域。Hobl/OrCo基因的氨基酸序列与近缘种铅灰齿爪鳃金龟嗅觉受体的同源性高达95.39%,与已经报道的其他昆虫的嗅觉受体同源性在76%以上,特别是在C端几乎完全一致。
- 王冰尹姣李克斌曹雅忠
- 关键词：华北大黑鳃金龟嗅觉受体基因克隆
- 华北大黑鳃金龟气味结合蛋白HoblOBP2的生物信息学分析被引量：7
- 2013年
- 探讨应用生物信息学技术预测华北大黑鳃金龟触角气味结合蛋白HoblOBP2三维结构及其与苯甲酸己酯的结合模式。利用生物信息学相关工具和网站预测HoblOBP2的基本性质,并对其三维结构进行同源建模后发现HoblOBP2的三维结构具有与昆虫普通气味结合蛋白结构的共同特点,即6个α螺旋,其中除了α2在外的5个α螺旋形成疏水结合口袋,3对二硫键起着稳定蛋白结构的作用。将苯甲酸己酯分子对接到HoblOBP2的活性区域,预测蛋白质与气味分子的结合模式,经分析可知蛋白质与气味分子主要通过范德华力和疏水作用相互影响,蛋白内部形成分子内氢键,根据蛋白与气味分子间的结合特性推测HoblOBP2与气味分子结合的三个关键结合位点分别为:LEU73,THR54和VAL137。
- 庄绪静尹姣李克斌曹雅忠
- 关键词：气味结合蛋白生物信息学同源建模分子对接
